Geum.ru

Актуальные вопросы охраны

Вид материалаДокументы

Содержание


Маркеры вирулентных для человека
Зуева С.А., Супрун С.В., Козлов В.К.
Подобный материал:
1   ...   30   31   32   33   34   35   36   37   ...   123

Зайцева Е.А. 1, Ермолаева С.А. 2, Пуховская Н.М. 3, Мусатов Ю.С. 3, Иванов Л.И. 3


ГЕНЫ ИНТЕРНАЛИНОВ InlA И InlC – ПОТЕНЦИАЛЬНЫЕ

МАРКЕРЫ ВИРУЛЕНТНЫХ ДЛЯ ЧЕЛОВЕКА

ШТАММОВ LISTERIA MONOCYTOGENES

ГУ НИИ эпидемиологии и микробиологии СО РАМН, г. Владивосток1;

ГУ НИИ эпидемиологии и микробиологии им. Н.Ф.Гамалеи РАМН, г. Москва2;

ФГУЗ Хабаровская противочумная станция Роспотребнадзора, г. Хабаровск3


L.monocytogenes – возбудитель листериоза – давно известен микробиологам и клиницистам, но его роль в инфекционной патологии человека за последнее время значительно повысилась. Особую группу риска при листериозе составляют беременные женщины, у которых инфицирование L.monocytogenes может приводить к абортам и мертворождениям, чаще на последнем триместре беременности (Farber J.M., Peterkin P.I. 1991, Тартаковский И.С. и др., 2002). В настоящее время высказано предположение, что развитие определенных клинических проявлений листериоза обусловливается активностью некоторых факторов патогенности L.monocytogenes. В процессе инвазии листерий в эукариотические клетки участвует ряд поверхностных и секретируемых белков, относящихся к семейству интерналинов, из которых наиболее изучены белки-интерналины А и В. Предполагается особая роль в развитии внутриутробной инфекции белка – интерналина А (Lecuit M., 2004).

В данной работе изучена вариабельность фрагментов генов, кодирующих LRR-домены белков интерналинов InlA, InlB, InlC и InlE, у изолятов листерий, выделенных из различных источников на Дальнем Востоке России в 2000-2007 гг., для выявления маркеров, позволяющих определять высоковирулентные штаммы L. monocytogenes.

Для проведения ПЦР использовали бактериальные лизаты, приготовленные из суточных культур листерий, как описано Т.И. Карповой с соавт. (2003). Последовательности генов inlA, inlB, inlC, inlE, кодирующих факторы инвазии семейства интерналинов L. monocytogenes, и гена prs, кодирующего белок общего метаболизма листерий фосфорибозилпирофосфатсинтазу, взяты из базы данных GenBank, что позволило синтезировать специфические праймеры. Нуклеотидные последовательности прочитаны с помощью программы Chromas v. 1.45 (Copyright 1996-1998 Conor McCarthy, ссылка скрыта). Выравнивание последовательностей проведено с помощью программы ClustalW1.83.XP. Характеристика нуклеотидного состава последовательностей осуществлена с помощью программы DnaSP version 4.10.7. Для выявления отличительных особенностей среди изолятов L.monocytogenes в зависимости от источника выделения, полученные культуры были разделены на 4 группы: 1) от мертворожденных плодов (n=21), 2) от мышевидных грызунов (n=25), 3) из морских гидробионтов (n=16), 4) пищевых продуктов (как контроль) (n=34). Было осуществлено секвенирование внутренних областей генов inlA, inlB, inlC, inlE и prs. Суммарная длина конкатемеров, включающих фрагменты 5 маркерных генов, равнялась 3029 н.п., что составляет около 0,1% хромосомной ДНК L.monocytogenes.

В результате, впервые нами была обнаружена корреляция между источником выделения L.monocytogenes и аллелем генов инвазии. Для генов inlA и inlC специфические аллели преобладали среди культур L.monocytogenes, выделенных из мертворожденных плодов (аллели 1 и 5 для inlA, 1 и 6 для inlС); аллель 1 гена inlB преобладал среди культур, выделенных от грызунов, но не от других хозяев. В группе контроля (изоляты из пищевых продуктов) все аллели изучаемых генов были распределены равномерно. Аллели гена prs были распределены однородно во всех группах.

Таким образом, сравнительный анализ нуклеотидной последовательности фрагментов генов inlA, inlB, inlC, inlE и prs показал значимость LRR-кодирующего фрагмента генов inlA и inlC, как маркера штаммов L.monocytogenes, представляющих повышенную эпидемиологическую опасность для развития листериоза у плода. Полученные данные позволяют предположить, что развитие внутриутробной листериозной инфекции у беременных женщин может быть связано с определенными аллелями генов inlA и inlC.

Зуева С.А., Супрун С.В., Козлов В.К.


