Тезисы докладов

Вид материала

1. Нейродегенеративные заболевания ИССЛЕДОВАНИЕ МЕТОДОМ ХРОМАТО-МАСС-СПЕКТРОМЕТРИИ ВЛИЯНИЯ РЕВАСТИГМИНА И МЕМАНТИНА
А.В.Алесенко , Ю.О.Каратассо, А.А.Коротаева, Я.Б.Федорова, С.И.Гаврилова
А.С.Базян, Ю.С.Украинцева, В.А.Коршунов, Н.В.Щеголевский, А.А.Фоломкина, В.Н. Мац, Г.А.Григорьян

Подобный материал:

1 2 3 4 5 6 7 8 9 ... 78

1. Нейродегенеративные заболевания

ИССЛЕДОВАНИЕ МЕТОДОМ ХРОМАТО-МАСС-СПЕКТРОМЕТРИИ ВЛИЯНИЯ РЕВАСТИГМИНА И МЕМАНТИНА

НА СПЕКТР МОЛЕКУЛЯРНЫХ ВИДОВ ХОЛИНСОДЕРЖАЩИХ ФОСФОЛИПИДОВ В ПЛАЗМЕ КРОВИ ПАЦИЕНТОВ С БОЛЕЗНЬЮ АЛЬЦГЕЙМЕРА

А.В.Алесенко ¹⁾, Ю.О.Каратассо¹⁾, А.А.Коротаева¹⁾, Я.Б.Федорова²⁾, С.И.Гаврилова²⁾

¹⁾Институт биохимической физики РАН, Москва

²)Научный центр психического здоровьяРАМН, Москва

Болезнь Альцгеймера характеризуется нарушением когнитивных функций мозга, снижением памяти и интеллекта, что сопровождается выраженными патологическими поведенческими симптомами. Однако точные молекулярные механизмы этиологии и патогенеза болезни Альцгеймера остаются неизвестными. В настоящее время акцент многих исследований причин гибели нейронов при деменции альцгеймеровского типа концентрируется на функции липидов, которые, как предполагается, могут играть ключевую роль в амилоидогенезе и нейрональной дисфункции.

В настоящее время в клинической практике для лечения болезни Альцгеймера применяется ряд препаратов, влияющих на когнитивные функции мозга. Наиболее эффективными являются ингибиторы холинэстеразы – фермента, функция которого резко повышена при болезни Альцгеймера, и ингибиторы глутаматергической системы, функция которой также изменяется в ходе развития этого заболевания. Однако влияние этих препаратов на липидный метаболизм и возможную его коррекцию в процессе лечения не изучалось.

Целью нашего исследования явилось определение методом хромато-масс-спектрометрии влияния ривастигмина – ингибитора холинэстеразы и мемантина – неспецифического ингибитора глутаматных рецепторов на содержание фосфолипидов, которые в своем составе содержат холиновую группировку, и изменение спектра их молекулярных видов. Нарушения в метаболизме этих фосфолипидов может влиять на холинэргическую систему за счет изменения баланса холина и лиганд-рецепторного взаимодействия, определяемого структурированностью мембран клеток нервной системы. Ривастигмин через три месяца и мемантин через шесть месяцев их применения для лечения болезни Альцгеймера приводят к снижению уровня всех холинсодержащих фосфолипидов в плазме крови пациентов. Детектирование по молекулярным массам отдельных типов фосфолипидов показало избирательность действия препаратов на определенные молекулярные виды тех или иных фосфолипидов. Нами впервые показано влияние ингибитора холинэстеразы на изменение уровня сфингомиелина в липидах крови пациентов с болезнью Альцгеймера. Следует подчеркнуть, что, в основном, одна и та же группа молекулярных видов всех изученных фосфолипидов подвергается действию препаратов, имеющие различные белковые мишени. Как показывает клиническая практика, наиболее эффективными являются те препараты, которые способны демонстрировать политаргетную способность. Нарушения в липидном метаболизме относится к основным критериям многих патологий, поскольку структура мембраны клетки, а также процессы, происходящие на ее поверхности, определяются липидной составляющей мембраны. Следовательно, если препараты наряду с другими функциями, способны вызывать коррекцию в липидном метаболизме в сторону его нормализации, то они могут рассматриваться как наиболее перспективные при лечении нейродегенераций, в том числе и альцгеймеровского типа.

