Geum.ru

Под общей редакцией проф. Малого В. П., проф. Кратенко И. С. Харьков 2008

Вид материалаДиплом

Содержание


Новое производное 18-дегидроглицирретовой кислоты туберкулостатического действия
Перспективы использования полыни цитварной в лечении злокачественных новообразований
Подобный материал:
1   ...   20   21   22   23   24   25   26   27   ...   188

Новое производное 18-дегидроглицирретовой кислоты туберкулостатического действия

Арыстанова Т.А.1, Ирисметов М.П.2, Махова Е.Г.1

Южно-Казахстанская государственная медицинская академия1, Институт химических наук Министерства образования Республики Казахстан им. А.Б.Бектурова2


Стратегия современной химиотерапии туберкулеза строится на использовании монокомпонентных противотуберкулезных препаратов (ПТП) первого ряда высокой степени эффективности и их комбинации с препаратами резервного ряда. Введение массивных доз препаратов создает большие лекарственные нагрузки на организм. ПТП помимо терапевтического эффекта индуцируют развитие синдрома эндогенной интоксикации, приводят к выраженному токсико-аллергическому воздействию на макроорганизм с повреждающим влиянием на многие органные системы. Токсические лекарственные поражения развиваются при использовании наиболее активного базового туберкулостатика изониазида, широко применяемого в различных схемах лечения впервые выявленного и рецидивного туберкулеза. Для коррекции общей и гепатотоксичности, формируемой туберкулезной инфекцией и изониазидом, нами получено новое производное на основе ГИНК, не уступающие по своей активности изониазиду, но со сниженными побочными эффектами. Для проведения направленного синтеза в качестве реакционного синтона использовали полусинтетическое производное корня солодки кислоту 18-дегидроглицирретовую – глидеринин (РК-ЛС-3-№-004555), клинические испытания которого показали высокую терапевтическую эффективность, низкую токсичность при длительном применении, наличие противовоспалительного, иммуномодулирующего, антиоксидантного, минералокортикоподобного эффектов. Синтез нового производного изониазида 3-изоникотиноил гидразон 18-дегидроглицирретовой кислоты (I) осуществили совместно с филиалом ИХН МОН РК им. А. Бектурова (проф. М.П.Ирисметов). Структура синтезированного соединения подтверждена спектрофотометрией в ИК-, УФ- области, ИК-спектры (√maxKBr ,см-1) I имеют полосы поглощения в области: 1384,7; 1322,2; 1245,9; 1147,5; 1113,9 см-1 – конденсированная система колец, 1731,5; 1662,4 – сопряженная кето-группа, двойная связь, 3276,7 (NH), 1552,8-1518,9 (N=C), 2949,0 - 2868,5 см-1 (пиридиновый цикл). УФ-спектры I maх поглощения при 275±2 нм в нейтральной среде, Е1%1см 281,02. В спектрах ЯМР 13С (I) характеристичными являются сигналы атома углерода ГИНК при О=С-NH δс=164,41м.д., углерода пиридинового цикла –С= (δс=141,28 м.д.) и δс=123м.д., атомы углерода при азоте пиридинового цикла δс=152,25 м.д., карбонильной группы С=О и сопряженной с ней двойной связи С=С δс=200,42 м.д., δс=169,26 м.д., δс=128,55 м.д. соответственно. Конъюгированная двойная связь С18=С19 проявляется в виде синглетов δс=123,69 м.д. и δс=143,2 м.д. Триплет в диапазоне с (28,17–28,58) м.д. – сигнал от протонов метильных групп CH3–, а одинарные связи С–С дают сигналы в диапазоне с (10-50) м.д. Исследование туберкулостатической активности лабораторного образца I проводили в сравнении с изониазидом. Бактерицидную активность определяли “in vitro” на музейном штамме Н 37 ку микробиологическим методом двукратных серийных разведении в жидкой среде Школьникова. Минимальная концентрация, подавляющая рост микобактерий для новой субстанции и изониазида, составила 0,1 мкг/мл, что свидетельствует о сохранении туберкулостатической активности изониазида в составе полученного соединения. Изучение острой токсичности в сравнении с таблетками изониазида проводили в опытах на белых крысах по методу Кербера. Результаты опытов показали, что ЛД50 для субстанции I составляет 302 мг/кг, а для таблеток изониазида - 200,6 мг/кг, что показывает снижение острой токсичности полученного соединения I на 33,2%. Изучение сравнительной оценки гепатотоксичности полученных субстанций на биохимические показатели, детоксицирующую функцию печени проводилось на белых крысах. Данные показали, что как в терапевтической (20мг/кг), так и в высокой дозе (200 мг/кг) соединение I незначительно повышает показатели аланинаминотрансферазы (АлТ) в 0,4 раза, аспартатаминотрансферазы (АсТ) – 0,37 раза, щелочной фосфотазы (ЩФ) -0,7 раза в сравнении с таблетками изониазида, которые в дозе 200мг/кг значительно повышают эти показатели- АлТ в 1,3 раза, АсТ - 1,5, ЩФ - 2,5; Влияние на детоксицирующую функцию печени исследовали с помощью бромсульфофталеиновой пробы, которая показала, что содержание бромсульфофталеина в сыворотке крови крыс при введении субстанции I в дозе 200 мг/кг повышается в 3,2 раза; тогда как при введении таблеток изониазида этот показатель повышается в 6,8 раз.

