Матер І а л и науково-практичної конференції з міжнародною участю 1-2 березня 2007 року Під загальною редакцією проф. Малого В. П., проф. Кратенко І. С. Харків 2007
| Вид материала | Диплом |
- Під загальною редакцією проф. Малого В. П. проф. Кратенко I. С. Харків 2006, 5907.56kb.
- Резолюція національної науково-практичної конференції з питань віл-інфекції/сніду, 259.41kb.
- Харківському національному університету ім. В. Н. Каразіна та 80-річчю кафедри інфекційних, 5474.32kb.
- За загальною редакцією, 1428.32kb.
- Ііі Всеукраїнській науково-практичній Інтернет-конференції з міжнародною участю «Дошкільна, 33.37kb.
- А. М. Бойко, доктор пед наук, проф, 3357.78kb.
- Іі міжнародна науковО-практична конференція, 57.44kb.
- Под общей редакцией проф. Малого В. П., проф. Кратенко И. С. Харьков 2008, 8344.22kb.
- Програма підсумкової науково-практичної конференції за міжнародною участю, 1664.98kb.
- Оналізації та перспективи розвитку (матеріали науково-практичної конференції) За загальною, 2639.43kb.
ГЕНОДИАГНОСТИКА ВИРУСА ГЕПАТИТА С В г. ВЛАДИВОСТОКЕ
Шиттер С.В., Толкачева И.А., Забелина Н.Р., Соловьева Д.П.
Владивостокский государственный медицинский университет, Медицинская лаборатория ООО "Эксперт", г. Владивосток
Определение генотипа вируса гепатита С имеет большое значение для прогноза тяжести течения, предсказания эффективности противовирусной терапии, исхода заболевания, так как разный вид гепатита характеризуется различной степенью поражения печени. Кроме прогностических целей расшифровка генотипа интересна в плане этиологии инфекции. Так, субтипы 1а и 3b чаще ассоциируются с "шприцевым" гепатитом у лиц, употребляющих парентеральные наркотики, в то время, как субтип 1b связан с гемотрансфузионным путем передачи.
Таким образом, целью нашего исследования явилось генотипирование вируса гепатита С с определением превалирующего субтипа на территории г. Владивостока.
Определение генотипа проводилось методом полимеразной цепной реакции с использованием тест-систем, позволяющим выявление субтипов 1а, 1b, 2a, 3a.
Нами был проведен анализ результатов обследования 363 человек, направленных на исследование врачом-инфекционистом с установленным диагнозом гепатита С на основании клинического обследования и определения антител иммуноферментным методом. Результаты исследования показали, что у 363 человек из 418 был выявлен один из возможных для определения субтип. Распределение субтипов у обследованных оказалось следующим:генотип 1а выявлен у 4,4% обследованных; генотип 1 b - у 48,6%; генотип 2а - у 35,1%; генотип 3а - у 11,9%.
Таким образом, как показали результаты обследования, наиболее часто встречающийся субтип вируса гепатита С в г.Владивостоке, как и вцелом в России - субтип 1b. На втором месте по частоте встречаемости - субтип 2а, на третьем месте - субтип 3а, на четвертом - субтип 1а.
ИММУНОГИСТОХИМИЧЕСКОЕ МАРКИРОВАНИЕ БИОПТАТОВ ПЕЧЕНИ В ДИАГНОСТИКЕ ХРОНИЧЕСКОГО ВИРУСНОГО ГЕПАТИТА В
Шишкин М.А.
Запорожский государственный медицинский университет
В последние десятилетия все большее распространение приобретает практика диагностики хронических вирусных гепатитов методом чрескожной трепанобиопсии печени, но, несмотря на достигнутые успехи в морфологической оценке биоптатов печени, остается ряд вопросов, которые затрудняют диагностику этих заболеваний. Хронический вирусный гепатит С (ХГС) имеет весьма характерные морфологические признаки, позволяющие врачу-морфологу с высокой достоверностью установить диагноз ХГС, чего нельзя сказать о хроническом вирусном гепатите В (ХГВ), при котором в ряде случаев микроскопическая картина биптата печени является маловыразительной.
