Тезисы докладов

Вид материала

9. Лекарственные препараты ЦИТО- И ГЕНОТОКСИЧЕСКАЯ АКТИВНОСТЬ КАТИОННЫХ НИТРОЗИЛЬНЫХ КОМПЛЕКСОВ ЖЕЛЕЗА С ПРИРОДНЫМИ АМИНОТИОЛИЛА
С.М.Алдошин, Н.А.Санина, С.В. Васильева, Д.А.Стрельцова
Улучшение локализационных способностей слуховой системы с помощью нового способа кодирования звука для целей кохлеарного протези
Я.А. Альтман, Н.Н. Бехтерев

Подобный материал:

1 ... 41 42 43 44 45 46 47 48 ... 78

9. Лекарственные препараты

ЦИТО- И ГЕНОТОКСИЧЕСКАЯ АКТИВНОСТЬ КАТИОННЫХ НИТРОЗИЛЬНЫХ КОМПЛЕКСОВ ЖЕЛЕЗА С ПРИРОДНЫМИ АМИНОТИОЛИЛАМИ

С.М.Алдошин¹⁾, Н.А.Санина¹⁾, С.В. Васильева²⁾, Д.А.Стрельцова²⁾

¹⁾Институт проблем химической физики РАН, Черноголовка

²⁾Институт биохимической физики РАН им. Н.М. Эмануэля, Москва

Проявление цито- и генотоксичности химиотерапевтических препаратов в значительной мере лимитирует их практическое применение. На клеточном уровне – генетически-маркированных штаммах E. coli – впервые проведено количественное изучение цито- и генотоксической активности новых противоопухолевых препаратов из класса нитрозильных комплексов железа – ПЕНАКОНИТа и ЦИСАКОНИТа [1]. Генотоксическую активность изучали in vitro – по уровню экспрессии гена sfiA SOS-репарационного ответа в широком диапазоне доз от 0,0005 до 0,5 мМ. Использование этой методологии позволило не только количественно оценить процесс формирования в клетке одно- и двунитевых разрывов ДНК, но также прогнозировать (и далее – экспериментально подтвердить) мутагенную активность соединений-индукторов и развитие апоптоза. Установлено, что ПЕНАКОНИТ проявляет выдающуюся SOS-индуцирующую активность: при концентрации 0,05–0,1 мМ превышение уровня экспрессии над спонтанным фоном составило 7,5 раз (при очень низкой цитотоксичности, соответствующей 90 % выживших клеток). Подобные результаты не были отмечены ни для одного из соединений этого класса доноров NO, изученных нами ранее. Кроме того, ПЕНАКОНИТ усиливал экспрессию гена-репортера в широком диапазоне доз: от 0,001 до 0,1 мМ. Токсичной для клетки была концентрация ПЕНАКОНИТа 0,5 мМ. При концентрации ЦИСАКОНИТА 0,05 мМ превышение экспрессии гена-репортера над спонтанным фоном составило 1,95 раза. При сравнении генотоксической активности эквимолярной (0,01 мМ) концентрации обоих изученных соединений лидером является ПЕНАКОНИТ›Цис (2,12 раза превышение спонтанного фона по сравнению с показателем для ЦИСАКОНИТа (1,33). Количество NO, генерируемое этими донорами в водных растворах in vitro в концентрации 0,4.10^-6М, повторяет эту тенденцию: установлена прямая корреляция между интенсивностью NO-донирования и потенциальной генотоксичностью изученных доноров. Доказано экспериментально, что препарат ЦИСАКОНИТ проявляет цитотоксический эффект на опухолевых клетках эритробластного лейкоза человека линии К562. Клетки выращивали на среде RPMI1640, содержащей 10 % эмбриональную сыворотку теленка при 37 ⁰ С, 5 % СО₂и 100 % влажности. Тестирование цитотоксической активности ЦИСАКОНИТа проводили стандартным МТТ-тестом, основанным на способности дегидрогеназ живых клеток восстанавливать неокрашенный МТТ-реагент в виде синих кристаллов формазана, растворимых в диметилсульфоксиде (ДМСО). Оптическое поглощение окрашенных растворов ДМСО измеряли на автоматическом счетчике. Апоптотическую активность ЦИСАКОНИТа исследовали количественно с помощью флуорохромных ингибиторов каспаз методом проточной цитометрии. Установлено, что ЦИСАКОНИТ инициирует активность каспаз 3 и 7 и является индуктором апоптоза в клетках К562: в присутствии ЦИСАКОНИТа (в концентрации 50 мкМ) зарегистрировано 77 % клеток в апоптозе.

