Методичні вказівки та контрольні завдання з біологічної хімії для студентів факультету заочного навчання

Вид материалаДокументы

Содержание


ХІД ВИКОНАННЯ ПРАКТИЧНОГО ЗАНЯТТЯ Якісні реакції на складові частини нуклеопротеїдів
Хід роботи.
Д о с л і д 1. Біуретова проба на поліпептиди.
Д о с л і д 2. Срібна проба на пуринові основи.
Д о с л і д 3. Проба Тромера на рибозу і дезоксирибозу.
Д о с л і д 4. Реакція на дезоксирибозу й рибозу.
Д о с л і д 5. Молібденова проба на фосфорну кислоту.
Значення для фармації та клініки
Визначення кінцевого рівня знань
Ситуаційні задачі
Подобный материал:
1   2   3   4   5   6   7   8   9   ...   29

ХІД ВИКОНАННЯ ПРАКТИЧНОГО ЗАНЯТТЯ

Якісні реакції на складові частини нуклеопротеїдів


Принцип методу. Для вивчення хімічного складу нуклеопротеїдів зручно користуватися дріжджевими клітинами. Продукти гідролізу можна виявити в гідролізаті специфічними реакціями для кожної речовини.

Хід роботи. У велику широку пробірку (15 x 1,5 см.) кладуть 500 мг. Пекарських дріжджів або 100 мг сухих дріжджів, заливають 4 мл 10%-го розчину H2SO4. Пробірку закривають корком, у який вставлена трубка довжиною 25-30 см, яка служить холодильником, збовтують і ставлять в кип’ячену водяну баню.

Через 1-1,5 годин після початку кипіння рідину остужують і фільтрують. У фільтраті виявляють продукти гідролізу нуклеопротеїдів: поліпептиди, пуринові і піримідинові азотисті основи, рибозу, дизоксирибозу і фосфорну кислоту.

Д о с л і д 1. Біуретова проба на поліпептиди.

До 5 крапель гідролізату додають 10 крапель 10%-го розчину NaOH і 1 краплю 1%-го розчину CuSO4.Рідина забарвлюється в рожево-фіолетовий колір.

У висновку пояснити, що в даній реакції виявляються пептидні зв'язки, якими амінокислоти сполучаються між собою.

Д о с л і д 2. Срібна проба на пуринові основи.

10 крапель гідролізату нейтралізують конц.аміаком і додають 5 крапель 1№-го розчину AgNO3. При стоянні через 3-5 хвилин випадає невеликий пухкий осад світло – коричневого кольору срібних солей пуринових основ (аденіну,гуаніну).Реакція протікає за рівнянням:


Д
о с л і д 3. Проба Тромера на рибозу і дезоксирибозу.


До 5 крапель гідролізату додають 10 крапель 30%-го розчину NaOH і 5-10 крапель 7%-го розчину CuSO4 до появи муті Cu(OH)2, яка не зникає. Рідину змішують і верхній її шар нагрівають до кипіння. Випадає червоний осад закису міді (внаслідок окиснення рибози і відновлення гідрату окису міді до закису). У висновку звертається увага на те, що рибоза окислюється, а гідрат окису міді відновлюється до закису міді.

Д о с л і д 4. Реакція на дезоксирибозу й рибозу.

До 5 крапель гідролізату додають 20 крапель 1%-го розчину дифеніламіну і кип’ятять на водяній бані 15 хвилин; при цьому утворюється синьо – зелене забарвлення, що вказує на присутність пептоз.

Д о с л і д 5. Молібденова проба на фосфорну кислоту.

