Під загальною редакцією проф. Малого В. П. проф. Кратенко I. С. Харків 2006

Вид материалаДиплом

Содержание


Протективные свойства СПСА-вакцины на экспериментально-биологической модели внутримозговой хирургической инфекции
Группа мышей
Подобный материал:
1   ...   92   93   94   95   96   97   98   99   ...   119

Протективные свойства СПСА-вакцины на экспериментально-биологической модели внутримозговой хирургической инфекции

Тимербулатов В.М.1, Гехтман А.Б.2, Михайлова Н.А.3, Кунягина О.В.3, Мустафин М.С.2, Булатов Ш.Э.2

Башкирский Государственный Медицинский Университет1, Больница Скорой медицинской помощи2, ФГУП " НПО " Микроген" МЗ РФ, филиал "Иммунопрепарат"3, г. Уфа


В последней трети двадцатого века вакцинация зарекомендовала себя как один из методов борьбы против условно-патогенных инфекций. Разработана, прошла клинические испытания ассоциированная стафило-протейно-синегнойная (СПСА) вакцина для профилактики смешанных форм гнойных инфекций. Известно, что внутрицеребральный способ инфицирования более чувствителен по сравнению с внутрибрюшинным. Как место заражения ткани мозга являются «иммунологически привилегированной» областью, где клеточные и гуморальные механизмы резистентности на первых этапах инфекции реализуются и слабее, и иначе, чем при других путях инвазии. Дело в том, что ткани мозга отделены от общей циркуляции гемато-энцефалическим барьером, который образует астроглия, сдерживающая проникновение иммуноглобулинов и других защитных факторов плазмы за барьер. В этих условиях особое значение приобретают механизмы резистентности, основанные на эффекторных функциях микроглии, особенно нейроглиальных макрофагов. В настоящей работе приведены результаты профилактического эффекта СПСА-вакцины на модели внутримозговой стафилококковой, синегнойной и протейной инфекции у мышей. Изучали 3 серии СПСА-вакцины. Для заражения использовали штаммы S.aureus Б-243, P.mirabilis № 6, P.aeruginosa РА-7, регламентированные НТД. Белых аутбредных мышей, массой 14-16 г, иммунизировали однократно внутрибрюшинно в дозе 0,5 мл. Через 14 суток животным вводили микробную взвесь в объеме 0,03 мм в мозг в левую теменную область. Для инфицирования использовали 18-20 часовые культуры, выращенные на 2 % мясопептонном агаре, разведенные 0,9 % раствором натрия хлорида. Количество микробных клеток определяли по стандартному образцу мутности ОСО 42-28-85-01 на 10 ед. (эквивалент дозы 1 х 109 микробных клеток в 1 мл). Проводили титрование заражающей дозы каждого штамма на иммунизированных (опыт) и не иммунизированных (контроль) животных с определением средней летальной дозы (LD50) культуры и индексов эффективности (ИЭ). Величину LD50 рассчитывали по методу Кербера в модификации Ашмарина и Воробьева. Индекс эффективности определяли как отношение LD50 в опытной к LD50 в контрольной группах. За мышами наблюдали в течение 2 недель.

В табл. 1, 2, 3 представлена сравнительная характеристика летальности вакцинированных и контрольных животных.


Таблица 1. Увеличение резистентности мышей при внутримозговой стафилококковой инфекции

Группа

мышей

Отношение числа погибших к числу зараженных

животных в группе в зависимости от заражающей

дозы ( х106 микробных клеток)

LD50

(M ± m) х106

микробных

клеток

500

250

125

62,5

31,2

15,6

7,8

Опытная

18/20

12/20

7/20

2/20

1/20

0/20

0/20

179,1±10,5

Контрольная

17/18

16/18

14/18

11/18

7/18

7/18

2/18

41,7±5,4


Таблица 2. Увеличение резистентности мышей при внутримозговой синегнойной инфекции

Группа

мышей

Отношение числа погибших к числу зараженных

животных в группе в зависимости от заражающей

дозы ( х106 микробных клеток)

LD50

(M ± m) х106

микробных

клеток

5

2,5

1,25

0,625

0,312

0,156

0,08

Опытная

16/22

14/22

8/22

5/22

1/22

0/22

0/22

1,78±0,35

Контрольная

18/18

18/18

17/18

12/18

11/18

7/18

4/18

0,24±0,02


Таблица 3. Увеличение резистентности мышей при внутримозговой протейной инфекции

Группа мышей

Отношение числа погибших к числу зараженных

животных в группе в зависимости от заражающей

дозы ( х106 микробных клеток)

LD50

(M ± m) х106

микробных

клеток

5

2,5

1,25

0.625

0,312

0.156

Опытная

16/20

10/20

2/20

1/20

0/20

0/20

2,57±0,22

Контрольная

20/20

20/20

15/20

9/20

5/20

0/20

0,65±0,05


Полученные данные свидетельствовали об увеличении выживаемости иммунизированных животных и достоверном увеличении в опытных группах величины LD50. Индексы эффективности составили при заражении вакцинными штаммами S.aureus Б-243 - 4,3; P.aeruginosa РА-7 - 7,4; P.mirabilis № 6 - 4,0.

Таким образом, нами установлена высокая протективная активность СПСА-вакцины при интракраниальной инфекции у мышей.