Учебное пособие составлено в соответствии с программой по биохимии для студентов всех факультетов медицинских вузов. Оно предназначено для самостоятельной подготовки студентов и оптимизации их работы на практических занятиях
| Вид материала | Учебное пособие |
- Предлагаемое учебное пособие предназначено для студентов, аспирантов и преподавателей, 2052.38kb.
- Учебное пособие для самостоятельной работы студентов ставрополь 2007, 1394.43kb.
- Учебное пособие по дисциплине «Сестринское дело в хирургии» составлено в соответствии, 2118.11kb.
- Учебно-методическое пособие для самостоятельной работы студентов интернов по специальности, 390.76kb.
- Учебное пособие томск 2009, 1504.09kb.
- Учебное пособие Чебоксары 2007 удк 32. 001 (075. 8) Ббк ф0р30, 1513.98kb.
- Учебное пособие М.: Педагогическое общество России. 1999 442, 5623.86kb.
- Учебное пособие для самостоятельной работы студентов специальности 040600 «Сестринское, 1354.95kb.
- Новые поступления в библиотеку экономическая теория, 225.89kb.
- Учебное пособие Ставрополь 2005 удк 577. 1 (075. 8) Бкк 28. 072, 277.1kb.
КОЛЛОКВИУМ ПО ТЕМЕ: НУКЛЕИНОВЫЕ КИСЛОТЫ. ОБМЕН НУКЛЕОПРОТЕИНОВ. СИНТЕЗ БЕЛКА.
ЗАНЯТИЕ 14.
БИОХИМИЯ КРОВИ.
БИОМЕДИЦИНСКОЕ ЗНАЧЕНИЕ.
Биохимический анализ крови является самым распространенным лабораторным исследованием в медицине и назначается практически при всех заболеваниях. Биохимический анализ крови используется как один из критериев оценки регуляторных систем организма, контролирующих гомеостаз, а
также для диагностики ряда заболеваний.
Работа 1. Определение общего белка плазмы крови биуретовым методом.
ОБОРУДОВАНИЕ: ФЭК.
ПРИНЦИП МЕТОДА.
Белки, реагируя в щелочной среде с сульфатом меди, образуют соединение, имеющее розово-фиолетовую окраску . Интенсивность получаемой окраски, прямо пропорциональной концентрации белка в растворе, измеряется с помощью фотоэлектроколориметра.
ХОД РАБОТЫ.
1. В опытную пробирку, содержащую 0.1 мл плазмы крови, налить 5 мл раствора биуретового реактива, перемешать и оставить при комнатной температуре на 30 минут.
2. В контрольную пробирку налить 0,1 мл 0.9 % раствора хлорида натрия и добавить 5 мл раствора биуретового реактива, перемешать и оставить при комнатной температуре на 30 минут.
3.Колориметрировать опытную пробирку против контрольной в кюветах толщиной 10 мм при зеленом светофильтре (длина волны 540-560 нм).
4. По калибровочному графику рассчитать содержание белка в пробе.
НОРМА - 65-85 г/л.
РЕЗУЛЬТАТЫ:
ВЫВОДЫ:
Работа 2. Разделение белков плазмы крови методом электрофореза на бумаге.
ПРИНЦИП МЕТОДА.
Под влиянием постоянного электрического поля белки, заряжаясь отрицательно в щелочной среде при рН - 8,6-8,9, передвигаются по смоченной буферным раствором бумаге в направлении анода со скоростью, зависящей от величины заряда и молекулярной массы белка.
При помощи электрофореза на бумаге сыворотку крови можно разделить на 5 фракций и определить относительное содержание белка в каждой из них.
ХОД РАБОТЫ.
- Определить на электрофореграмме 5 белковых фракций - альбумины,
a1-, a2-, b- и g-глобулины.
2.Вырезать полученные фракции, нарезать их в виде щеточки и каждую из них поместить в пронумерованную пробирку.
3. Для извлечения связанного белками красителя добавить 5 мл 0.01н раствора едкого натра в пробирку с альбуминами и по 2.5 мл раствора щелочи в пробирки с глобулиновыми фракциями.
4. Пробирки взболтать и оставить на 30 минут в темном месте для полного извлечения окраски.
5. Колориметрировать при длине волны 500-560 нм ( зеленый светофильтр) против раствора 0.01н едкого натра в 5 мм кюветах.
6.Расчет.
Содержание белковых фракций рассчитывают в относительных и абсолютных величинах: для расчета относительного (процентного) содержания значения экстинкций для альбуминов умножают на два и к полученному результату прибавляют величину экстинкций всех четырех глобулиновых фракций.
2*Е(альбуминов)+Е +Е +Е +Е=100%
Общую сумму показаний экстинкций всех фракции принимают за 100% и рассчитывают, какой процент по отношению к ней составляет экстинкция каждой фракции. Например, если сумма всех величин экстинкции составляет 0,84, а для альбуминов она составляет 0,52, то относительное содержание этой фракции можно рассчитать по следующей пропорции:
0,84 ---- 100 %
2*0,24 ---- х % х=57,14%
Содержание остальных фракций вычисляют аналогичным образом.
Содержание белковых фракций в норме:
Альбумины -52 - 65 % (0,49-0,86 г/л);
α1 - глобулины -2,5 - 5 % (1 - 4 г/л);
α2- глобулины -7 - 13 % (4 - 12 г/л);
β- глобулины -8 - 14 % (5 - 11 г/л);
γ- глобулины -12 - 22 % (5 - 16 г/л).
РЕЗУЛЬТАТЫ:
ВЫВОДЫ:
Работа 3. Бензидиновая проба на гемовую группировку гемоглобина.
ПРИНЦИП МЕТОДА.
Реакция обусловлена способностью гемоглобина катализировать окисление бензидина (бесцветен) перекисью водорода в хинондиимид (синий цвет).
ХОД РАБОТЫ.
К 5 каплям разбавленной крови добавить 5 капель 0.2% спиртового раствора бензидина и несколько капель перекиси водорода. Жидкость окра-шивается в синий или зеленый цвет.
РЕЗУЛЬТАТЫ:
ВЫВОДЫ:
Работа 4. Биохимический анализ крови.
Группа студентов проводит разбор карты "Биохимический анализ крови". Необходимо определить биохимические показатели, которые выходят за пределы нормы, и объяснить возможные причины этих отклонений.
РЕЗУЛЬТАТЫ:
Занести выявленные показатели, отклоняющиеся от нормы, в таблицу и сделать по ним лабораторное заключение.
-
Биохимические показатели:
Выше или ниже нормы
ВЫВОДЫ:
ВОПРОСЫ К ЗАНЯТИЮ:
1.Функция крови. Белки плазмы крови. Физиологическая роль белков плазмы крови.
2.Белки плазмы крови:
а) альбумины и преальбумины, их роль в организме.
б) α1, α2, β, γ-глобулины, характеристика отдельных представителей.
Привести примеры индивидуальных белков, их роль в организме.
3.Особенности синтеза белков плазмы крови.
4. Гемоглобин - основной белок эритроцитов, его структурная организация.
5.Дыхательная функция крови, роль в переносе О2, СО2, Н+ -ионов. Механизмы, регулирующие сродство гемоглобина к кислороду.
6.Полиморфизм гемоглобина. Гетерогенные гемоглобины, гемоглобинопатии.
7. Синтез гема.
8. Ферменты крови. Диагностическое значение исследования ферментативного состава крови.