Учебное пособие составлено в соответствии с программой по биохимии для студентов всех факультетов медицинских вузов. Оно предназначено для самостоятельной подготовки студентов и оптимизации их работы на практических занятиях
| Вид материала | Учебное пособие |
СодержаниеВажнейшие липиды организма. переваривание липидов. Работа 1. Определение активности липазы в дуоденальном содержимом. Ход работы. Вопросы к занятию |
- Предлагаемое учебное пособие предназначено для студентов, аспирантов и преподавателей, 2052.38kb.
- Учебное пособие для самостоятельной работы студентов ставрополь 2007, 1394.43kb.
- Учебное пособие по дисциплине «Сестринское дело в хирургии» составлено в соответствии, 2118.11kb.
- Учебно-методическое пособие для самостоятельной работы студентов интернов по специальности, 390.76kb.
- Учебное пособие томск 2009, 1504.09kb.
- Учебное пособие Чебоксары 2007 удк 32. 001 (075. 8) Ббк ф0р30, 1513.98kb.
- Учебное пособие М.: Педагогическое общество России. 1999 442, 5623.86kb.
- Учебное пособие для самостоятельной работы студентов специальности 040600 «Сестринское, 1354.95kb.
- Новые поступления в библиотеку экономическая теория, 225.89kb.
- Учебное пособие Ставрополь 2005 удк 577. 1 (075. 8) Бкк 28. 072, 277.1kb.
ЗАНЯТИЕ 1.
ВАЖНЕЙШИЕ ЛИПИДЫ ОРГАНИЗМА. ПЕРЕВАРИВАНИЕ ЛИПИДОВ.
БИОМЕДИЦИНСКОЕ ЗНАЧЕНИЕ
Нарушения переваривания и всасывания липидов могут быть обусловлены разными причинами: нарушение синтеза панкреатической липазы, закупорка желчных протоков, воспалительные процессы в кишечнике. Дефицит липазы чаще всего связан с заболеваниями поджелудочной железы и сопровождается панкреатической стеатореей. Нарушение экскреторной функции поджелудочной железы при перекрытии ее протока ( закупорка камнем, воспалительный процесс) при панкреатитах или непосредственном повреждении ткани железы ( опухоль, атеросклероз сосудов, кровоизлияние и др.) существенно сказывается на жировом обмене. При стеаторее организм теряет воду и электролиты, затрудняется всасывание жирорастворимых витаминов.
Работа 1. Определение активности липазы в дуоденальном содержимом.
ПРИНЦИП МЕТОДА.
Метод основан на электрометрическом определении активности липазы по концентрации жирных кислот, освобождающихся при гидролизе эмульгированного жира под действием панкреатической липазы.
ХОД РАБОТЫ.
Приготовить смесь реактивов в трех пробирках (1-я - контрольная,
2-я и 3-я - опытные) по следующей схеме:
| Реактивы | Контроль | Опыт 1 | Опыт 2 с желчными кислотами |
| 1. Молоко | 1,5 мл | 1,5 мл | 1,5 мл |
| 2. Дистиллированная вода | 1 мл | 1 мл | 0,5 мл |
| 3. Трис-буфер, рН = 8,0 | 0,5 мл | 0,5 мл | 0,5 мл |
| 4. Дуоденальное содержимое | _ | 0,5 мл | 0,5 мл |
| 5. Желчные кислоты | -- | -- | 0,5 мл |
Измерить на иономере величину pHо смеси в контрольной пробирке до инкубации и записать в таблицу с результатами (до инкубации, для всех пробирок).
Все пробирки поместить в термостат и инкубировать при температуре 37о в течение 1 часа.
По окончании инкубации во все пробирки добавить по 1,5 мл этилового спирта для ингибирования действия фермента.
В контрольную пробирку также внести 0,5 мл дуоденального содержимого, перемешать.
В каждой пробирке после инкубации определить pH1.
РЕЗУЛЬТАТЫ (занести в таблицу и произвести расчеты):
| | Контроль | Опыт 1 | Опыт 2 |
| До инкубации | PHо | | |
| После инкубации | pH1 | pH1 | pH1 |
| | DpHконт = рНо – рН1 | DpH = рНо - рН1 | DpH = рНо - рН1 |
| | | DpH - DpHконт = | DpH -DpHконт= |
DpH контроля вычесть из DpH 1 и 2 пробирки за время инкубации. По величине полученной разницы найти активность липазы в 1 и 2 пробирках с помощью калибровочного графика. Активность фермента выражена в условных единицах. За условную единицу принимается количество фермента, освобождающее из триглицерола 1 мкМ жирной кислоты в минуту в расчете на 1 мл дуоденального содержимого. В норме активность панкреатической липазы в дуоденальном содержимом 400-700 ед./мл.
ВЫВОДЫ (сравнить активность липазы в опыте 1 и 2; сделать вывод о влиянии желчных кислот на активность фермента):
ВОПРОСЫ К ЗАНЯТИЮ:
1.Классификация липидов. Знать структуру триацилглицеролов, фосфатидов (фосфатидилхолин, фосфатидилсерин, фосфатидилэтаноламин).Знать и уметь писать структуры стеариновой, пальмитиновой, олеиновой жирных кислот.
- Свободные жирные кислоты, значение насыщенных и ненасыщенных жирных кислот.
- Биологические функции нейтральных жиров.
- Строение и функция фосфолипидов, сфинголипидов, гликолипидов.
6. Переваривание липидов.
-Переваривание липидов в кишечнике: действие панкреатических ферментов (липазы, фосфолипазы, холестеролэстеразы), функция желчи,
значение желудочной липазы у детей.
- Всасывание липидов в кишечнике, факторы, влияющие на всасывание; липиды кала, стеаторея.