Ультраструктурные изменения костной ткани при огнестрельных ранениях и пути их коррекции
Диссертация - Медицина, физкультура, здравоохранение
Другие диссертации по предмету Медицина, физкультура, здравоохранение
ы в таблице 2.
Таблица 2. Характеристика материала исследования.
№ХарактеристикаКоличествоЦелиобъектовбиообъектовпробобразцовIЧеловеческие кости в нормеМужчины 20-40 лет (5)10 (5/5)30 (15/15)КонтрольЧеловеческие кости после огнестрельного переломаМужчины 20-40 лет (25)25 (15/10)100 (60/40)Изучение ультраструктуры огнестрельных переломовIIТрубчатые кости барана в норме и после раненияБараны-самцы (2)220КонтрольТрубчатые кости барана после огнестрельного переломаБараны-самцы (1-я опытная группа) (5)550Изучение ультраструктуры регенерата Трубчатые кости барана после огнестрельного переломаБараны-самцы (2-я опытная группа) (5)550Изучение действия стронция ранелата
2.3 Общая характеристика методов исследования
2.3.1 Общеклинические исследования
Наблюдение за экспериментальными животными осуществляли ежедневно 2 раза в сутки с помощью как визуальных и физикальных методов, так и с использованием прикроватного монитора Тритон-Б. Учитывались следующие параметры:
реакция животного на травму (поведение, частота пульса, ректальная температура, выраженность пищевого рефлекса, масса тела, нагрузка на поврежденную поверхность);
продолжительность и характер наружного кровотечения;
размеры входного и выходного отверстий, площадь кожных ран;
данные местных изменений в поврежденной конечности (характер и количество раневого отделяемого, выраженность отека паравульнарных тканей, характер и сроки заживления ран);
сроки и клинические проявления общих и местных осложнений.
2.3.2 Лабораторные исследования
Лабораторные исследования включали забор образцов крови для аппаратного определения показателей общего и биохимического анализов. Забор крови для лабораторных исследований производился до начала проведения опыта, а также на 1, 3, 10, 30 и 60 сутки наблюдения.
Для определения объёма возможной кровопотери и возможности развития анемического синдрома в крови животных оценивали исходные показатели и динамику количества эритроцитов, содержания гемоглобина и показатели гематокрита. Содержание лейкоцитов контролировали для оценки воспалительного ответа, а также для контроля возможности развития гнойных осложнений.
Для оценки степени развития стресс-реакции организма у подопытных животных (бараны породы Меринос массой 50-57 кг) на травматическое воздействие было проведено исследование в плазме крови уровня глюкозы и общих липидов биохимическими наборами фирмы ЛАХЕМА (Чешская Республика).
Метаболические нарушения белкового обмена определялись путем исследования содержания общего белка и уровня мочевой кислоты в сыворотке крови биохимическим набором фирмы ЛАХЕМА (Чешская Республика).
Интенсивность свободнорадикального окисления (СРО) и активность антиоксидантной системы (АОС) в организме животных после воздействия оценивали методом индуцированной биохемилюминесценции, а также по уровню общеоксидазной и антиоксидазной активности (ООА и ОАА) в сыворотке крови.
Степень повреждения (деструкции) клеточных и субклеточных мембран органов и тканей определяли путем исследования в сыворотке крови животных активности ряда мембрансвязанных ферментов - щелочной фосфатазы (ЩФ), аспартатаминотрансферазы (АСТ), аланинаминотрансферазы (АЛТ) и лактатдегидрогеназы (ЛДГ) с помощью биохимических наборов фирмы ЛАХЕМА (Чешская Республика).
Для оценки внутреннего пути свертывания крови определяли активированное частичное тромбопластиновое время (АЧТВ), внешнего пути свертывания крови - протромбиновое время (ПВ), конечного этапа процесса свертывания крови (превращение фибриногена в фибрин под действием тромбина) - тромбиновое время (ТВ), а также количественное содержание фибриногена. Все тесты проводили при помощи наборов НПО Ренам (Россия) на гемокоагулографе Throbotimer (Германия).
Состояние минерального обмена оценивали по уровню Ca и неорганического фосфора (Р) с помощью биохимических наборов фирмы ЛАХЕМА (Чешская Республика, что наряду с рентгенологической и макро- и микроскопической картиной костного регенерата, позволило выполнить комплексную оценку качества остеорепаративных процессов.
2.3.3 Микробиологические исследования
Для определения раневой микрофлоры в динамике и коррекции антибактериальной терапии, брались посевы из ран на 10-е сутки (по окончании антибактериальной терапии цефазолином), а также на 15-е и 20-е сутки при наличии патологического отделяемого из ран.
Забор материала производили в стерильные пробирки с транспортной средой, которые доставляли в микробиологическую лабораторию в течение 2-х часов от момента отбора проб. Все микробиологические исследования проводили в соответствии с действующими нормативными документами (Приказом МЗ СССР № 535 от 1985 г. и Методическими указаниями по определению чувствительности микроорганизмов к антибактериальным препаратам МУК 4.2.1890-04 от 2004 г.).
Посев проб осуществляли на 5% кровяной агар полуколичественным методом, позволяющим определять титр бактерий. Через 18-24 часа все разновидности выросших колоний микроорганизмов подсчитывали, затем изучали тинкториальные свойства, морфологию бактерий и производили биохимическую идентификацию выделенных штаммов.
Определение чувствительности к антибиотикам осуществляли диско-диффузным методом на среде АГВ (агар Гювенталя-Ведьминой) с использованием наборов дисков с антибактериальными препаратами производства ЗАО НИЦФ (Санкт-Петербург). При интерпре?/p>