Geum.ru

Матер І а л и науково-практичної конференції з міжнародною участю 1-2 березня 2007 року Під загальною редакцією проф. Малого В. П., проф. Кратенко І. С. Харків 2007

Вид материалаДиплом

Содержание


АНТИОКСИДАНТНІ ВЛАСТИВОСТІ ЛАКТУЛОЗИ Митник З.М.
УРОВНИ ЦИТОКИНОВ И АНТИТЕЛ К ПЕЧЕНОЧНОМУ ЛИПОПРОТЕИНУ ЧЕЛОВЕКА У БОЛЬНЫХ ХРОНИЧЕСКИМ ГЕПАТИТОМ С Мицура В.М., Демчило А.П., Жаво
Подобный материал:
1   ...   85   86   87   88   89   90   91   92   ...   150

АНТИОКСИДАНТНІ ВЛАСТИВОСТІ ЛАКТУЛОЗИ

Митник З.М.

Клінічна лікарня „Феофанія” Державного управління справами, м. Київ


Враховуючи патогенетичні механізми прогресування хронічних дифузних захворювань печінки, у корекції цих станів повинні використовуватися препарати, здатнi позитивно впливати й регулювати оксидазно-антиоксидантний статус, активно знижувати рiвень амоніаку в кровi та iстотно моделювати перебiг хронiчної портосистемної енцефалопатії (ПСЕ). Одним із таких препаратів є лактулоза (4--галактозидо-(1,4)-d-фруктоза).

Ми дослідили вплив лактулози на стан оксидазно-антиоксидантної системи при корекції синдрому ПСЕ у хворих із хронічними захворюваннями печінки.

Обстежено 86 хворих на вірусний В і С цироз печінки у віці від 37 до 68 років, яким призначали лактулозу по 60-90 мл/день залежно від виразності симптомів ПСЕ. Для вивчення надслабкого свiтiння сироватки кровi реєстрували спонтанну хемiлюмiнесценцiю (ХЛ) та iндуковану iонами двовалентного залiза. Для визначення стану антиоксидантного захисту дослiджували активнiсть церулоплазмiну (Цп), насиченiсть трансферину залiзом (Тф), сульфгiдрильнi групи (СГГ), сумарну антиокислювальну активнiсть (САОА) плазми кровi за методом D.L.Al-Timimi та T.L.Dormandy (1977).

При застосуваннi лактулози встановлена вiрогiдна позитивна динамiка всiх хемілюмінесцентних показникiв. Свiтлосума спонтанного свiтiння (So) зменшувалася на третину i сягала показникiв контрольної групи, амплiтуда швидкого спалаху (h) також нормалiзувалася, зменшуючись на 43,64%; повертався до норми i тангенс кута  (знижувався на 25,3%). Регресували пiд впливом терапiї свiтлосума iндукованого свiтiння (SFe)  на 56,45% та амплiтуда сповiльненого спалаху (H)  на 53,01%. У процесi лiкування лактулозою найвагоміших змiн зазнали параметри ХЛ, якi характеризують iнтенсивнiсть ендогенного перекисного окислення ліпідів (ПОЛ), концентрацiю його токсичних продуктiв у сироватцi кровi, а також ступiнь окислювальностi лiпiдiв. У хворих на тлі прийому лактулози відзначено зростання активності Цп поряд зі зменшенням насиченості Тф залізом і зростанням антиоксидантної потужності системи Цп-Тф. Загальна сума антиокислювачiв (САОА) пацiєнтiв також поновлюється, їх буферна антиоксидантна ємнiсть зростає на 31,19%. Щодо вмісту СГГ нами не зареєстровано вірогідних змін. Отже, застосування лактулози призводить до стабiлiзацiї гомеостазу антиоксидантних систем, зокрема системи Цп-Тф, окисно-вiдновний потенцiал якої вагомо зростає.

Встановлена нами чiтка тенденцiя до нормалiзацiї параметрiв ПОЛ у хворих із хронiчними захворюваннями печiнки, ймовiрно, пов’язана з усуненням iндукуючого процеси лiпопероксидацiї впливу сполук амонiю, амоніаку і iнших токсичних продуктiв, якi нагромаджуються в органiзмi цих хворих. Водночас спостерігали зменшення ознак астеновегетативного, цитолітичного і холестатичного синдромів та синдрому імунного запалення.

Як відомо, лактулоза володіє численними ефектами, що забезпечило її широке використання в гепатологічній клініці, насамперед при печінковій енцефалопатії, що виникає при цирозах печінки у стадії судинної декомпенсації, набряково-асцитичному синдрому, варикозному поширенні вен стравоходу і кардії, після оперативного лікування цирозів печінки. Включення лактулози до комплексного лікування хворих на цирози печінки дозволяє корегувати один із провідних патологічних синдромів - оксидазно-антиоксидантного дисбалансу.


УРОВНИ ЦИТОКИНОВ И АНТИТЕЛ К ПЕЧЕНОЧНОМУ ЛИПОПРОТЕИНУ ЧЕЛОВЕКА У БОЛЬНЫХ ХРОНИЧЕСКИМ ГЕПАТИТОМ С

Мицура В.М., Демчило А.П., Жаворонок С.В., Красавцев Е.Л.

УО «Гомельский государственный медицинский университет»


Продукция иммунными клетками различных цитокинов является важным показателем функционального состояния системы иммунитета при хроническом гепатите С (ХГС). Антитела к специфическому печеночному липопротеину человека, анти-ЛПЧ, (liver specific protein) являются органоспецифическими антителами, направленными против нативных печеночных антигенов. Клиническое значение анти-ЛПЧ и связь их с косвенными маркерами иммунизации при хроническом вирусном гепатите С недостаточно изучена, коммерческие диагностические наборы для выявления анти-ЛПЧ отсутствуют.

