Тезисы докладов

Вид материала

Тезисы

Содержание Выяснение роли новых амилоидных саркомерных цитоскелетных белков в патогенезе амилоидозов с целью разработки методов их ранней д З.А. Подлубная, И.Я. Подольский, Л.Г. Марсагишвили Р.У. Островская, А.Б. Гехт Развитие нового подхода к основам этиопатогенеза сердечно-сосудистых заболеваний (в аспекте изменений коллагена соединительной т В.П. Барграсер, В.А. Намиот, Ю.В. Мильчевский, Н.Г. Есипова Ниияф мгу

Подобный материал:

• Тезисы докладов, 4952.24kb.
• Тезисы докладов, 1225.64kb.
• Правила оформления тезисов докладов Тезисы докладов предоставляются в электронном виде, 22.59kb.
• «Симпозиум по ядерной химии высоких энергий», 1692.86kb.
• Требования к тезисам докладов, 16.83kb.
• Тезисы докладов научно-практической, 6653.64kb.
• Тезисы докладов 1 Межвузовская научно -практическая конференция студентов и молодых, 100.64kb.
• Тезисы докладов и заявки на участие, 104.97kb.
• Тезисы докладов, принятые Оргкомитетом для опубликования в Материалах форума, 788.61kb.
• Тезисы докладов, принятые Оргкомитетом для опубликования в Материалах форума, 1066kb.

ВЫЯСНЕНИЕ РОЛИ НОВЫХ АМИЛОИДНЫХ САРКОМЕРНЫХ ЦИТОСКЕЛЕТНЫХ БЕЛКОВ В ПАТОГЕНЕЗЕ АМИЛОИДОЗОВ

С ЦЕЛЬЮ РАЗРАБОТКИ МЕТОДОВ ИХ РАННЕЙ ДИАГНОСТИКИ И КОРРЕКЦИИ

З.А. Подлубная^1,2), И.Я. Подольский¹⁾, Л.Г. Марсагишвили¹⁾,

М.Д. Шпагина¹⁾, И.М.Вихлянцев¹⁾, А.А. Федюшин²⁾, Т.В. Гордиенко²⁾,

Р.У. Островская³⁾, А.Б. Гехт⁴⁾

¹⁾Институт теоретической и экспериментальной биофизики РАН, Пущино;

²⁾Больница Пущинского научного центра РАН, Пущино;

³⁾Институт фармакологии им. В.В. Закусова РАМН, Москва;

⁴⁾Российский Государственный медицинский университет, Москва


Амилоидные отложения, образующиеся в органах и тканях в результате наследственного или приобретенного нарушения сворачивания белков, играют центральную роль в патогенезе болезней, от которых страдают миллионы пациентов (болезнь Альцгеймера, Паркинсона, синдром Дауна, диабет второго типа, кардиопатический амилоидоз, системные амилоидозы, прионные болезни и др.). Эти болезни – главная причина смерти после сердечно-сосудистых и онкологических заболеваний. Молекулярные механизмы амилоидозов до конца неясны. Их выяснение необходимо для их предупреждения, ранней диагностики и назначения своевременного, эффективного лечения. Для этого необходимо знание амилоидогенеза: выявление общих свойств амилоидов, образуемых разными белками, знание факторов, регулирующих их образование и разрушение, их эффектов на жизнедеятельность клеток и т. д. В рамках программы Президиума РАН «Фундаментальные науки – медицине» мы открыли новые амилоидные белки, саркомерные мышечные белки семейства тайтина (тайтин, С-, Х-, и Н-белки). Обнаружены сходные свойства амилоидных фибрилл этих белков и фибрилл Аβ-пептидов при болезни Альцгеймера (БА). С помощью ЭМ было показано антиамилоидное действие тетрациклина, фуллерена С60, поликарбоксильного производного фуллерена С60 (ППФ) на амилоидные фибриллы Х-, С- и Н-белков и Абета-пептидов 25-35 и 1-42. Важно, что указанные препараты и предотвращали образование амилоидов, как и ноопепт, и дипепт ГЗР-123. Это важно, поскольку сегодняшняя превентивная стратегия основана на идее предотвратить переход мягких когнитивных нарушений и начальных форм АД в развитые формы этой болезни. Антиамилоидное действие препаратов было проверено и на клеточной культуре полиморфноядерных лейкоцитов по увеличению в их присутствии выживаемости клеток, гибнущих под действием токсичных амилоидов. Этот метод позволяет проверить на токсичность не только амилоиды в разные стадии их формирования, но и сами препараты и фрагменты распада амилоидов, что также отвечает требования практики. Такой подход в комплексе с визуальной оценкой позволяет осуществлять подбор наиболее ценных лекарственных средств для борьбы с разными амилоидами и амилоидозами, что является целью и дальнейших наших исследований. Несомненно, что большое значение в терапии имеет также и преклиническая диагностика разных амилоидозов. Для этого эффективным подходом может быть метод твердофазного иммуноферментного анализа (ТИФА) регистрация с его помощью в крови пациента аутоантител к амилоидам или амилоидных белков с помощью антител и снижения их количества в крови как указание на эффективность используемого терапевтического подхода. С помощью ТИФА нами были зарегистрированы аутоантитела к Н-белку в сыворотке крови у пациентов с ревматоидным артритом и с подозрением на амилоидоз (биопсия прямой кишки) и аутоантитела к Аβ-пептиду (25-35) в крови у пациентов с БА. Использование этого метода входит в план наших и дальнейших исследований. Он открывает пути развития ранней щадящей диагностики амилоидозов. На наш взгляд, это безопасный метод по сравнению с пункционной биопсией спинномозговой жидкости. Такой диагностический тест может быть разработан для разных амилоидозов с использованием соответствующего белка-предшественника.

