Виробництво кормового бiлка
Дипломная работа - Биология
Другие дипломы по предмету Биология
мiстити токсичних забруднень, вiрусiв, плазмiд i суперечка.
У процесi пiдготовки живильних важливих середовищ значення маСФ змiшування й стабiлiзацiя готового реакцiйного середовища.
Пiдготовка живильних сполучених середовищ iз використанням рiзних методiв ii обробки: фiзико - механiчних (здрiбнювання компонентiв, гомогенiзацiя, перемiшування, розчинення, фiльтрацiя, теплова обробка); хiмiчних (регулювання окислювально-вiдбудовного потенцiалу, рН середовища, iонноi сили, осмотичного тиску, гiдролiз, нейтралiзацiя); бiологiчних (оцiнка середовища на стерильнiсть, попереднСФ культивування на середовищi, ферментативний гiдролiз, iзомеризацiя й т.д.).
Готовi середовища можуть не вимагати стерилiзацii, i пiсля готування на них можна культивувати мiкроорганiзми. У деяких випадках живильного необхiдно середовища стерилiзувати, що можна здiйснити шляхом нагрiвання, озонування, що стерилiзуСФ фiльтрацii, хлоруваннi, обробки формалiном або опромiнення.
.4.2 Культивування мiкроорганiзмiв
Основною стадiСФю технологiчного процесу виробництва мiкробних бiлкових препаратiв СФ культивування мiкроорганiзмiв. У перiод пуску виробництва та стадiя складаСФться з пiдготовки й вирощування вихiдного посiвного матерiалу аж до доведення процесу в промислових ферментаторах, тобто до рiвня, що коли утворилася бiомасу вже можна вiдокремлювати вiд рiдкоi фази й сушити. При сталому виробництвi чисту культуру посiвного матерiалу подають у ферментатори для постiйного пiдновлення культури. Тому незалежно вiд способу культивування й перiоду роботи заводу процес вирощування мiкроорганiзмiв маСФ два щаблi: одержання чистоi культури посiвного матерiалу; вирощування мiкробних мас у промислових ферментаторах.
.4.3 Одержання чистоi культури
Посiвним матерiалом називають чисту культуру мiкроорганiзму, що виходить шляхом ii послiдовного асептичного пересiвання iз пробiрки в колбу, а потiм в апарати обсягу, що збiльшуСФться, аж до великого посiвного апарата, з якого вона передаСФться у виробництво при уведеннi в роботу чергового ферментатора або в працюючий ферментатор для пiдтримки в ньому росту основноi культури продуцента.
Готування посiвного матерiалу виробляСФться по наступних стадiях вирощування: в умовах лабораторii; у малому посiвному апарату; у великому посiвному апарату; у малому ферментаторi; у промисловому ферментаторi.
Перша стадiя вирощування посiвного матерiалу здiйснюСФться в заводськiй лабораторii. Головне - зберегти вихiдний штам у незмiнному станi.
Суперечки мiкроорганiзмiв, утворенi нестатевим шляхом, являють собою найкращу форму збереження вихiдного штаму мiкроорганiзму. Однак при тривалому зберiганнi культури можуть виникнути спонтаннi нерегульованi мутацii. Тому необхiдно перiодично проводити розсiв культури й перевiрку ii однорiдностi як по морфологiчним, так i по фiзiологiчних ознаках. При розсiвi з колонii, що дала найкращi показники по дiагностуючому середовищу, роблять новий розсiв в 30 - 40 пробiрок. Потiм з кожних 5 - 6 пробiрок вiдбирають одну й перевiряють, що перебуваСФ в нiй мiкроорганiзм на здатнiсть утворювати бiлок, продуцентом якого вiн СФ. Проведення такоi безперервноi селекцii дозволяСФ зберегти в активнiй формi вихiдну культуру продуцента.
Однорiдний штам мiкроорганiзму висiвають у пробiрки, вирощують д певного вiку в оптимальних умовах, а потiм помiщають у холодильник при температурi 3 - 4 С. Пересiвання культур проводять через певнi промiжки часу. Тривалi паузи мiж пересiваннями неприпустимi, тому що при цьому виснажуСФться й сохне середовище, позначаСФться негативний вплив метаболiтiв, можливi мутацii.
При пересiваннях варто переносити тiльки суперечки або невеликi шматочки мiцелiю без середовища, щоб у свiже середовище не вносити продукти метаболiзму. Для тривалого зберiгання штамiв часто використають крохмальнi середовища.
Дрiжджi зберiгають в 10 % - ному водяному розчинi глiцерину в запаяних ампулах в атмосферi рiдкого азоту при низьких температурах (- 196 - 165 С)
Заготовленi чистi культури мiкроорганiзмiв у мiру необхiдностi подають у виробництво. Для цього штам МО асептично пересiвають у качалочнi колби iз середовищем, що вiдповiдаСФ складу середовища, i вирощують до вiдповiдного вiку.
Одержання чистоi культури можна також здiйснити в лабораторному ферментаторi перiодичноi або безперервноi дii. Потiм розведення чистоi культури, що перебуваСФ в стадii iнтенсивного зростання, задають у малий посiвний апарат з пiдготовленим живильним . середовищем
Готування живильного для середовища посiвного матерiалу окремо вiд основного виробництва здiйснюють лише на деяких заводах.
На другiй стадii вирощування посiвного матерiалу живильне й iз дрiжджове розведення надходять у малий посiвний апарат обсягом 0,5 м3. Щiльнiсть початковоi засiвби невелика (0,01 % у перерахуваннi на сухi дрiжджi). Спочатку в посiвний апарат подають близько 40 л середовища зi змiстом РВ 2 - 2,6 % i розбавляють ii в 4 - 4,5 рази стерильною водою так, щоб змiст РВ не перевищувало 0,45 - 0,5 %. РЖнтенсивно середовище, поступово додають iнша кiлькiсть живильного розчину (70 - 90 л) зi швидкiстю 7 - 8 л/г, при цьому рН пiдтримують на рiвнi 4 - 5,5 додаванням амiачноi води.
Культивування продовжують до нагромадження дрiжджiв 3,5 - 4 г/л (по сухiй масi). Процес закiнчуСФться за 12 - 15 годин.
Третя стадiя готування посiвного матерiалу здiйснюСФться в посiвних апаратах обсягом 4 - 5 м3. У них подають близько 180 - 200