До 10 крапель молібденового реактиву (розчин молібденового амонію в азотній кислоті) додають 5 крапель гідролізату і кип’ятять декілька хвилин на відкритому вогні. В присутності фосфорної кислоти рідина забарвлюється в лимонно-жовтий колір. При охолодженні випадає жовтий кристалічний осад комплексної сполуки фосфорномолібденового амонію. Молібденова проба на фосфорну кислоту:

H3PO4 + 12(NH4)2MoO4 + 21HNO3 (NH4)3PO4 ∙MoO2 + 21NH4NO3 + 12H2O

У висновку акцентується увага на утворенні комплексної сполуки фосфорномолібденового амонію.

Результати досліджень оформлюють у вигляді таблиці:

Назва

реакції

Продукти гідролізу нуклеопротеїдів

Компоненти нуклеопротеїдів



ЗНАЧЕННЯ ДЛЯ ФАРМАЦІЇ ТА КЛІНІКИ


Аналіз ДНК є стандартним дослідженням все більшої кількості спадкових захворювань. Він може бути використаний для генотипування фтальної тканини в пренатальній діагностиці, яку застосовують для генотипування потенційних батьків.

Похідні азотистих основ широко застосовуються у практичній медицині. Так меркаптопурин має антилейкемічну активність, що зумовлена його біологічною активністю як антиметаболіта пуринів. Фторурацил і фторофур як структурні аналоги піримідинів мають протипухлинну активність, що зв’язана з перетворенням їх у 5-фтор-2дезоксиуридин- 5’монофосфат, який є конкурентним інгібітором тимідилатсиптетази.


Визначення кінцевого рівня знань

Приклад тестового контролю кінцевого рівня знань

Тест 1

№п/п

Умова

РНК

ДНК


1


2


3

Вказати основні характеристики РНК і ДНК.

Молекулярна маса: 25 000

100 000

1 000 000

Локалізація в клітині: ядро

мітохондрії

цитоплазма

рибосома

апарат Гольджі

Функції: перенесення амінокислот

перенесення інформації на РНК

перенесення інформації на білок








Тест 2.

№п/п

Умова

РНК

ДНК



1


2


3

4

5

6

7


8

9

10

Вказати основні характеристики структури ДНК і РНК.

Ознаки: первинна

вторинна

третинна

Один виток дезоксиполінуклеотидної біспіралі має 10 пар нуклеотидних залишків

Односпіральна

Біспіральна

Віддаль між залишками сусідніх дезоксирибонуклеотидів складає 0,56 нм

Крок спіралі рівний 0,34 нм

Зовнішній діаметр біспірального дезоксиполірибонуклеотида 1 нм

Спіраль антипаралельна

Спіраль комплементарна

Фосфодіефірний 3’-5’ міжнуклеотидний зв’язок








Тест 3.

У молекулі ДНК число залишків тиміну рівне числу залишків:

А. Аденіну

В. Гуаніну

С. Цитозину

D. Урацилу

Е. Ксантину


Тест 4.

З нижчеперерахованих сполук нуклеозидами є:

А. Аденозин

В. 2-дезокситимідин

С. Цитозин

D. Гуанілова кислота

Е. Урідинрибонуклеозидмонофосфат

Ситуаційні задачі


1. У виділеному з кишечної палички розчині нуклеїнових кислот виявили аденін, гуанін, цитозин, фосфорну кислоту. Які реакції підтверджують, що виділили ДНК?

2. У виділеній з селезінки речовині виявлені: дезоксирибоза, тимін, аденін, гуанін, цитозин, фосфорна кислота.Назвіть сполуку, яка виділена.

3. У гідролізаті дріжджів виявлені рибоза, аденін, гуанін, цитозин, урацил. До складу якої сполуки входять ці компоненти?

4. Гідролізат виділеного з молока білка дає позитивні реакції: біуретову, і з молібденовокислим амонієм. Який було виділено білок?


Питання для контролю виконання практичної роботи.
  1. Що таке повний і неповний гідроліз нуклеопротеїдів?
  2. Назвіть продукти гідролізу нуклеопротеїдів?
  3. Які продукти гідролізу виявляються пробою Тромера?
  4. Які продукти гідролізу дають біуретову реакцію?