Geum.ru

Дипломная работа

Вид материалаДиплом

Содержание


Глава ii. материалы и методы исследования
2. Тест – "tail flick"
3. Фармакологическое воэдействие
4. Характеристика используемых фармокологических препаратов
Подобный материал:
1   2   3   4   5

ГЛАВА II. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ




1. Объект исследования


Объектом для проведения исследования была выбрана белая лабораторная крыса (Rattus norvegicus), как наиболее распространенная модель для экспериментальных исследлваний.

Исследования проводились на белых беспородных крысах - самцах массой 180 - 200г. Животные в достатке обеспечивались пищей и водой и содержались в стандартных условиях вивария, с естественным световым режимом, при температуре 18 - 200С.

2. Тест – "tail flick"


Для определения болевого порога применяли тест - tail-flick. (D Amour and Smith, 1941; Никольская и Кандашевская, 2003; Осмакова,2003). Одновременно в опыте находилось 10 - 15 животных. Болевое раздражение наносили погружением хвоста в горячую воду температурой 560С на глубину 6 см. В данном тесте показателем болевой чувствительности животных служило изменение латентного периода (ЛП) реакции избавления от болевого раздражителя - ЛП одёргивания хвоста Реакцию считали выполненной в том случае, когда животное полностью выдёргивало хвост из сосуда с горячей водой. ЛП одёргивания хвоста - это временной показатель, измеряемый в секундах с помощью секундомера. Животных перед началом эксперимента предварительно адаптировали к условиям эксперимента, помещая их в индивидуальные иммобилизационные клетки, в которых онисохраняли естественную для них позу, каждый день на 3часа в течении двух недель. Так же непосредственно в день проведения эксперимента за 30 минут до его начала животных вновь помещали в индивидуальные иммобилизационные клетки, с целью их адаптации. Затем до введения препаратов определяли исходный уровень болевой чувствительности (ЛП0), которое вычисляли как среднее из 4-х измерений ЛП реакции одёргивания хвоста, зафиксированных с интервалом в 10 минут. Введение препарата осуществляли, не вынимая животных из индивидуальных иммобилизационных клетк. Далее в течение 1,5 - 2 часов после инъекции с интервалами в 10 минут вновь фиксировали ЛП реакции избавления от болевого раздражителя.

При обработке полученных результатов использовали показатель - изменение ЛП реакции одёргивания хвоста, свидетельствующие об изменении болевой чувствительности животных. Это показатель оценивали по формуле: ЛП=ЛПi - ЛП0 (ЛПi - латентный период реакции одёргивания хвоста в каждый момент измерения. ЛП0 - среднее фоновое значение латентного периода одёргивания хвоста до инъекции).

Оценку достоверности различий осуществляли по критерию Ван-дер-Вардена.

3. Фармакологическое воэдействие


Исследования проводились в три этапа.

На первом этапе животных делили на две группы: контрольную и опытную. Опытной группе животных внутрибрюшинно вводили окситоцин в дозе 0,001мг/кг, а контрольной – воду для инъекций. Измерения проводили как в период 5-ти дневного введения, так и в течение 10-ти дней по окончанию фармакологического воздействия.

На втором этапе использовали однократное введение окситоцина в дозах 0,05 мг/кг. Животных также делили на две группы: контрольную и опытную. Опытной группе животных внутрибрюшинно вводили окситоцин в дозе 0,05 мг/кг, а контрольной – воду для инъекций.

На третьем этапе использовалось 4 группы животных: первой группе вводились вода для инъекций и окситоцин, второй – налоксон и окситоцин, третей – налоксон и вода для инъекций, четвёртой – контрольной двукратно вводилась вода для инъекций. Налоксон и вода вводились за 15 минут до инъекции пептида. Окситоцин вводили в дозе 0,05 мг/кг, налоксон в дозе 1 мг/кг (см. схему экспиремента).

Препараты вводили после определения исходного времени ЛП реакции одёргивания хвоста.




4. Характеристика используемых фармокологических препаратов


Окситоцин. Производитель "Гедеон Рихтер" Германия. Ампулы с прозрачной безцветной житкостью с концентрацией раствора 5 МЕ/мл. Растворителем для сухого вещества является вода для инъекций.

Применяют для вызывания и стимулирования родовой деятельности. Препарат наиболее эффективен при преждевременном отхождении околоплодных вод. Его назначают также при слабости родовой деятельности, связанной с атонией матки, и гипотонических маточных кровотечениях. Может применяться для искусственного вызывания родов (при осложнениях беременности).

Форма выпуска: в ампулах по 1 мл, содержащих по 5 МЕ окситоцина.

Налоксон Производитель Варшавский фармацевтический завод "Польфа" Польша. Ампулы с прозрачной безцветной житкостью с концентрацией раствора 0,4 мг/мл. Растворителем для сухого вещества является физиологический раствор.

Применяют налоксон главным образом при острой интоксикации наркотическими аналгетиками. Он эффективен также при алкогольной коме и различных видах шока, что связано, по-видимому, с активацией при шоке и некоторых формах стресса эндогенной опиодной системы, а также со способностью налоксона уменьшать гипотензию.

Форма выпуска: в ампулах по 1 мл, содержащих 0,4 мг налоксона гидро-хлорида.