Симбионтное пищеварение у кроликов и пути увеличения использования углеводов кормов
Диссертация - Сельское хозяйство
Другие диссертации по предмету Сельское хозяйство
?истулой слепой кишки методом периодов продолжительностью по 16-18 суток каждый. Животные находились на зимних рационах, состоящих из концентратов, сена и корнеплодов и содержащих в 1, 2, 3, 4, 5 периодах опыта 12,8; 14,4; 16,0 (контроль); 17,6 и 19,2 % клетчатки соответственно.
Указанные уровни клетчатки достигались изменением соотношения в рационе концентратов и сена. Химус слепой кишки отбирался для анализа через фистулу 6 раз в сутки - в 1, 5, 9, 13, 17 и 21 час.
Численность бактерий, количество кокков и грампозитивных палочек определялись по методу Брида с фиксированных и окрашенных по Грамму мазков; начальная активность основного фермента целлюлазного комплекса - эндоглюканазы - вискозиметрическим методом in vitro (Клесов А.А. с соавт., 1980); рН - потенциометрически; ЛЖК - методом паровой дистилляции в аппарате Маркгама; общий азот - по Къельдалю; белковый - по разнице между общим и небелковым азотом после осаждения белков раствором трихлоруксусной кислоты; азот мочевины - колориметрическим методом Беляева и Калмыкова; азот аммиака - по Расселу.
Кроме того, определялась суммарная целлюлозолитическая активность микрофлоры методом in vivo. Данные проведенных исследований представлены в таблице 24.
Как показывают результаты исследований, уровень клетчатки в рационе оказал определенное влияние на содержание в химусе слепой кишки сухого вещества, которое несколько уменьшалось по мере увеличения в рационе доли грубых кормов.
Вероятно, это связано с усилением секреции пищеварительных соков в ответ на поступление более труднопереваримых пищевых компонентов и необходимостью нормализации состава химуса.
Изменился также количественный и качественный состав микрофлоры слепой кишки. По мере повышения уровня клетчатки численность микроорганизмов в расчете на сухое вещество химуса несколько увеличивалось, а количество грампозитивных палочек и кокков в их составе снижалось. Причем количество кокков при увеличении уровня клетчатки с 12,8 до 16% уменьшилось достоверно (р<0,01).
Следует также отметить, что у кроликов, получавших типовой рацион, содержащий 16 % клетчатки суммарная численность бактерий в расчете на натуральный химус составила 36,5 млрд./г, что почти вдвое выше, чем в содержимом рубца жвачных, но значительно ниже, чем в слепых отростках у кур. При пересчете же на сухое вещество, концентрация бактерий в рубце жвачных превышает таковую величину у кроликов на 30 %. (Тараканов Б.В. с соавт., 1977; Тараканов Б.В. с соавт., 1978; Николичева Т.А., 1980).
Таблица 24 - Показатели пищеварения в слепой кишке взрослых кроликов на рационах с различным уровнем клетчатки
ПоказателиСодержание клетчатки, ,814,4 16,0 17,619,2Сухое вещество, ,8 1,3520,0 1,7019,8 1,3718,2 1,4218,1 1,26Численность бактерий, млрд./ г СВ216,8 17,42189,6 20,27182,5 15,45234,7 8,95238,4 17,45Из них, %: Грампозитивных палочек кокков31,2 2,56 14,4 1,0530,7 1,98 10,9 1,1029,2 1,67 9,3 0,2730,5 2,33 8,2 1,0225,1 1,87 8,6 0,16Целлюлозолитическая активность (in vitro), мкМ/гмин (10-3) (in vivo), %4,40,1 16,6 1,244,80,4 14,8 1,345,10,5 11,8 1,496,20,3 9,3 0,556,60,4 8,9 0,79РН6,1 0,096,3 0,116,5 0,106,5 0,146,6 0,13ЛЖК, мМ/100 г СВ35,8 2,3936,5 1,1637,6 0,7942,8 1,0538,5 1,25Общий азот, % от СВ3,6 0,323,5 0,313,8 0,423,9 0,374,1 0,25Белковый азот, % от общего азота65,3 3,1463,0 0,2863,4 2,3464,8 0,9665,1 2,75Азот мочевины, % от общего азота2,0 0,122,3 0,072,5 0,162,8 0,233,2 0,15Азот аммиака, % от общего азота5,2 0,245,4 0,205,5 0,345,7 0,055,6 0,42
Изучаемый фактор оказал заметное влияние и на целлюлозолитическую активность кишечного симбиоценоза.
По мере повышения уровня клетчатки в рационе с 12,8 до 19,2%, величина начальной активности эндоглюканазы, определяемой методом in vitro, увеличилась на 50% (р<0,01) и обнаруживала прямую, почти линейную зависимость от содержания клетчатки.
Показатель же суммарной целлюлозолитической активности в условиях in vivo по мере увеличения уровня клетчатки демонстрировал прямо противоположную динамику. При увеличении уровня клетчатки с 12,8 до 19,2%, его величина снизилась почти в той же мере (р<0,001).
Наблюдаемый факт можно объяснить либо угнетением целлюлозолитических бактерий, вследствие меньшего поступления необходимого для них лейцина, изолейцина, лицина, метионина, биотина, гистидина, фолиевой кислоты, витамина В6, необходимых для их жизнедеятельности (Курилов Н.В. с соавт., 1971), либо увеличением содержания лигнина, инактивирующего целлюлазы (Brenil C. et al., 1985), либо, наконец, чрезмерным накоплением в химусе высших целлолигосахаридов (нерастворимых продуктов начального гидролиза клетчатки), которые могли оказать субстрат-ингибирующее действие на другие ферменты целлюлазного комплекса - экзоглюкозидазы.
Однако, по нашим данным численность целлюлозолитических бактерий (в особенности, представителей рода Bacteroides) на рационах с высоким уровнем клетчатки значительно возрастала, а различий в величине энзиматической активности in vivo при кормлении кроликов высоколигнизированной соломой и полусинтетическим кормом, включающем аналогичное количество целлюлозы в виде фильтровальной бумаги, не отмечено. Поэтому наиболее вероятным представляется последнее предположение.
Кроме того, изучение кинетики активности целлюлазного комплекса вискозиметрическим методом показало (рис. 7), что чем выше уровень клетчатки в рационе, и, соответственно, начальная активность (определяемая, главным образом, эндоглюканазой), тем в меньшей степени увеличивается она по мере инкубации реакционной смеси, когда снижение вязкости происходит в осн