[1] Н.А. Санина, Т.Н. Руднева, К.А. Лысенко, О.С. Жукова, Н.С.Емельянова, С.М. Алдошин. Водорастворимые биядерные катионные нитрозильные комплексы железа с природными алифатическими тиолилами, обладающие цитотоксической, апоптотической и NO-донорной активностью, заявка № PCT/RU2008/000338 от 02.06.2008.

Работа выполнена при поддержке Программы Президиума РАН N15 «Фундаментальные науки – медицине».

УЛУЧШЕНИЕ ЛОКАЛИЗАЦИОННЫХ СПОСОБНОСТЕЙ СЛУХОВОЙ СИСТЕМЫ С ПОМОЩЬЮ НОВОГО СПОСОБА КОДИРОВАНИЯ ЗВУКА ДЛЯ ЦЕЛЕЙ КОХЛЕАРНОГО ПРОТЕЗИРОВАНИЯ ГЛУХИХ ПАЦИЕНТОВ

Я.А. Альтман, Н.Н. Бехтерев

Институт физиологии им. И.П. Павлова РАН, Санкт-Петербург

Потеря способностей локализовать источники звука при приобретенной полной глухоте и глубокой тугоухости препятствует формированию адекватного поведения человека в окружающей среде. Попытки восстановления этих способностей после билатерального кохлеарного протезирования, осуществляемые в последние несколько лет на основе использования прежних стратегий преобразования звуковых сигналов в электростимулирующий эквивалент в протезах, дали очень скромные результаты (Grantham D.W. et al., Ear Hear., 2007, v. 28, p. 524-541), фактически выявив лишь преимущества двусторонне вживленных устройств над односторонне вживленными.

Целью проведенного исследования было детальное изучение способностей слуховой системы локализовать стационарный источник звука за счет анализа межушных различий стимуляции 1) по времени и 2) по интенсивности при преобразовании акустических сигналов в электростимулирующий эквивалент разработанным в лаборатории и традиционно применяемым способами и при звуковом раздражении. Характеристики, полученные при использованных в модельных экспериментах на животных видах раздражения и регистрации нейрональной активности слуховой коры больших полушарий мозга, сопоставлялись между собою. Сравнение проявлений локализационных способностей позволяло выявить преимущества одной из разновидностей электрической стимуляции над другой для достижения конечной цели – возникновения в условиях билатеральной электрической стимуляции обеих улиток внутреннего уха слуховых ощущений, соответствующих истинному положению источника звука в пространстве.

Полученные в исследовании данные в случае оценки положения источника звука на основе межушных различий стимуляции по времени позволили обнаружить сходство между проявлениями локализационных способностей слуховой системы при двух видах электрического и при звуковом раздражениях лишь в очень узком надпороговом диапазоне интенсивностей раздражения, в среднем, до 1.6 дБ. При более громких звуках – в пределах низких и средних интенсивностей (в среднем до 44 дБ) – проявления способностей локализовать источник звука в любой точке горизонтальной плоскости в пределах передней полусферы пространства, зависимость данных способностей от общего уровня интенсивности и дифференциальная чувствительность к локализационным параметрам сходны лишь при разработанном способе преобразования звука и акустическом раздражении. При традиционном трансформации параметров звука наблюдаются существенно возрастающее ухудшение всех оцениваемых характеристик начиная уже с надпороговых уровней интенсивности выше, в среднем, 1.6 дБ; при интенсивностях, в среднем, 7.4 дБ и более над порогом реакции проявления локализационных способностей отсутствуют. Сходные результаты получены при использовании межушных различий стимуляции по интенсивности, причем недостатки традиционного способа преобразования звука выражены еще сильнее. Результаты исследования неоспоримо свидетельствуют о преимуществе разработанного в лаборатории способа кодирования параметров звука над традиционным в обеспечении точности определения положения стационарных источников звука в пространстве.