Методические рекомендации по методикам исследований, проводимым в Диагностическом центре Алтайского края Барнаул 2009
| Вид материала | Методические рекомендации |
- Заместитель Губернатора Алтайского края, председатель комитета администрации Алтайского, 315.23kb.
- Развития алтайского края, 1819.61kb.
- Принят Постановлением Алтайского краевого закон, 58.52kb.
- Воспитание гражданина, 702.38kb.
- Алтайский край закон об административной ответственности за совершение правонарушений, 535.17kb.
- Администрация алтайского края управление алтайского края по развитию предпринимательства, 10.04kb.
- Алтайского края, 2052.16kb.
- Алтайского края, 2447.61kb.
- 18 декабря 2011 года состоялся Второй открытый чемпионат Смоленского района по скоростному, 17.19kb.
- А. И. Ломакина Об итогах работы управления Алтайского края по культуре, управления, 666kb.
Таблица 2б
Порядок взятия венозной крови для лабораторных исследований
(стандарт забора биоматериала)
| Порядок взятия крови | Наименование процедуры | Антикоагулянт | Количество венозной крови | Примечание |
| 1. | Взятие крови для микробиологического исследования | Пробирка без антикоагулянта | До метки, тщательно перемешать. | |
| 2. | Взятие крови для биохимических и иммунологических исследований: | Пробирка без антикоагулянта или с активатором свертывания | До метки, тщательно перемешать. | Кроме иммунограммы, гликозилированного гемоглобина, АКТГ, Д-димера, фактора Виллебранда (ИФА) |
| Обнаружение маркеров гепатита | | До метки, тщательно перемешать. | | |
| Определение группы крови и Rh - фактора | | До метки, тщательно перемешать. | | |
| Проба Кумбса | | До метки, тщательно перемешать. | | |
| Обнаружение LE клеток | | До метки, тщательно перемешать. | | |
| Для серологических реакции, проводимых в микробиологии | | До метки, тщательно перемешать. | Срочная доставка в лабораторию | |
| 3. | Взятие крови для исследований гемостаза | Пробирка с цитратом (соотношение с кровью 1:9) | До метки, тщательно перемешать. | Если пациенту назначено только исследования на гемостаз или забор крови начинают с него, то первые 5 мл берут в сухую пробирку и исследованию они не подвергаются, а выбрасываются. |
| Фактор Виллебранда (ИФА) и Д-димер | Пробирка с цитратом (соотношение с кровью 1:9) | До метки, тщательно перемешать | | |
| 4. | Взятие крови на иммунограмму и Г-6 ФДГ | Пробирка с гепарином | До метки, тщательно перемешать. | |
| 5. | Взятие крови для гематологических, ПЦР исследований, иммунологических исследований: | Пробирка с ЭДТА | До метки, тщательно перемешать. | |
| Клинический анализ крови | Пробирка с ЭДТА | До метки, тщательно перемешать. | | |
| Осмотическая резистентность эритроцитов | Пробирка с ЭДТА | До метки, тщательно перемешать. | | |
| Гликозилированный гемоглобин | Пробирка с ЭДТА | До метки, тщательно перемешать. | | |
| Гепатиты методом ПЦР | Пробирка с ЭДТА | До метки, тщательно перемешать. | | |
| АКТГ | Пробирка с ЭДТУ - К | До метки, тщательно перемешать | |
6.1.2. ПРАВИЛА ЗАБОРА МОЧИ, КАЛА, МОКРОТЫ НА ОБЩЕКЛИНИЧЕСКИЕ ИССЛЕДОВАНИЯ
Прием мочи, кала, мокроты у пациентов консультативного приема ДЦАК и у курьеров ЛПУ проводится в 112 кабинете с 8 до 11 часов утра. Указаный биоматериал имеет следующие правила сбора:
- На клинический анализ мочи доставляется утренняя порция мочи в количестве 50-100 мл, собранная в сухую, чистую, широкогорлую стеклянную или пластиковую посуду с четко оформленным сопроводительным документом (направлением).
- Моча на диастазу собирается во время болевого приступа в сухую, чистую, широкогорлую посуду в количестве до 100 мл и доставляется в лабораторию в течение 2-х часов с момента сбора мочи.
3. Проба по Нечипоренко собирается из утренней мочи. После обязательного туалета наружных половых органов собирают среднюю порцию мочи в чистую, сухую, широкогорлую посуду. Несоблюдение вышеуказанных правил может привести к изменению результатов анализа.
