Geum.ru

Учебное пособие составлено в соответствии с программой по биохимии для студентов всех факультетов медицинских вузов. Оно предназначено для самостоятельной подготовки студентов и оптимизации их работы на практических занятиях

Вид материалаУчебное пособие

Содержание


Занятие 3. анаболизм липидов.
Увеличение содержания фосфолипидов отмечается при холестазе, лёгкой форме гепатита, гиперлипопротеинемии 11, алкоголизме, цирроз
Работа 1. Количественное определение общих фосфолипидов сыворотки крови по фосфору.
Опытная пробирка.
Биомедицинское значение.
Подобный материал:
1   ...   15   16   17   18   19   20   21   22   ...   30

ЗАНЯТИЕ 3.

АНАБОЛИЗМ ЛИПИДОВ.


БИОМЕДИЦИНСКОЕ ЗНАЧЕНИЕ.

В организме большая часть липидов представлена в виде триацилглицеролов, которые являются главными липидами пищи и жировых отложений. Фосфолипиды являются основными компонентами мембран и могут выполнять особые функции . Например, дипальмитолецитин является основным элементом сурфактанта, поверхностно-активного вещества легких. Инозитолфосфатиды являются мессенджерами при действии гормонов. Гликосфинголипиды входят в состав гликокаликса клеточной поверхности. Фосфолипиды являются липотропными веществами, которые предохраняют печень от жирового перерождения. Лецитин (фосфатидилхолин) участвует в метаболизме липопротеинов, активируя липопротеинлипазу. Фосфолипиды составляют оболочку транспортных форм липидов – липопротеинов сыворотки крови.

Увеличение содержания фосфолипидов отмечается при холестазе, лёгкой форме гепатита, гиперлипопротеинемии 11, алкоголизме, циррозе печени,

панкреатите и т.д.

Снижение концентрации фосфолипидов имеет место при тяжёлых вирусных гепатитах, гипертиреозе, пернициозной анемии, рассеянном склерозе и т.д.

Работа 1. Количественное определение общих фосфолипидов сыворотки крови по фосфору.


ПРИНЦИП МЕТОДА.

Фосфолипиды осаждают трихлоруксусной кислотой (ТХУ) вместе с белками крови. Полученный осадок минерализуют и в остатке определяют неорганический фосфат. О содержании фосфолипидов судят косвенно – по количеству фосфорной кислоты, полученной расчетным методом после колориметрии.

ХОД РАБОТЫ.

Опытная пробирка.
  1. В центрифужную пробирку, куда уже добавлено 0,2 мл сыворотки крови, добавить 2,5 мл дистиллированной воды, взболтать.
  2. Добавить 3 мл 10% раствора трихлоруксусной кислоты (ТХУ), встряхнуть, размешать стеклянной палочкой и оставить на 2 минуты.
  3. Центрифугировать 10 минут (после предварительного уравновешивания на центрифужных весах).
  4. Слить надосадочную жидкость и работать с осадком.
  5. К осадку прибавить 1 мл 57% раствора хлорной кислоты и тщательно размешать стеклянной палочкой.
  6. Добавить 6 мл дистиллированной воды, размешать, профильтровать через бумажный фильтр.
  7. В пробирку с фильтратом добавить 1 мл 4% раствора молибденовокислого аммония , перемешать и добавить 1 мл эйконогена (раствора аминонафтолсульфоновой кислоты).
  8. Довести водой объем до 10 мл и оставить для развития окраски на 10 минут.
  9. Колориметрировать на ФЭКе против воды с красным светофильтром (670 нм) в кювете толщиной 1 см.

Приготовление стандарта.
  1. В пробирку прилить 2 мл стандартного раствора однозамещенного фосфорнокислого калия и прибавить 0,8 мл 57% раствора хлорной кислоты, перемешать.
  2. Довести водой объем до 7 мл.
  3. Добавить 1 мл раствора молибденовокислого аммония и 1 мл эйконогена.
  4. Объем довести дистиллированной водой до 10 мл и оставить для развития окраски на 10 минут.
  5. Колориметрировать на ФЭКе против воды с красным светофильтром (670 нм) в кювете толщиной 1 см.

РЕЗУЛЬТАТЫ:

Липоидный фосфор в 100 мл сыворотки крови в мг/дл рассчитывается по формуле:

Еоп х 0,02х100 Е оп.
Х = ------------------------= ------- Х 10

Ест. х 0,2 Е ст.

где Х – липоидный фосфор в мг /дл

Е оп. – оптическая плотность опытной пробы.

Е ст. – оптическая плотность стандартной пробы.

0,02 – содержание фосфора в 2 мл стандартной пробы (мг).

0,2 – количество сыворотки в опыте (мл).

Норма концентрации липоидного фосфора у взрослых от 6,1 до 14,5 мг/дл или 1,97 – 4,68 ммоль/л (коэффициент пересчета 0,323).


ВЫВОДЫ:


ВОПРОСЫ К ЗАНЯТИЮ.
  1. Особенности транспорта ацетил-КоА из митохондрий в цитоплазму. Регуляция процесса.
  2. Строение синтетазы жирных кислот. Синтез пальмитиновой кислоты.

Регуляция процесса.
  1. Особенности синтеза ненасыщенных жирных кислот и длинноцепочечных высших жирных кислот.

4. Синтез триглицеролов.

5. Синтез фосфатидов. Влияние липотропных веществ на синтез фосфатидов.

6. Особенности синтеза холестерина. Регуляция процесса.

7. Роль ацетил-КоА в интеграции углеводного и липидного обменов.

8. Взаимосвязь углеводного и липидного обменов. Пути образования узловых метаболитов.


ЗАНЯТИЕ 4.


ЛИПОПРОТЕИНЫ СЫВОРОТКИ КРОВИ.

ТРАНСПОРТ ХОЛЕСТЕРОЛА.

БИОМЕДИЦИНСКОЕ ЗНАЧЕНИЕ.

В крови здорового человека, взятой натощак, содержатся только ЛПВП, ЛПНП и ЛПОНП. Хиломикроны в ней отсутствуют. Они появляются только при нарушениях липидного обмена. В ряде патологических состояний в крови могут обнаруживаться липопротеины промежуточной плотности ЛППП. Гиперлипопротеинемия- повышение содержания определенных классов липопротеинов в плазме крови. Развитие атеросклероза сопровождается повышением количества ЛПНП и ЛПОНП - атерогенных фракций - и снижением ЛПВП – антиатерогенной фракции.

На содержание холестерола в сыворотке крови влияют различные факторы: наследственность, питание, состояние эндокринных желез и внутренних органов ( печень, почки). Так, например, повышение уровня холестерола в сыворотке крови наблюдается при атеросклерозе, семейной гиперхолестеринемии, гипотиреозе, декомпенсированном сахарном диабете, нефротическом синдроме и др. Понижение концентрации холестерола происходит при остром гепатите, гипертириреозе, кахексии, анемии и др. Исследуется роль холестерола в процессах нейродегенерации.