С целью определения возможности оценки степени инфицирования гепатоцитов при ХГВ в трепанобиоптатах печени путем иммуногистохимического выявления HBsAg и HBсAg нами проведено морфологическое исследование биоптатов печени 40 больных ХГВ, которые по данным ПЦР имели в крови и в печени ДНК вируса гепатита В (HBV). Для идентификации HBV в ткани печени проведено определение HBsAg и HBсAg в парафиновых срезах трепанобиоптатов печени непрямым иммунопероксидазным методом с использованием антител к HBsAg и HBсAg и системы визуализации DAKO EnVision.
В гистологических препаратах трепанобиоптатов печени, окрашенных гематоксилином и эозином, методом Ван-Гизон, выявлены следующие морфологические признаки ХГВ: полиморфные ядра гепатоцитов отмечены у 30% пациентов, поврежденные ядра с вакуолями – у 25% лиц, стекловидно-матовые гепатоциты – у 72% больных, малоинтенсивные внутриклеточные холестазы – у 30% пациентов, и редкие тельца Каунсилмена и мелкие очаги иммуноклеточного киллинга гепатоцитов (1-5 очагов на дольку) – у 45% больных, слабо выраженные иммуноклеточные инфильтраты в портальных трактах – у 40% лиц, малочисленные иммуноклеточные „ступенчатые некрозы” – у 14% больных. В имунногистохимических препаратах трепанобиоптатов печени этих больных HBsAg определялся в виде многочисленных гранул, заполнявших цитоплазму гепатоцитов, тогда как HBсAg визуализировался в виде мелких гранул, расположенных по периферии ядра гепатоцита, преимущественно в вакуолизированных клетках и в клетках с пикнотичными ядрами. С учетом литературных данных о том, что стекловидно-матовые гепатоциты служат маркером наличия HBsAg, нами проведено сравнение числа стекловидно-матовых гепатоцитов в препаратах, окрашенных гематоксилином и эозином, с препаратами, в которых иммуногистохимически был выявлен HBsAg. В препаратах, окрашенных гематоксилином и эозином, стекловидно-матовые гепатоциты располагались преимущественно в центральных отделах дольки и были выявлены у 29 больных из 40. При иммуногистохимическом исследовании HBsAg был выявлен у 32 больных, из них у 16 больных в цитоплазме стекловидно-матовых гепатоцитов был обнаружен HBsAg. У 8 больных HBsAg определялся в цитоплазме единичных гепатоцитов или малочисленных групп гепатоцитов, тогда как стекловидно-матовые гепатоциты занимали обширные поля в центральных отделах дольки печени. У 8 больных HBsAg при иммуногистохимическом исследовании выявлен не был, хотя при микроскопическом исследовании биоптатов печени окрашенных гематоксилином и эозином у 5 больных отмечались стекловидно-матовые гепатоциты.
В результате проведенных исследований можно прийти к следующему заключению:
1. Световая микроскопия трепатобиоптатов печени, окрашенных гематоксилином и эозином, методом Ван-Гизон, является основным, но недостаточно информативным методом морфологической диагностики ХГВ, дающим возможность оценить наличие признаков вирусного повреждения печени. В то же время, иммуногистохимическое маркирование позволяет с высокой точностью говорить о присутствии антигенов HBV в печени и поэтому является приоритетным в диагностике степени инфицирования гепатоцитов в трепанобиоптатах печени больных хроническим вирусным гепатитом В.
2. Обнаруживаемые при микроскопическом исследовании трепатобиоптатов печени больных ХГВ стекловидно-матовые гепатоциты не всегда являются специфическим маркером наличия HBsAg. Этот признак не всегда позволяет уточнить репликативную активность вируса гепатита В и степень инфицирования гепатоцитов.