РАЗВИТИЕ НОВОГО ПОДХОДА К ОСНОВАМ ЭТИОПАТОГЕНЕЗА СЕРДЕЧНО-СОСУДИСТЫХ ЗАБОЛЕВАНИЙ (В АСПЕКТЕ ИЗМЕНЕНИЙ КОЛЛАГЕНА СОЕДИНИТЕЛЬНОЙ ТКАНИ)

В.Г. Туманян¹⁾, Е.С. Котовская²⁾, И.В. Филатов¹⁾, С.П. Домогацкий³⁾,

В.П. Барграсер³⁾, В.А. Намиот⁴⁾, Ю.В. Мильчевский¹⁾, Н.Г. Есипова¹⁾

¹⁾ИМБ РАН, ²⁾ФГУ ГБМСЭ по г. Москве, ³⁾ИЭК РКНПК МЗРФ, ⁴⁾ НИИЯФ МГУ


Привлечение методов фундаментальных исследований для решения задач, выдвинутых клинической практикой, позволяет ожидать разрешения в 21 веке до сих пор не решенных до конца проблем этио-патогенеза сердечно-сосудистых заболеваний – основной причины смертности в индустриально развитых странах.

Врожденные заболевания соединительной ткани часто отягощены сопутствующей патологией сердечно-сосудистой системы – в качестве референтной группы была выбрана социально-значимая категория детей-инвалидов, с крайней степенью выраженности аномалий сердечно-сосудистой системы с сопутствующей отягощенностью синдромами Элерса-Данлоса и Марфана. Эта группа прошла медико-социальную экспертизу в г. Москве и стала объектом иммунологического исследования. Был проведен количественный иммуноферментный анализ уровня аутоантител к коллагену I-VI типов в образцах крови 28 человек (трех поколений шести семей). По сравнению с контрольными группами здоровых людей (нулевая реакция) и отобранными больными СКВ (позитивная неспецифическая реакция), у исследованной выборки пациентов обнаружена выраженная иммунная реакция на коллаген базальных мембран IV типа. Исключение составляет только одна семья с нулевой реакцией у трех поколений. Тем самым в прикладном плане был сделан шаг к созданию «коллагенового» маркера ряда патологий сердечно-сосудистой системы. В фундаментальном плане выявлена важная роль коллагена IV типа, являющегося основным структурным компонентом базальной мембраны сосудов. Было показано, что фундаментальные исследования с помощью специального метода компьютерного анализа – комбинации молекулярной механики и статистического анализа, позволяют выявлять структурные и энергетические последствия замены тех или иных аминокислотных остатков в полипептидной цепи коллагенов. На основе проведенных расчетов получено объяснение того, как наблюдаемое для белков-мутантов изменение структуры и компонент энергии в местах аминокислотных замен связано с ассоциированными с болезнями изменениями в соединительной ткани. Патологический эффект интерпретируется в терминах изменения локальной стабильности макромолекул коллагена вследствие аминокислотной замены, в результате которой нарушается соответствие температуры плавления макромолекулы коллагена физиологической температуре организма.

Для коллагена IV проведены априорные расчеты трехмерной структуры по последовательности аминокислот (с использованием оригинальных программ и программ ICM и Tinker). Сложность представляют сегменты макромолекулы с нарушением регулярного чередования глицина, с включением аланина вместо глицина. Эти сегменты были рассчитаны с учетом данных ЯМР по межатомным расстояниям. Проведены оценки локальной температуры плавления и вариации механических свойств коллагена вдоль молекулы, разметка Т- и В-эпитопов и оценка гидратации.

Обсуждается интерпретация патологического эффекта мутаций (с учетом клинических проявлений) в терминах изменения локальных и глобальных свойств макромолекул коллагенов, приводящих к нарушениям процесса фибриллогенеза. Проводится секвенирование коллагена IV типа пациентов референтной группы.