Методическая разработка по подготовке и работе на лабораторном занятии №31 для студентов медицинского факультета Тема: Вирус иммунодефицита человека. Биологические свойства. Методы лабораторной диагностики спида
| Вид материала | Методическая разработка |
- Методическая разработка по подготовке и работе на лабораторном занятии №11 для студентов, 777.95kb.
- Методическая разработка по подготовке и работе на лабораторном занятии №21 для студентов, 595.87kb.
- Методическая разработка по подготовке лабораторного занятия №41 для студентов медицинского, 1130.19kb.
- План лабораторных занятий по микробиологии для студентов 3 курса лечебного факультета,, 392.08kb.
- Информационный материал, 270.01kb.
- Правила радиационной безопасности при рентгенодиагностическом исследовании больных., 206.33kb.
- Методическая разработка по хирургии для студентов IV курса медицинского факультета, 49.72kb.
- Методическая разработка для студентов тема №1 Тема: «Острые и хронические бронхиты», 1824.04kb.
- Календарныйпла нлекций по микробиологии, вирусологии для студентов 2 курса агротехнического, 14.9kb.
- Методическая разработка по хирургии для студентов IV курса медицинского факультета, 42.2kb.
свойства. Микробиологическая диагностика заболеваний.
1.1 Актуальность темы.
Заболевания, обусловленные патогенными нейсериями, достаточно широко распространены среди населения. В последние годы увеличиваются случаи заболевания эпидемическим менингитом (особенно среди детей), а гонококковая инфекция сопровождает человечество в течение всей его истории. Поэтому знания о природе этих заболеваний, их выявлении и диагностики крайне необходимы практическим врачам.
1.2 Цели изучения темы.
Цель общая. Изучить свойства патогенных нейсерий и основы патогенеза менингококковых и гонококковых инфекций. Усвоить микробиологическую диагностику инфекционных заболеваний, обусловленных нейсериями.
Цель конкретная.
1.Изучить морфологические и культуральные свойства менингококков и гонококков.
2. Овладеть методами микробиологической диагностики менингококковой инфекции.
3. Овладеть методами лабораторной диагностики гонореи и бленореи младенцев.
4. Выучить особенности диагностики хронической гонореи.
1.3 Обеспечение исходного уровня знаний - умений.
1. Морфология шаровидных бактерий.
2. Строение клеточной стенки грамотрицательных бактерий.
3. Специальные питательные среды.
1.3.1 Тесты на исходный уровень знаний - умений.
Нейсерии имеют следующие морфологические и тинкториальные свойства:
А. Грамотрицательные парные палочки.
В. Грамположительные парные палочки.
С. * Грамотрицательные парные кокки.
D. Грамположительные парные кокки.
Е. Грамотрицательные извилистые бактерии.
1.3.2 Тесты на исходный уровень знаний - умений.
1). Реакция иммунофлюорисценции широко используется для экспресс-диагностики многих бактериальных и вирусных инфекций. Выберите условие, без которого невозможно определить результат реакции.
А. *Наличие люминесцентного микроскопа.
В. Наличие электронного микроскопа.
С. Наличие иммерсионного микроскопа.
D. Выделенной чистой культуры возбудителя.
Е. Сыворотки больного.
1.4. Графологическая структура содержания.
1.4.1. Графологическая структура микробиологической диагностики менингококковой инфекции.
Материал для исследования: спинномозговая жидкость, слизь из носоглотки, кровь.
Бактериоскопическое исследование: окраска мазков по Граму, изготовление и окрашивание толстой капли крови.
Ответ.
Бактериологическое исследование
- посев на сывороточный агар,
- посев на шоколадный агар,
- характер роста колоний,
- проба на оксидазу и каталазу,
- определение серогруппы с диагностическими сыворотками,
- определение чувствительности к антибиотикам,
Ответ.
Серологический метод
- выявление в сыворотке антител в реакциях РНГА и ИФА.