СОСТОЯНИЕ ЗДОРОВЬЯ ДЕТЕЙ В РАННИЙ НЕОНАТАЛЬНЫЙ ПЕРИОД ЖИЗНИ, РОЖДЕННЫХ ОТ МАТЕРЕЙ С ОТЯГОЩЕННЫМ АКУШЕРСКИМ АНАМНЕЗОМ

ХФ ДНЦ ФПД СО РАМН – НИИ охраны материнства и детства, Хабаровск


Здоровье новорожденных и детей раннего возраста, несмотря на значительное внимание к этому вопросу, остается актуальной проблемой. Неуклонное снижение показателей состояния здоровья женщин фертильного возраста негативно влияет на рождаемость и заболеваемость детского населения, особенно в перинатальный период и у детей раннего возраста. Высокая частота заболеваемости обусловлена рядом факторов. Во-первых, не вызывает сомнения тот факт, что на развитие детей в первые три года жизни оказывают влияние перинатальные факторы: состояние здоровья матери, характер течения беременности и родов, особенности адаптации новорожденного в раннем неонатальном периоде. Анемия отмечается у каждой третьей женщины и является наиболее частой патологией крови при беременности, вследствие которой формируется тканевая гипоксия. Во-вторых, за последние десятилетия отмечен рост воспалительных заболеваний урогенитального тракта, обусловленных вирусно-бактериальными инфекциями, как среди популяций в целом, так и у беременных в частности. Это способствует снижению процессов ранней постнатальной адаптации у детей и, как следствие, снижение общей резистентности в периоде раннего детства. В-третьих, на уровень здоровья детей оказывает влияние экологическая ситуация, характерная для данного региона проживания, способствующая формированию аллергических заболеваний, бронхолегочной патологии, нарушению функции ЖКТ и т.д.

В связи с вышеуказанными проблемами целью нашей работы явилась оценка состояния здоровья детей, рожденных от матерей с отягощенным акушерским анамнезом. Для решения поставленной цели нами проведено обследование 219 пар: беременные женщины и их дети. Все обследованные были разделены на 4 группы в зависимости от патологии, выявленной у матери. Первая группа – группа сравнения (n=27 чел.) – дети от женщин, беременность которых протекала без патологии. Вторая группа (n=60 чел.) – дети женщины, которых страдали анемией во время беременности. Третья группа (n=27 чел.) – дети, матери которых переносили во время беременности вирусно-бактериальные инфекции (ВБИ). Четвертую группу (n=105 чел.) – сочетанную – составили дети от матерей с анемией и вирусно-бактериальной инфекцией во время беременности.

Состояние здоровья детей в ранний неонатальный период оценивалось по течению периода адаптации, наличию патологии при выписки из родильного дома и принадлежности к группе здоровья. МУМТ 2-3 степени достоверно чаще встречалась во 2-й группе (41,7%), в 3-й – 55,6%, в 4-й – 40,9% (р<0,001) группах наблюдения. Наличие желтухи 1 ст., не требующей лечения, определялось во всех группах наблюдения. В 3-й группе достоверно чаще отмечалась желтуха 2-й ст. – 37,0% (р<0,01), при которой дети получали лечение в 40,7% случаев (р<0,001). Пролонгированная желтуха преобладала у новорожденных 4-й группы наблюдения и составила 37,0% (р<0,001). Токсическая эритема достоверно чаще встречается во 2-й (30,0%) и 4-й (34,3%) группах (р<0,001). Наличие геморрагического синдрома распределялось следующим образом: в 2-й группе – 15,0% случаев (р<0,01), в 3-й – 18,5% (р<0,001), в 4-й группе – 13,3% (р<0,001). При выписке из родильного дома все дети имели ту или иную патологию и относились ко 2Б и 3-й группе здоровья. Дети, рожденные от матерей из группы сравнения, были угрожаемые по различной патологии (неблагоприятные факторы в биологическом, генеалогическом и социальном анамнезе) и составили 2А группу здоровья. Дети 2Б группы здоровья («группа высокого риска») характеризовались отклонениями в состоянии здоровья, аномалиями конституции, реконвалисценты после острых заболеваний, с социальным, в том числе семейным, неблагополучием. Наиболее часто в группах наблюдения встречалась такая патология как ЦСИ, коньюгационная желтуха и ЗВУР, статистически достоверная разница выявлена в 3 группе наблюдения.

Проведенные исследования выявили спектр отклонений в состоянии здоровья детей, рожденных от матерей с отягощенным анамнезом. Чаще встречалась и тяжелее протекала патология у детей из 3 и 4 группы, матери которых переносили во время беременности ВБИ и ВБИ в сочетании с анемией. К такой патологии относились внутриутробная гипоксия плода, низкая оценка по шкале Апгар, асфиксия в родах, которая возникала в 2 раза чаще, чем в 1-й и 2-й группах. Состоянии средней тяжести и тяжелое при рождении отмечалось у половины детей. Физическое развитие в 3-ей и 4-ой группах характеризовалось высоким процентом микро- и макросомии, с преобладанием дисгармоничности.

Отрицательное влияние патология матери оказывала на течение периода адаптации. МУМТ 2-3 степени возникала чаще в группах 2, 3 и 4. При наличии у матери ВБИ у детей чаще развивалась желтуха с затяжным характером, требующая медикаментозной коррекции, патология нервной системы 55,6% (ЦСИ). Суммируя выше изложенное, можно заключить что, ведущую роль в процессах адаптации в период новорожденности, играют характер и условия внутриутробного развития. В период новорожденности тяжесть адаптации обусловлена напряжением всех компенсаторных функций организма, в том числе и состоянием нервной системы, спровоцированных гипоксией. Показатели состояния здоровья детей, рожденных от матерей ВБИ и при сочетании ВБИ с анемией, по многим параметрам ниже, чем у детей матери которых, перенесли только анемию. Таким образом, патологическое течение беременности на фоне ВБИ и при сочетании инфекций с анемией сопровождалось ростом заболеваемости у детей, которые в дальнейшем представляют группу высокого риска в формировании врожденных пороков, аномалий развития и хронической патологии у детей.