Ассоциация Гимназий Санкт-Петербурга

Вид материалаДокументы
Список использованной литературы
Кетлинский Владимир Александрович
Аршинова Елена Павловна
Волкова Наталья Сергеевна
1.3. Тестирование бактерий путём ? -комплементации.
2. Результаты и обсуждение.
4. Список литературы.
Третьи гимназические чтения
Подобный материал:
1   ...   4   5   6   7   8   9   10   11   ...   17

Список использованной литературы


1) Волошинов А. В. Математика и искусство- М.: Просвещение, 2000.

2) Васютинский Н. Золотая пропорция.- М.: Молодая гвардия, 1990.

3) Энциклопедия для детей. “Математика”, 11том.- М.: Аванта+, 1998.

4) Бартенев И.А. Архитектура.- Л.: Художник РСФСР, 1960.

5) Энциклопедия для детей. “Искусство”, 7том.- М.: Аванта+, 1997.

6) Журнал “Техника молодежи”, №5,1978.

7) Сборник “Архитектура Запада”.- М.: Стройиздат, 1972.


Обучающий web-сайт “Графический редактор

Adobe Photoshop”.

Васильев Дмитрий 11 “б” класс, гимназии №159 “Бестужевская”


Целью для создания данного сайта послужила идея сделать обучающую систему по Adobe Photoshoр, которая поможет многим начинающим пользователям, не тратя много времени на знакомство с ре-дактором по книгам, работать в Photoshoр. Известно, что этот профессиональный графический редактор имеет огромное количество различных инструментов, функций, поэтому его созданию предшествовал сбор, анализ и систематизация материала, а также практический опыт, в результате чего создана обучающая системы в виде сайта.

Сайт разбит на 4 тематические раздела. Они достаточно полно раскрывают поставленную цель с разных сторон.

Первый раздел сайта называется “Азы Photoshop”. В нем представлено несколько уроков, рассчитанных на самостоятельное изучения программы, даже если пользователь не имеет базовых навыков работы с ней. Этот раздел состоит из нескольких частей, которые обеспечивают комфортную работу пользователя. Каждая часть снабжена иллюстрациями, достаточно полно описываются все функции инструментов, включая некоторые тонкости работы с ними. Также в первом разделе имеется материал по цветокоррекции проблемных фотографий и улучшению качества изображений. Следующий раздел посвящен созданию спецэффектов. Главное его достоинство заключается в том, что для создания профессиональных, высококачественных и оригинальных эффектов пользователю не требуется знание каких-либо специальных навыков, или наличие специального образования. Достаточно познакомиться с уроками (алгоритмами), созданными, отработанными и изложенными нами в этом разделе.

В результате изучения, приобретения опыта работы в Photoshop-е мы представили 3 урока по созданию красивых графических эффектов.

Весь процесс создания эффекта разложен по действиям и проиллюстрирован. В связи с этим легко достигается желаемый результат.

К примеру, для создания первого эффекта, представленного нами, необходимо создать чистый белый лист, залить его синим цветом и, далее, хаотичными мазками обычной кистью нанести произвольной формы линии и фигуры. После этого, следуя действиям, изложенным в алгоритме, получаем конечный результат, который всегда будет уникален, и зависеть он будет только от того, какие мазки на-несены на начальной стадии.

Следующий эффект – эффект взрыва. Он особенно легок и быстр в исполнении. Здесь также предложен алгоритм, который позволяет с чистого листа создать и получить желаемое.

Последний эффект – эффект горящего текста. Иногда его можно встретить в Интернете при оформлении сайтов. Однако алгоритм по его созданию нам ни в литературе, ни в Интернете не встречался. Его применение сделает работу пользователя оригинальной и неповторимой. Процесс создания этого эффекта, по представленному алгоритму, займет у вас не более 5-и минут.

Следующий раздел на сайте посвящен дополнениям к Photoshop. Здесь находятся файлы, доступные для скачивания. Этот раздел также разбит на части. Первыми представлены действия, записанные в формате, который понимает Ph. Они предназначены для автоматизации процесса создания некоторых эффектов. Некоторые из представленных здесь файлов найдены в Интернете в свободном распространении, другие же созданы нами самостоятельно. Далее представлены разные варианты кистей.