4. Проба Зимницкого собирается в течение суток с интервалом в три часа в отдельную емкость. В 6 часов утра утренняя порция мочи выливается (эта порция для анализа по Зимницкому не нужна). Затем в течение суток собрать 8 порций мочи с промежутками во времени 3 часа, каждую порцию собирают в полном объеме в отдельную посуду (8 флаконов), с обязательной маркировкой флаконов по порциям:
1 порция – c 6 до 9 часов утра
2 порция – с 9 до 12 часов
3 порция – с 12 до 15 часов
4 порция – с 15 до 18 часов
5 порция – с 18 до 21 часа
6 порция – с 21 до 24 часов
7 порция – с 24 до 3 часов ночи
8 порция – с 3 до 6 часов утра
Все порции нумеруются и доставляются в лабораторию. До доставки в лабораторию пробы хранят при комнатной температуре.
Для детей до 3-х лет сбор 8 порций мочи в течение суток осуществляется по свободному графику без точного соблюдения временных интервалов.
5. Моча на биохимические исследования
Доставляется утренняя порция мочи в количестве 50–100 мл, собранная в сухую, чистую, широкогорлую стеклянную или пластиковую посуду с четко написанным направлением.
6. Моча на сахар
Из суточного количества мочи доставляют в лабораторию 50–100 мл мочи или 3 порции мочи, собранной за сутки с перерывами в 8 ч:
1 порция - с 8 до 16 часов
2 порция - с 16 до 24 часов
3 порция - с 24 до 8 часов утра (по указанию врача)
7. Исследование мочи по Литос-системе
Для исследования собирается утренняя порция мочи (50-100 мл) в сухую, чистую посуду после туалета наружных половых органов.
8. Кал на копрограмму
Правила сбора кала: кал собирается после самопроизвольной дефекации в специально предназначенную посуду или спичечный коробок.
Нельзя направлять материал для исследования после клизмы, приема медикаментов, влияющих на перистальтику (белладонна, пилокарпин), окраску кала (железо, висмут), после приема касторового или вазелинового масла, после введения свечей, приносить в КДЛ фекалии в памперсах. Кал не должен содержать мочю. Емкость с фекалиями доставляется в лабораторию сразу после дефекации или не позднее 10-12 часов при условии хранения в холодильнике при t +3-5°С.
9. Реакция Грегерсена (на скрытую кровь)
Больной за 3–5 дней не должен есть мясо, рыбу, томаты, их можно заменить молочно-крупяными блюдами. Пациент не должен чистить зубы. Собирают небольшое количество кала после свободной дефекации во флакон.
10. Мокрота на общий анализ, мокрота на ВК, (M.tuberculosis, Candida albicans)
Мокрота доставляется в лабораторию в широкогорлой стеклянной посуде (флаконе). Методика собирания мокроты: после неоднократного откашливания, после тщательного туалета ротовой полости (чистка зубов, полоскания водой ротовой полости, до приема пищи). В случае отсутствия мокроты у больного необходимо применение раздражающих методов по рекомендации врача. В случае скудного количества мокроты можно собирать мокроту в течение суток, храня ее в прохладном месте.
Весь биологический материал регистрируется по направлениям в кабинете 341 в компьютерную систему, а сам доставляется на рабочие места для выполнения исследований.
6.1.3. ПРАВИЛА ЗАБОРА ВЫДЕЛЕНИИЙ ПОЛОВЫХ ОРГАНОВ, СОСКОБОВ ИЗ УРЕТРЫ, ВЛАГАЛИЩА, ГЛАЗ
1. Забор материала из уретры или влагалища на общеклинические исследования производится ложкой Фолькмана. Взятый исследуемый материал и наносят на предметное стекло, которое с направлением доставляют в кабинет 300, пациенты регистрируются в ГИС и ЛИС в кабинете 341 и материал поступает на исследование в лабораторию клинических исследований вместе с направлением и заданием.
2. Забор материала для обнаружения хламидий, уреаплазм, микоплазм методом РИФ (люминесцентная микроскопия).
Приготовление мазков производит врач-гинеколог, уролог или акушерка во время приема пациентов. Важным условием является наличие цилиндрического эпителия и как можно меньшее количество лейкоцитов и плоского эпителия.
- технология взятия мазка из уретры - cтерильный ватный тампон вводят в уретру у мужчин на 2,5–4 см, у женщин на 1–1,5 см. Материал собирают вращательным движением тампона, затем многократно (10–15 раз) касаются тампоном поверхности лунки стекла. Сразу фиксируют стекло 96% спиртом до полного испарения. Стекло может храниться в сухом холодном месте в течение недели;
- технология взятия мазка из цервикального канала - слизистую пробку и гнойное отделяемое тщательно удаляют стерильным ватным тампоном. Затем берут соскоб ложечкой Фолькмана или ватным тампоном, вводимым в цервикальный канал, бескровно, при визуальном контроле. Вынимают тампон, не касаясь стенок влагалища, и делают мазок (многократно касаются тампоном поверхности лунки стекла). Сразу фиксируют стекло 96% спиртом до полного испарения. Стекло может храниться в сухом холодном месте в течение недели;
- технология взятия мазка из глаз - удалить отделяемое нижнего века стерильным ватным тампоном. Другим стерильным ватным тампоном тщательно соскоблить эпителиальные клетки с конъюнктивы нижнего века. Затем многократно (10–15 раз) касаются тампоном поверхности лунки стекла. Сразу фиксируют стекло 96% спиртом до полного испарения. Стекло может храниться в сухом холодном месте в течение недели.