Цель исследования: изучить уровни цитокинов: интерферона гамма (ИФН-γ), интерлейкинов (ИЛ): ИЛ-1α, ИЛ-4 и анти-ЛПЧ в сыворотках крови больных ХГС.

Материалы и методы. Исследовалось содержание цитокинов ИЛ-1α, ИФН-γ, ИЛ-4 в сыворотках крови 34 больных ХГС в возрасте от 18 до 62 лет (средний возраст 34,8±1,8). Диагноз у всех больных был подтвержден обнаружением антител к HCV (анти-HCV) и РНК HCV методом полимеразной цепной реакции.

Изучение цитокинов проводилось с использованием иммуноферментных тест-систем фирмы «Цитокин» (Россия). Нормальными значениями уровней цитокинов в сыворотке крови считались 0–50 пг/мл. В качестве контроля использовались 10 образцов сыворотки доноров. Определение антител к ЛПЧ производилось методом ИФА с помощью разработанной нами тест-системы (Демчило А.П., Жаворонок С.В.).

Результаты и их обсуждение. Из 34 больных анти-ЛПЧ выявлены у 10 больных (29,4%), у остальных 24 больных (70,6%) данные антитела не выявлялись.

Методом иммуноферментного анализа проведено количественное определение цитокинов в исследуемых сыворотках крови в соответствии с инструкциями по применению тест-систем. Было выявлено, что у больных ХГС в ряде случаев регистрировались повышенные уровни цитокинов (свыше 50 пг/мл): ИЛ-4 – у 4 больных (11,8%), ИФН-γ – у 8 (23,5%), ИЛ-1α – у 19 больных (55,9%). Уровни Тх2-цитокина ИЛ-4 были повышены только у больных без анти-ЛПЧ (16,7%), в то время как остальные цитокины чаще выявлялись у лиц с анти-ЛПЧ (статистически значимо для ИФН-γ (р=0,031) и ИЛ-1α (р=0,011).

Далее нами оценивалась нормальность распределения уровней цитокинов у больных ХГС с помощью теста Колмогорова-Смирнова. Во всех случаях уровни р<0,01, что свидетельствует об отсутствии нормального распределения уровней цитокинов. Поэтому для дальнейшего сравнения был использован непараметрический критерий Манна-Уитни.

Проводилось изучение сывороточных уровней цитокинов у доноров и больных ХГС. У лиц с анти-ЛПЧ (n=10) медианы уровней цитокинов составили: ИЛ-4 25,18 пг/мл, ИФН-γ – 60,49 пг/мл, ИЛ-1α – 95,94 пг/мл. У лиц с отсутствием анти-ЛПЧ (n=24) данные показатели составили: ИЛ-4 – 18,17 пг/мл (р=0,88), ИФН-γ – 13,82 пг/мл (р=0,045), ИЛ-1α – 30,52 пг/мл (р=0,023).

Как видно из полученных данных, у больных ХГС уровни Тх1-цитокинов (ИФН-γ и ИЛ-1α) были значимо выше в группе больных с анти-ЛПЧ, что свидетельствует о важной роли аутоиммунных нарушений у больных ХГС. Вероятно, признаки системного воспаления с повышением концентраций Тх1- цитокинов в сыворотке крови связаны с процессами разрушения гепатоцитов (иммунного цитолиза), чему способствует и появление органоспецифических антител (анти-ЛПЧ). Для выявления возможной взаимосвязи между наличием анти-ЛПЧ и основным показателем цитолиза – аланинаминотрансферазой (АЛТ) проведено сравнение уровней АЛТ в зависимости от выявления анти-ЛПЧ. У лиц с наличием анти-ЛПЧ (n=10) уровни АЛТ были повышены у 8 (80,0%), медиана АЛТ – 0,53 мккат/л. У лиц с отсутствием анти-ЛПЧ (n=24) уровни АЛТ были повышены у 22 (91,7%), медиана АЛТ – 0,83 мккат/л. При сравнении данных показателей с помощью методов непараметрической статистики значимых различий не выявлено (р=0,33 по точному критерию Фишера и р=0,07 с помощью теста Манна-Уитни).

Таким образом, антитела к ЛПЧ, как маркер аутоиммунитета, выявлены у 29,4% больных ХГС, что говорит о важности аутоиммунных нарушений в патогенезе ХГС. Количество повышенных (более 50 пг/мл) уровней Тх1- цитокинов (ИФН-γ и ИЛ-1α) было больше, и их уровни были статистически значимо выше у лиц с наличием анти-ЛПЧ (р<0,05). При сравнении уровней АЛТ в зависимости от выявления анти-ЛПЧ значимых различий не выявлено (р>0,05), что говорит о необходимости комплексного подхода в определении выраженности синдрома цитолиза.

Взаимосвязь повышения уровней Тх-1 цитокинов и появления антител к ЛПЧ у больных ХГС требует дальнейшего изучения. Изменение уровней провоспалительных и противовоспалительных цитокинов у больных ХГС связано, в том числе, и с аутоиммунными механизмами поражения печени и может иметь важное диагностическое и прогностическое значение.

Работа выполнена при поддержке Белорусского республиканского фонда фундаментальных исследований, грант № Б05М-188 «Показатели цитокиновой регуляции при хроническом вирусном гепатите С и их изменения в зависимости от получаемой терапии» (научный руководитель – к.м.н. Мицура В.М.).