Geum.ru

Проблемы питания: гигиена, безопасность, регионально ориентированный подход Материалы III межрегиональной научно-практической конференции, 25 декабря 2008 г г. Киров

Вид материалаДокументы

Содержание


Машковцева Т. В., Репнякова Е. М., Тарасова Л. Н., Владимирова С. Г., Горева И. В.
1ООО «НПФ ВятМедДиа», г. Киров
Протромбиновое время (секунды)
Подобный материал:
1   ...   5   6   7   8   9   10   11   12   ...   54
^

Машковцева Т. В.1, Репнякова Е. М.1,

Тарасова Л. Н.2, Владимирова С. Г2., Горева И. В.3

ИССЛЕДОВАНИЕ СТАБИЛЬНОСТИ ТРОМБОПЛАСТИНА ПРИ ХРАНЕНИИ


^ 1ООО «НПФ ВятМедДиа», г. Киров

2ФГУ «КНИИГиПК Росмедтехнологий», г. Киров

3ГОУ ВПО Кировская ГМА, г. Киров


При активации коагуляционной системы крови по вешнему пути свертывание происходит очень быстро – за 15 – 20  секунд. Из поврежденных тканей выделяется так называемый тканевой фактор (ТФ) – липопротеин, который является интегральным компонентом клеточных мембран.

ТФ образует комплекс с циркулирующим в крови фактором VII. Этот комплекс активирует фактор X, который вместе с фактором V, фосфолипидами в присутствии ионов кальция превращает неактивный протромбин плазмы крови (фактор II) в активный фермент тромбин, образующий фибриновый сгусток из растворимого плазменного белка фибриногена (фактор I).

На сущности внешнего каскада свертывания и основан один из тестов, традиционно применяемый для диагностики системы гемостаза (Качалова Н. Д. и соавт., 2001).

Принцип теста на определение протромбинового времени (ПВ, секунды) состоит в определении времени свертывания цитратной плазмы, после добавления тромбопластина (аналог ТФ) и ионов кальция (Добровольский А.Д., Косырев А.Б., 1995).

Одним из основных реагентов в тесте является тромбопластин, который выступает в качестве инициатора свертывания крови по внешнему пути в условиях in vitro.

Тромбопластин представляет собой водно-солевой экстракт тканей животных или человека (Зубаиров Д. М., Свинтенок Г. Ю., 1983).

Международный комитет экспертов ВОЗ по стандартизации биологических препаратов выдвинул ряд требований, которым должен отвечать тромбопластин.

Одно из требований заключается в сохранении активности тромбопластина при хранении. Реагент должен иметь активность в протромбиновом тесте на контрольной плазме доноров в пределах от 11 до 15 секунд.

В ранее произведенных исследованиях (Зубаиров Д. М., Свинтенок Г. Ю., 1983, Свитенок Г. Ю., Зубаиров Д. М., 1986) было установлено, что препараты тканевого тромбопластина термолабильны и при нагревании происходит их инактивация. Нами были выбраны оптимальные условия хранения при температуре 2-8˚С.

Согласно требованиям ВОЗ, стабильность тромбопластинов следует определять для тех условий, при которых они хранятся. Поэтому, в течение нескольких месяцев мы контролировали стабильность 8-ми экспериментальных серий тромбопластина.

Контроль осуществляли путем определения активности тромбопластина разных серий в протромбиновом тесте со свежим пулом плазмы доноров. Сопоставимость результатов исследования представлена в таблице 1.

Таблица 1 – Активность тромбопластина при температуре хранении 2-8˚С

Композиция

эксперимент. серии
^ Протромбиновое время (секунды)
Ср. значение
Станд отклон

0 мес
1 мес
2 мес
3 мес
4 мес
5 мес
6 мес
7 мес

КП
11,50
13,12
13,25
12,75
11,87
12,37
10,50
13,66
12,38
1,05

КП + ПмК
12,00
12,12
13,00
12,25
11,87
11,87
11,25
12,12
12,06
0,49

КП + ПмК + АО 1
11,62
13,31
12,62
12,62
11,87
12,62
12,43
12,12
12,40
0,53

КП + ПмК + АО 2
14,00
14,12
13,75
13,37
13,37
14,50
13,87
14,75
13,97
0,49

Примечание: КП - криопротектор, ПмК – противомикробный компонент, АО 1, АО 2- антиоксиданты.

Полученные данные свидетельствуют о том, что все предложенные композиции экспериментальных серий тромбопластина соответствуют требованию комитета экспертов ВОЗ по стандартизации. Ни один из экспериментальных образцов не вышел за пределы зоны активности, обозначенной от 11 до 15 секунд. Однако, включая в состав композиции противомикробный компонент и/или антиоксидант, стандартное отклонение этих проб при хранении снизилось по сравнению с серией, содержащей только криопротектор. Таким образом, можно сделать вывод, что для получения стабильных серий тромбопластина при хранении в условиях 2-8˚С, в композицию следует добавлять определенное количество противомикробного компонента и/или антиоксиданта.