3. Правила забора материала на спермограмму:
1. До исследования спермы необходимо половое воздержание в течение 2-7 дней.
2. В течение недели перед исследованием не употреблять алкоголь.
3. Исследование спермы не проводится, если в течение 7-10 дней перед анализом были простудные или другие острые воспалительные заболевания, а также непосредственно после массажа простаты.
4. Накануне сдачи спермы необходимо исключить тяжелые физические и эмоциональные нагрузки.
5. Сперму получают путем мастурбации.
6. Недопустимо использовать презерватив.
7. Материал следует доставить в лабораторию в течение 1 часа после получения, избегая его охлаждения ниже 20°С.
8. Отметить на направлении время сбора. С этого времени до момента доставки в лабораторию должно пройти не более 30–40 мин.
9. Указать принимаемые в данный момент медицинские препараты (лекарства).
10. Собранный материал отдается лично в руки лаборанту.
11. Прием материала с 8 до 10 часов (кабинет 112).
4. Сок простаты
Сок берут после энергичного массажа предстательной железы. В зависимости от его количества забор проводят в пробирку или на предметное стекло. Независимо от того, получен материал или нет, необходимо исследовать первую порцию мочи, выделенную после массажа, та как основная его масса затекает в мочевой пузырь, где могут содержаться большое количество элементов простатического сока. Производят общий анализ сока простаты и его исследование на наличие гонококков.
Приготовление препарата. Каплю жидкости помещают на предметное стекло и накрывают покровным. Исследуются нативные и окрашенные препараты (по Романовскому и Грамму).
Препараты мочи исследуются после центрифугирования.
6.1.4. ПРАВИЛА ЗАБОРА МАТЕРИАЛА ДЛЯ ЦИТОЛОГИЧЕСКИХ
И ГИСТОЛОГИЧЕСКИХ ИССЛЕДОВАНИЙ
1. Общие положения
Цитологические исследования в настоящее время — признанный полноценный метод морфологического анализа, основанный на изучении и оценке клеточного материала, полученного разными способами из патологического очага (эксфолиативный материал, пункционный материал, биопсийный и операционный материал).
А. Исследуемый материал
Эксфолиативный материал:
Отделяемое различных органов (молочная железа, влагалище, мочевой пузырь и др.); соскобы и отделяемое с поверхности эрозий, язв, ран, свищей; соскобы с шейки матки и цервикального канала, аспираты из полости матки; секреты желез, экскреты, мокрота, транссудаты, экссудаты, промывные воды и т.д.
Пункционный материал:
Пунктаты, полученные тонкой иглой (тонкоигольная биопсия) из опухолей, предопухолевых и опухолеподобных образований и уплотнений различной локализации (кожа, молочная железа, легкие, средостение, печень, почки, забрюшинные образования, щитовидная железа, предстательная железа, яичко, яичники, лимфатические узлы, миндалины, слюнные железы, мягкие ткани, кости).
Биопсийный и операционный материал:
Материал, полученный при проведении хирургических вмешательств (мазки-отпечатки, соскобы со свежего разреза удаленной ткани).
Материал, полученный при проведении эндоскопического исследования (ларингоскопии, бронхоскопии, эзофагоскопии, гастроскопии, дуоденоскопии, лапароскопии, колоноскопии и т.д.).
Взятие материала для цитологических исследований, как правило, проводит врач (с помощью медицинской сестры): врач-эндоскопист, врачи-клиницисты разного профиля (терапевты, хирурги, онкологи, гинекологи, эндокринологи), в некоторых случаях — врачи-цитологи.
2. Взятие, условия хранения и доставка материала для цитологического исследования
Правила забора материала
Пункционная цитология
Пункция опухолевых образований производится, как правило, тонкой иглой. Для получения полноценного материала необходимо соблюдать ряд условий. В частности, игла и щприц для пункции должны быть сухими. Не следует проводить предварительную анестезию (введение новокаина). Для пункции богато васкулизированных образований (щитовидная железа, сосудистые опухоли, кость и др.) необходимо использовать иглу с мандреном, последний извлекается после введения иглы в места, из которого предполагается получить материал. Таким же образом, соблюдая вышеописанные правила и используя специальные приспособления, осуществляют пункции под контролем рентгена, ультразвука или компьютерной томографии.
