Разработка технологии иммобилизации B-галктозидазы и оценка её биологического действия на молоко и некоторые молочные продукты
Дипломная работа - Разное
Другие дипломы по предмету Разное
?ачала опыта. Таким образом, удалось добиться снижения концентрации лактозы в невареном сгущенном молоке на 31,92% при внесении максимальной концентрации фермента.
. Добавить в исследуемое вареное сгущенное молоко Семь гномов раствора фермента в?галактозидазы в 3-х концентрациях и определить изменение содержания лактозы через 3, 6 и 24 часа. Данные результатов исследования заносим в таблицу.
Таблица 2.11 Изменение содержания лактозы в сгущенном молоке Семь гномов под влиянием в?галактозидазы
ГруппаВремя измерения, ч13624Контроль % % Р Р4,000,13 100 100 3,930,11 100 98,25 >0,053,860,08 100 96,51 >0,053,780,06 100 94,50 >0,051 % % Р Р2,310,09 57,75 100 0,051,3250,07 34,20 69,47 <0,01 <0,051,140,24 30,16 60,00 <0,001 <0,05
Примечания:
Контроль - концентрация лактозы в сгущенном молоке Семь гномов.
- концентрация лактозы в сгущенном молоке Семь гномов с 0,01%-ной в-галактозидазой.
- концентрация лактозы в сгущенном молоке Семь гномов с 0,02%-ной в-галактозидазой.
- концентрация лактозы в сгущенном молоке Семь гномов с 0,03%-ной в-галактозидазой.
Р - достоверность относительно контроля.
Р - достоверность относительно первого часа наблюдения.
% - процент падения лактозы относительно контрольной пробы.
% - процент падения лактозы относительно первого часа наблюдения.
Выводы: Содержание лактозы в исследуемом продукте - сгущенном вареном молоке Семь гномов находится в пределах норм и с течением времени практически не изменяется. За сутки показатели изменились с 4,000,13 до 3,780,06, что составляет 94,5% от первоначального. При внесении же фермента содержание лактозы резко уменьшается как с течением времени, так и с увеличением концентрации. При добавлении 0,01%-го раствора в?галактозидазы через сутки содержание лактозы упало с 2,310,09 до 1,710,10, и составила 45,24% от концентрации лактозы в сгущенном молоке без фермента. Наиболее заметных результатов удалось достигнуть, прибавляя 0,03%-й раствор в?галактозидазы. Через 24 часа после внесения фермента содержание лактозы снизилось с 1,900,18 до 1,140,24. Таким образом, концентрация лактозы в этой группе составила 30,16% от контрольной, а с течением времени снизилась на 40%.
Очевидно, что 0,01% и 0,02%-ные растворы в?галактозидазы менее эффективны, чем 0,03%-й раствор. Однако все три концентрации фермента дают значительное снижение содержания лактозы по сравнению со сгущенным молоком без внесенного фермента.
Вторая серия экспериментов. Подготовка носителей для иммобилизации. Первоначально для иммобилизации в-галактозидазы были выбраны следующие носители: силикагель, акриламид, крахмал, асбестовое волокно, лавсановое волокно, древесные опилки.
Акриламид широко используется для иммобилизации. Однако из-за отсутсвия N,N-метиленбисакриламида (или бис-акриламида) , который в полиакриламидном геле отвечает за образование поперечных сшивок, использование его в данном случае невозможно.
Силикагель по своей химической природе является оксидом кремния: Si(OH). Он химически неактивен, имеет хорошие адсорбционные свойства. Преставляет собой частицы округлой формы с диаметром 0,03-0,4см.
Крахмал отличается значительной гидрофильностью, образует достаточно плотные гели, и сам по себе не вступает в реакции с ферментом. Однако 3% и 5% крахмальные гели растворились при попытке иммобилизации в растворе фермента, а 10% гель не показал желаемых результатов.
Древесные опилки - достаточно редкий носитель для иммобилизации. Однако опилки обладают большой удельной поверхностью, гидрофильностью, они дешевы, поэтому представляют интерес для исследования.
Асбест (3МgО2SiO22H2O) - гидросиликат магния, по химическому составу близкий хорошо известному всем минералу тальку (3МgО4SiO2H20), т.е. с химической точки зрения он абсолютно безвреден для организма. Представляет собой тончайшие полые трубочки-фибриллы диаметром 2,610-5мм, кристаллы напоминают мягкие целлюлозные волокна хлопковой ваты. Будучи материалом неорганическим, волокна асбеста не горят и выдерживают высокие температуры. Лишь при нагреве до 700 С они теряют химически связанную воду и делаются хрупкими. Удельная поверхность асбеста 20м/г.
Асбест - это собирательное товарное название группы минералов, которые встречаются в природе в виде пучков волокон. Выделяются две группы минералов, отличающихся друг от друга по химическому составу, технологическим свойствам и степени влияния на организм человека - серпентиниты и амфиболы, в коммерческом использовании именующихся общим названием "асбест". Научные исследования, проведенные экологическими организациями, привели к нескольким основным выводам:
- влияние различных видов асбеста на организм человека различно. Наибольшую опасность представляли амфиболы (амозит, крокидолит, антофиллит, тремолит). В настоящее время добыча и использование этого вида асбеста запрещена во всем мире;
хризотил представляет наименьшую опасность, даже по сравнению с искусственными заменителями и натуральными волокнам (целлюлоза), так как быстрее других волокон выводится из легких;
наибольшую опасность представляла технология напыления асбеста с налипанием (рыхлый асбест) на металлические конструкции зданий, судов и т.п. для целей пожаро- и теплоизоляции. Эта техн