Ответ.
1.4.2. Графологическая структура микробиологического исследования гонококковой инфекции.
Материал для исследования: гнойные выделения из уретры, моча, сыворотка.
Бактериоскопический метод
- мазок, окрашенный по Граму и метиленовым синим,
- реакция иммунофлуоресценции,
Ответ.
Бактериологический метод
- посев на кровяной агар, сывороточный агар, асцитный,
- изучение культуральных свойств,
- дифференциация гонококков от других видов рода Neisseria,
- определение чувствительности к антибиотикам
Ответ.
Серологический метод
- выявление антител в сыворотке крови в реакциях Борде-Жангу (РСК), РНГА, РИФ
Ответ.
1.4.3. Перечень теоретических вопросов.
1. Морфология, культуральные свойства, антигенное строение менингококков.
2. Микробиологическая диагностика заболеваний, вызванных ими. Обследование на бактерионосительство.
3. Гонококки, их свойства.
4. Методы лабораторной диагностики острой и хронической гонореи.
5. Профилактика и лечение заболеваний обусловленных нейсериями.
1.4.4. Источники учебной информации.
Основные:
1) К. Д. Пяткин, Ю.С. Кривошеин. - Микробиология. - К. 1992 (укр). - с. 196 - 201.
2) К.Д. Пяткин, Ю.С. Кривошеин. - Микробиология. - Г. 1980 (рус). - с. 244 - 249.
3) В.Д. Тимаков, В.С. Левашев. - Микробиология. - Г. 1983 (рус). - с. 266 - 272.
4) А.И. Коротяев, С.А. Бабичев. - Медицинская микробиология, иммунология и вирусология. - Санкт - Петербург. 2002 (рус). - с. 342 - 346.
5) И.Л. Дикий, И.Д. Холупяк. - Микробиология. - Харьков. 1999 (рус). - с. 238 - 243.
6) В.И. Покровский. - Медицинская микробиология. - Г. 1998 (рус). - с. 275 - 291.
7) О.И. Климнюк, И.О. Ситник. - Практическая микробиология. - Терн., 2004 (укр). с. 183 - 190.
8) Л.Б. Борисов. - Руководство к практическим занятиям по микробиологии. - Г. 1984 (рус). - с. 157 - 160, 222.
9) М.Н. Лебедева. - Руководство к практическим занятиям по медицинской микробиологии, - Г. 1973 (рус). - с. 176 - 179.
10) Ю.С. Кривошеин. - Руководство к практическим занятиям по медицинской микробиологии. - Г. 1986 (рус). - с. 92 - 07.
Дополнительные:
1) Г.К. Палий. - Словарь по микробиологии, вирусологии, иммунологии и инфекционным заболеваниям. - 2004 (укр). - с. 7 - 146.
1.5. Ориентировочная основа действия (ОДД)
- Микроскопия готовых препаратов менингококка.
- Микроскопия демонстрационных препаратов гнойных выделений из уретры больного гонореей.
- Постановка реакции преципитации со спинномозговой жидкостью больного.
- Определение чувствительности менингококков и гонококков к антибиотикам.
- Учет РСК с сывороткой крови больного.
- Ознакомление со схемой микробиологической диагностики заболеваний.
- Оформление протокола.
1.6. Система обучающих заданий.
1. Укажите питательные среды для культивирования менингококков:
1. МПБ.
2. МПА.
3. Кровяной агар.
4. Сахарный агар.
5. *Сывороточный агар.
6. * Сывороточный бульон.
7. Среда Китт-Тароцци.
8.* Асцит-агар.
9. Среда Бучина.
1.7. Короткие методические указания для работы студентов на лабораторном занятии.
1.7.1. Методика проведения
- Просмотреть под микроскопом и нарисовать препараты из культур менингококка.
- Просмотреть под микроскопом и нарисовать препараты с гнойных выделений уретры больного.