Полученные данные свидетельствуют о снижении токсичности новой субстанции по сравнению с таблетками изониазида.


Перспективы использования полыни цитварной в лечении злокачественных новообразований

Арыстанова Т.А.1, Серикбаева А.Д.1, Ирисметов М.П.2

Южно-Казахстанская Государственная медицинская академия1, Институт химических наук министерства образования науки Республики Казахстан им. А.Б. Бектурова2


Полынь цитварная является ценным эндемичным растительным сырьем, произрастающим только в Казахстане, преимущественно на юге. История открытия, развития, становления Шымкентского АО «Химфарм» непосредственно связана с сантонином – сесквитерпена полыни цитварной, не случайно торговая марка завода ныне именуется «Santo», означающая начальные слоги названия препарата, сделавшего Казахстан известным во всем мире.

Еще в XIX веке завод был известен не только в Российской империи, но и далеко за ее пределами благодаря сантонину, который вырабатывался из Полыни цитварной. А растение это изображено как на старом, так и на новом гербе города Шымкента. Сантонин издавна известен как противоглистное средство, кроме этого широко применяется в народной медицине при злокачественных новообразованиях желудка, пищевода и 12-перстной кишки.

Злокачественные новообразования являются наиболее грозными среди существующих заболеваний, они занимают третье место в структуре общей смертности, показатели которой за последние годы меняются незначительно. Даже в случае успешного избавления от основного опухолевого узла большинство больных погибает от метастазов и рецидивов. Препараты растительного происхождения, обладающие низкой токсичностью, высокой биодоступностью и широким спектром регулирующих эффектов, находят все большее применение в онкологической практике.

В этой связи природный сантонин, обладающий широким спектром фармакологического действия является предметом тщательного скрининга при создании высокоэффективных, безопасных противоопухолевых препаратов из отечественного сырья. Перспективным при этом является создание препаратов на основе сесквитерпена полыни цитварной с фрагментами семи- и тиосемикарбазида, которые широко пользуются в онкологической практике. Такая модификация природного субстрата с синтетическими подандами обеспечит синергизм и поливалентность противоопухолевого действия, а также снизит резистентность опухолевых штаммов.

Синтез новых соединений получали путем нуклеофильного присоединения сантонина с семи- и тиосемикарбазидами с учетом следующих условий: природы растворителя, рН среды, температуры, время нагревания и объем растворов исходных веществ. Контроль за реакцией проводили с помощью тонкослойной хроматографии в подвижной фазе: спирт изопропиловый -вода (50:0,5) для сантонина семикарбазона и метанол - раствор аммония гидроксида конц. - этилацетат - спирт изопропиловый (10:5:20:15), для сантонина тиосемикарбазона. Зоны абсорбции рассматривали в УФ –свете.

На полученной хроматограмме зона абсорбции полученных субстанций находится ниже, чем зона абсорбции его составляющих, что подтверждает структуру полученных соединений с большей молекулярной массой. Указанная методика ТСХ использована нами в дальнейшем для оценки чистоты полученных соединений. На последней стадии выход конечных продуктов составляет 84-86%. Установлена структура полученных субстанций сантонина семи- и тиосемикарбазона, с помощью спектрального и элементного анализа.

Полученные данные по ИК-спектрам подтвердили предполагаемую структуру соединений, в спектре присутствуют характерные полосы поглощения, присущие сантонину и фрагментам семи- и тиосемикарбазида, которые соответствуют метиновым (С-Н), метиленовым (СН2) и метильным (СН3) группам, первичной аминогруппе NH2 , карбонильной группе (С=О) γ-лактонного цикла, карбонильной группе семикарбазонового фрагмента, тионной группе (С=S) тиосемикарбазонового фрагмента.

ЯМР спектральный анализ сантонина семи- и тиосемикарбазона также подтвердил наличие указанных фрагментов. В ЯМР спектре сантонина семи- и тиосемикарбазона наблюдаются сигналы протонов третичной метильной группы, вторичной метильной группы при γ-лактонном цикле.

Изучены физические и химические свойства и определены спецификации качества сантонина семикарбазона и сантонина тиосемикарбазона на лабораторных образцах, полученных в филиале лаборатории Химии природных соединений ИХН МОН РК при АО «Химфарм», в соответствии с требованиями, предъявляемыми к лекарственным субстанциям.

Исследована острая и хроническая токсичность сантонина семи- и тиосемикарбазона. Результаты показали, что субстанции относятся к малотоксичным соединениям. На основании проведенных экспериментальных исследований установлено снижение острой токсичности сантонина семикарбазона на 32,72-48% , сантонина тиосемикарбазона на 38-40% по сравнению с фторурацилом. Не обладают пирогенным, гепатотоксичным, нефротоксичным действием, не оказывает побочного действия на органы желудочно-кишечнего тракта. Установлена противоопухолевая активность в отношении следующих штаммов опухолей: лимфоцитарная лейкемия Р-388, карцинома легких Льюиса (LL), меланома-16, аденокарцинома молочной железы 755 (Са 755), рак шейки матки (РШМ-5), гепатома 22а, карцинома Герена (Са герена), рак молочной железы (РМК-1), альвеоларный слизитый рак печени (РС1), лимфосаркомой Плиса (ЛСП), саркома 45 (С-45).