MPTP МОДЕЛЬ БЕССИМПТОМНОЙ ФАЗЫ БОЛЕЗНИ ПАРКИНСОНА У МЫШЕЙ ЛИНИИ C57BL/6: МИКРОДИАЛИЗ ДОФАМИНА И ЕГО МЕТАБОЛИТОВ ИЗ СТРИАТУМА МЫШЕЙ, АНАЛИЗ ВОЗМОЖНЫХ КОМПЕНСАТОРНЫХ ПРОЦЕССОВ

А.С.Базян, Ю.С.Украинцева, В.А.Коршунов, Н.В.Щеголевский, А.А.Фоломкина, В.Н. Мац, Г.А.Григорьян

Институт высшей нервной деятельности и нейрофизиологии РАН, Москва

Одними из наиболее распространенных факторов, которые вызывают болезнь Паркинсона, являются инсектициды (1-methyl-4-phenyl-1,2,3,6-tetrahydropyridine – MPTP и ротенон). Их специфическое токсическое действие у мышей, приматов и людей, проявляется в гибели нейронов компактной части черного вещества (substantia nigra pars compacta – PcSN) нигростриатной дофаминергической (ДА) системы.

Одной из наиболее актуальных и практических задач, связанных с исследованиями болезни Паркинсона является, на наш взгляд, выявление ранних бессимптомных или досимптомных фаз заболевания, при которых уже имеются специализированные морфогистохимические и нейрохимические нарушения в нигростриатной ДА системе, но пока еще отсутствуют специфические двигательные расстройства характерные для болезни Паркинсона. Отсутствие двигательных расстройств, вероятно, связано с компенсаторными процессами, которые сопровождают ранние этапы заболевания. Можно полагать, что целенаправленное усиление компенсаторных механизмов нивелирует уже имеющиеся нарушения и облегчает состояние больного. Компенсаторные механизмы это многоуровневые процессы, которые с одной стороны связаны с нигростриатной ДА системой, а с другой – с иными медиаторными и модуляторными системами, вовлекаемыми в реализацию заболевания.

Комбинацией методов микродиализа и HPLC in vivo исследована межклеточная концентрация ДА и его метаболитов в стриатуме мышей линии C57BL/6 через 2 недели после однократной внутрибрюшинной инъекции MPTP (12 мг/кг). Эта процедура не вызывала у животных нарушений поведения в «открытом поле» и не влияла на длину шага мышей. Животных подготавливали для нас наши коллеги из Института общей патологии и патологической физиологии РАМН, под руководством академика РАМН Крыжановского Г.Н. и д.м.н. Кучеряну В.Г. Опыты проводились на 17 самцах мышей линии C57BL/6 (8 контрольных и 9 опытных) в возрасте 3 – 4 месяца и массой 28 – 32 грамма. За двое суток до эксперимента мышей анестезировали смесью золетил (Zoletil-100, 40 мг/кг) / Рометар (миорелаксант, 20 мг/кг) интраперитонеально и помещали в стереотаксис. Интересно, что экспериментальным животным приходилось давать более высокие дозы анестезирующих веществ (55 / 32 мг/кг, соответственно). Скальпирование производили под дополнительной новокаиновой блокадой (2 % подкожно). В костях черепа сверлили трепанационное отверстие для канюли, которую позднее вводили в мозг по координатам атласа Паксиноса и Франклина (Paxinos, Franklin, 2001) (АР=+0,5 мм; L=1,7 мм; Н=3,5 мм от поверхности мозга). После исследований проводили морфологический контроль. Исследования показали, что через 2 недели после однократной инъекции MPTP (12 мг/кг) наблюдается практически 2-кратное уменьшение межклеточной концентрации ДА в стриатуме по сравнению с контрольными животными. Межклеточная концентрация основных метаболитов ДА (ДОФУК и ГВК) у опытных животных достоверно не меняется по отношению к контрольным мышам. Но под влиянием инъекции MPTP у мышей линии C57BL/6 значительно увеличивается межклеточная концентрация L-DOPA в стриатуме, практически в 2 раза по сравнению с контрольными крысами. Увеличение межклеточной концентрации L-DOPA можно рассматривать как компенсаторный механизм, направленный на уменьшение дефицита межклеточной концентрации ДА.