- Поставить реакцию преципитации спинномозговой жидкостью больного с преципитирующими сыворотками А и В. Через 5 минут провести учет результатов. Определить серогруппу.
- Провести учет РСК с сывороткой крови больного гонореей.
- Определить чувствительность менингококков к антибиотикам методом стандартных дисков (при этом измерение зон задержки роста производить миллиметровой линейкой).
- Внести в протокол схему диагностики заболеваний, вызванных патогенными грамотрицательными кокками.
1.7.2. Организационная структура проведения лабораторного занятия.
| № этапа | Этапы работы | Время (мин) | Средства обучения | Оборудование | Место |
| 1. 2. 3. 4. 5. 6. 7. | Организационная часть Теоретический опрос (исходный уровень знаний) Основные теоретические вопросы, что подлежат изучению на практическом занятии Система обучающих заданий - тесты для контроля студентов Самостоятельная работа студентов. Оформление протокола Подведение итогов, оценка деятельности каждого студента | 3 16 18 16 26 5 6 | - Тесты Вопросы Тесты Микроскопия готовых препаратов менингококка и гонококка. Поставка реакции преципитации со спинномозговой жидкостью и сыворотками. Учет РСК. Определение чувствительности к антибиотикам. | - - - - Демонстрационные препараты. Набор диагностических сывороток в пробирках с пипетками. Стекла. Материал для исследования (ликвор). Демонстрационные: РСК, антибиотикочуствительность. Таблицы, схемы. | Учебная комната |
^ Автор: доцент, к.б.н. Макац Є.Ф.
Методическая разработка
по подготовке к лабораторному занятию №40
для студентов медицинского факультета
^ Тема: Патогенные этеробактерии. Эшерихии. Шигеллы. Морфология и биологические
свойства. Микробиологическая диагностика эшерихиозов и шигеллеза.
1.1.Актуальность темы. Возбудители кишечных инфекций очень распространены во внешней среде. Они загрязняют ее, пищевые продукты, воду. Среди них наиболее опасные энтеро- патогенные кишечные палочки и возбудители бактериальной дизентерии. Болеют кишечными инфекциями преимущественно дети разного возраста и поэтому диагностика этих заболеваний имеет большое значение в работе практических врачей.
1.2. Цель изучения темы.
Общая. Выучить основные общие свойства представителей семьи энтеробактерий. Усвоить биологические свойства кишечной палочки и возбудителей бактериальной дизентерии. Овладеть основами патогенеза дизентерии и колиэнтерита у младенцев. Выучить микробиологическую диагностику дизентерии и колиэнтерита.
Конкретная :
1.Изучить морфологию, культуральные и биохимические свойства кишечной палочки и возбудителей дизентерии.
2.Ознакомиться с международной классификацией шигелл.
3.Освоить бактериологический метод исследования при колиэнтеритах младенцев.
4. Изучить методы микробиологической диагностики острой и хронической форм дизентерии.
5.Освоить методы профилактики и лечения кишечных инфекций.
1.3.Обеспечение исходного уровня знаний-умений :
1.Морфология и тинкториальные свойства палочковидных бактерий.
2.Строение клеточной стенки грамотрицательных бактерий.
3.Дифференциально-диагностические среды.
1.3.1.Тесты на исходный уровень знаний-умений :
Бактерии характеризуются:
А. Палочковидной формой.
B. Обязательным наличием жгутиков.
C. Размерами от 1 до 10 мкм.
D. Размерами от 1 до 10 нм.
E. Спорообразованием во внешней среде .
Ответ: A,C.
^ 1.4. Графологическая структура содержания.
1.4.1. Графологическая структура микробиологического исследования при колиэнтеритах:
1.Материал для исследования: испражнение больного ребенка.
2.Посев на среду Эндо.
3.Характер и цвет колоний.
4.Мазок,окрашивание по Граму.