Эксфолиативная цитология
Для приготовления препарата капля отделяемого наносится на стекло и готовится мазок. Можно также делать отпечатки с места выделения (сосок молочной железы, выходное отверстие свища). Отделяемое бронхов обычно в виде мокроты собирается в сосуд.
Жидкости и содержимое кист получают путем пункции полостей (брюшной, плевральной и др.) и кист. Если материала мало, то он наносится на стекло в виде тонкого мазка. Значительные количества жидкости предварительно центрифугируются и затем мазки готовят из осадка. Таким же образом обрабатывается материал промывных вод.
Отпечатки со слизистых и кожных покровов, если это доступно, можно делать непосредственно на стекло. В других случаях мазки готовят из соскобов шпателем, с тампонов.
3. Эндоскопическая цитология
В современных эндоскопических приборах имеются специальные приспособления для взятия материала на морфологическое исследование. При эндоскопии могут быть получены в частности:
- промывные воды;
- мазки щеточкой;
- мазки тампоном;
- мазки-отпечатки щипковых биопсий.
Цитология биопсийного и операционного материала
Для приготовления препарата необходимо соскоб со среза биоптата или операционного материала распределить тонким мазком на стекле. Отпечатки со среза биоптата или кусочка оперативно удаленной ткани наносятся прикосновением поверхности среза к стеклу. Если отпечатки делают с ткани богатой кровью (печень, селезенка и др.), с поверхности, среза необходимо снять кровь на фильтровальную бумагу и лишь затем производить отпечатки на стекло.
Цитологическому исследованию обязательно должны подвергаться пунктаты серозных полостей, кист, отделяемое из молочной железы и др. Стекла для препарата должны быть чистые, обезжиренные и сухие.
3. Взятие, условия хранения и доставка материала для гистологического исследования
Диагностическая ценность метода выражается в прижизненной морфологической диагностике заболеваний и патологических процессов, в динамическом контроле эффективности лечения, в оценке качества клинической диагностики и лечения.
Исследуемый материал:
- биопсийный
- операционный
- пункционный
Взятие материала для гистологических исследований производит врач – эндоскопист, врачи-клиницисты разного профиля (хирурги, онкологи, гинекологи и др.)
Полученный материал доставляют в лабораторию с направлением, в котором должны быть представлены паспортные данные обследуемого пациента, диагноз, проведенная терапия, клинические данные, точно должно быть указано место участка, откуда был взят материал.
4. Взятие, условия хранения и доставка материала для иммуноцитологичекого, иммуногистохимического исследования:
Иммуноцитохимическое исследование
Из кусочка ткани сделать 2–3 отпечатка на обезжиренном предметном стекле, отступая 1 см от узкого края стекла. Отпечатки маркировать и высушить 30 мин. на воздухе при комнатной температуре. Хранить при +20°С.
Иммуногистологическое исследование
Полученный материал немедленно опускается в специальный сосуд с фиксатором (10% нейтральный формалин). Объем фиксатора должен превышать объем фиксируемого материала в 10-20 раз. В том случае, если цвет фиксатора изменяется после погружения в него кусочков ткани, фиксатор необходимо немедленно сменить. Недопустимо повторное использование фиксатора.
5. Взятие, условия хранения и доставка биоматериала для гистологического и морфометрического исследования на целиакию.
Для гистологической диагностики целиакии во время эндоскопического исследования берется биоптат слизистой оболочки тонкой кишки. У детей в связи со сложностью прохождения эндоскопа в тонкую кишку дистальнее связки Трейтца, удобнее всего брать биоптат из слизистой оболочки постбульбарного отдела двенадцатиперстной кишки. При этом важно свести к минимуму повреждения (фрагментацию, сдавление и т. п.) извлекаемого материала, поскольку возникающие в такой ситуации артефициальные изменения в биоптате не позволяют провести полноценное гистологическое (тем более - морфометрическое) исследование, а иногда и вовсе исключают всякую возможность морфологической диагностики. Не следует производить взятие материала из слизистой оболочки луковицы двенадцатиперстной кишки.
Полученный биоптат (или биоптаты) следует сразу же поместить в емкость с фиксатором (лучше всего - пластиковая микропробирка с крышкой). По мнению большинства исследователей, для «рутинной» обработки материала более всего подходит 10% процентный раствор нейтрального формалина. Материал в нем фиксируется на протяжении 24 ч. При необходимости проведения других (например, гистохимического) исследований применяются и другие способы фиксации.
Перед тем как начать приготовление блока для получения гистологических срезов, очень важно правильно ориентировать биоптат. Некорректное положение биоптата чаще всего является следствием бесконтрольной подачи материала в заливку парафином. Многие исследователи предлагают различные способы ориентировки биоптата в блоке с целью обеспечения получения правильного (в вертикальной плоскости) гистологического среза.