5.Реакция агглютинации на стекле с ОВ-сыворотками.
6.Пересев агглютинабельных колоний на скошенный МПА.
7.Реакция агглютинации с типоспецифическими сыворотками.
8.Розвернутая реакция агглютинации.
9.Посев на "пестрый ряд".
Ответ.
1.4.2. Графологическая структура микробиологического исследования при дизентерии:
1.Материал для исследования: испражнения.
2.Бактериологический метод: посев на дифференциальную среду.
3.Характер роста, цвет колоний.
4.Мазок,окраска по Граму.
5.РА на стекле с дизентерийными сыворотками.
6.Пересев на среду Расселя.
7.Мазок,окраска по Граму.
8.Пересев на "пестрый ряд".
9.РА на стекле с видовыми и типоспецифическими сыворотками.
10.Материал для исследования: сыворотка крови.
11.Серодиагностика: РА с дизентерийными диагностикумами.
12.РПГА с эритроцитными диагностикумами.
Ответ.
1.4.3. Перечень теоретических вопросов.
1.Общая характеристика семейства энтеробактерий.
2.Морфология, культуральные и биохимические свойства эшерихий.
3.Антигенная структура эшерихий.
4.Дифференциация условно-патогенних и патогенных эшерихий.
5.Значение кишечной палочки в патологии человека.
6.Микробиологеская диагностика эшерихиозов.
7.Современная международная классификация шигелл.
8.Морфология, культуральные и биохимические свойства шигелл.
9.Антигенное строение шигелл.
10.Фактори патогенности шигелл, механизм внутриклеточного паразитизма.
11.Методы микробиологической диагностики острой и хронической дизентерии.
12.Бактерионосительство при дизентерии и методы его выявления.
13.Профилактика дизентерии.
1.4.4. Источники учебной информации.
Основные.
1. К.Д. Пяткин, Ю.С. Кривошеин Микробиология К.1982 (укр) - 211-216
2. К.Д. Пяткин, Ю.С. Кривошеин Микробиологая М. 1980 (русс) 255-259,270-273
3. В.Д. Тимаков Микробиология М. 1983 (русс) 273-279,286-288
4. А.И. Коротяев С.А. Бабич Медицинская микробиология, иммунология и вирусология
Санкт – Петерб. 2002 (русс), 373-377,389-384
5. И.Л. Дикий, И.Ю. Холупяк. Н.С. Шевелева, М.Ю. Стегний, Микробиология Харк.224-227,232-23 6
6. Микробиология . Руководство к лабораторным занятиям. Харк 2002
7. О.И. Климнюк, И.О, Ситник, М.С. Творчко, В.П. Широбоков, Практическая микробиология, Терн, 2004 190-194,209-212
8. Л.Б. Борисов, Руководство к практическим занятиям по микробиологии М. 1984 (русс),176-181
9. М.Н. Лебедева, Руководство к практическим занятиям по медицинской микробиологии \ 1973 (русс) 182-186,195-200
10. Ю.С. Кривошеин Руководство к практическим занятиям по медицинской микробиологии К. 1986 (русс), 97-98,107-109
Дополнительные
1. Словарь по микробиологии, вирусологии, иммунологии и инфекционным заболеваниям. Общ. ред, проф. Г.К. Палий, К, 2004,7-146
1.5.Ориентировочная основа действия (ОДД).
1. Изготовление мазков из культуры кишечной палочки, окраска по Граму, микроскопия.
2. Изготовление, состав и назначение дифференциально-диагностических сред.
3. Изучение колоний эшерихий визуально и под стереомикроскопом на средах Эндо, Плоскирева, Левина.
4. Учет ферментативных свойств эшерихий на углеводном ряду Гисса.
5. Изготовление препаратов из культуры дизентерийных бактерий, окраска, микроскопия.
6. Изучение культуральных свойств шигелл на дифференциально-диагностических средах.
7. Изучение биохимических свойств шигелл на СИБ.
8. Учет РПГА с целью серодиагностики дизентерии.
9. Ознакомление с биопрепаратами, которые применяют для диагностики и профилактики дизентерии.
10. Оформление протокола.
1.6.Система обучающих заданий.
1.6.1. С испражнений больного выделена культура грамотрицательных, полиморфных, палочковидних бактерий. На средах Эндо и Плоскирева колонии окрашены в бледно-розовый цвет, на среде Левина - в бледно-голубой. Культура не разжижает желатин, не образует индол и сероводород. На "пестром ряду" ферментирует глюкозу, маннит, мальтозу и медленно лактозу с образованием кислоты. Какой микроорганизм выделено?
Эталон ответа: с материала больного выделена культура шигел Зонне.
1.6.2. При гнилостных дисбактериозах с повышенным рН испражнений, следует назначать биологические препараты изменяющие рН в кислую сторону и имеющие антагонистическое действие. Какие микроорганизмы подходят для такой цели?
А. Клебсиеллы.
B. Азотобактер.
C. Энтеробактер.
D. Бифидумбактерии.
E. Протеи.
Ответ:D
^ 1.7.Краткие методические указания для работы студентов на лабораторном занятии.
1.7.1.Методика проведение занятия.
1.Приготовить мазок с культуры кишечной палочки, окрасить по Граму, посмотреть под микроскопом, зарисовать в протоколы.
2.Изучить состав и назначение дифференциально-диагностических сред Эндо, Левина, Плоскирева.
3.Рассмотреть колонии эшерихий визуально и под стереомикроскопом на средах Эндо, Плоскирева, Левина. Соответствующие характеристики внести в протокол.
4.Учесть ферментативные свойства эшерихий в тест-системе СИБ и углеводном ряду Гисса. Обратить внимание на расщепление лактозы, глюкозы, маннита, мальтозы, образование индола, сероводорода.
5.С целью бактериологической диагностики колиэнтерита высеять испражнения больного ребенка на среду Эндо. Поместить в термостат.
6.Приготовить препарат с культуры дизентерийных бактерий, окрасить по Граму, посмотреть под микроскопом, зарисовать в протоколы.
7.Изучить культуральные свойства шигелл на средах Эндо, Плоскирева, висмут-сульфит агаре, отметить особенности колоний.
8.Изучить биохимические свойства шигелл в демонстрационном наборе СИБ.
9.Учесть РПГА с сывороткой больного и дизентерийным эритроцитарным дигностикумом в демонстрационном опыте. Определить титр антител.
10.Ознакомиться с биопрепаратами, которые применяют для диагностики и профилактики дизентерии.
1.7.2.Организационная структура проведения лабораторного занятия.
| № этапа | Этапы работы | Время (мин) | Средства обучения | Оборудование |
| 1 | Организационная часть | 2 | | |
| 2 | Теоретический опрос (исходный уровень) | 16 | тесты | |
| 3 | Основные теоретические вопросы, что подлежат изучению. | 20 | вопросы | |
| 4 | Система учебных заданий -тесты для контроля студентов. | 16 | тесты | |
| 5 | Самостоятельная работа | 26 | Изготовление, окрашивание и микроскопия препаратов с культуры кишечной палочки и шигелл. Изучение культуральных и биохимических свойств эшерихий и шигелл. Учет РПГА и определение титра антител. Посев испражнений больного ребенка на среду Эндо. | Чистая культура в пробирках на МПА кишечной палочки и возбудителя дизентерии. Демонстрационные опыты: РПГА, биохимические свойства на СИБ, культуральные и дифференциальные среды. Материал для исследования. Стеклышки, таблицы, схемы. |
| 6 | Оформление протокола | 6 | | |
| 7 | Подведение итогов и оценка каждого студента | 4 | | |
Автор: доцент, к.б.н. Макац Е.Ф.