Последний раздел сайта – галерея. Здесь можно увидеть некоторые авторские работы, созданные при помощи эффектов, изложенных на сайте. Кроме того, в галерее содержится ряд эффектов, которые не вошли в описание уроков по их созданию. Это приоритет будущих разработок уроков по данной теме. Все материалы удобны для использования и доступны для свободного сохранения.

Дизайн сайта сделан в синеголубой гамме с помощью средств Photoshopа и Image ready, т.к. мы считает, что именно палитра этого цвета благоприятна для глаз пользователя. Также использован логотип Photoshop CE – перья, символизирующий тематику нашего сайта.

Навигация по сайту позволяет переход с любой страницы сайта на главную. Предусмотрено добавление сайта в избранное, чтобы в дальнейшем вам не пришлось искать его заново, отправка письма создателю и часы для учета потраченного времени на изучение материала. Сайт оснащен музыкальным сопровождением, которое способствует созданию хорошего настроения. Оно состоит из 30 мелодий, которые произвольно, по функции случайных чисел воспроизводятся при каждой загрузке.

Сам сайт полностью создан средствами Photoshop.

Предложенная нами web-страница значительно расширяет возможности пользователя, работающего с Photoshop.

Использованная литература:

1. Барри Хейнз и Уэнди Крамплер Художественные приемы работы в Photoshop. - Издательский дом “Вильямс”, 2003.

2. Александр Тайц Эффективная работа с Photoshop. - Питер, 2001.

Секции билогоии, химии, географии, экологии


Состав жюри:


Александрова Татьяна Константиновна, к.п.н., доцент, кафедра педагогики и психологии, РГПУ им.А.И.Герцена, научный руководитель гимназии № 73 «Ломоносовская»

Кетлинский Владимир Александрович, канд. хим. наук, учитель химии лицея 82

Есаян Наринэ Амиковна, учитель биологии, 82 лицей

Иванова Людмила Владимировна, учитель биологии гимназии №622

Филиппов Евгений Александрович, к.п.н, доцент РГПУ им. А.И.Герцена, зам. декана факультета биологии

Аршинова Елена Павловна, зам. директора Второй Санкт-Петербургской гимназии, учитель биологии

Силантьева Ирина Николаевна, учитель биологии, гимназия №498, аспирант СПбАППО

Волкова Наталья Сергеевна, методист по НР, учитель химии, гимназия № 622

Ткаченко Марина Александровна, учитель химии, школа №348

Сравнение эффективности различных методик лигирования при клонировании пцр-продукта

в плазмидном векторе.

Румянцев Андрей 11 “б” класс, гимназии №116


Введение.

В современной генетике большое значение имеют методы молекулярного клонирования, применяемые, в частности, для изоляции отдельных генов человека (1). Успешное применение этих методов во многом зависит от эффективности процедур лигирования и трансформации. При этом под лигированием понимается процесс соединения векторных молекул с клонируемыми вставками с помощью фермента ДНК-лигазы, а под трансформацией – процедуру введения плазмидной ДНК в бактериальную клетку (1, 2, 3).

Известно, что при синтезе ПЦР-продуктов Taq-полимеразой образуются выступающие концы, которые должны быть удалены (“зачищены”) перед клонированием в векторе с тупыми концами. В этих условиях нашими задачами явились поиски наиболее удачных методик лигирования путем сравнения влияний на исход эксперимента: а) подбора лигазы и б) применения набора (Kit) для клонирования, позволяющего выполнять “зачистку” концов вставки.

Оценку эффективности лигирования, как это обычно делают, мы проводили в опытах по трансформации.

Наши исследования были проведены в отделе молекулярной генетики ГУ НИИЭМ РАМН, где работают с геном миоцилина человека. В этих опытах начал применяться новый состав набора для клонирования, что потребовало переоценки эффективности различных методик лигирования, используемых в ежедневных экспериментах лаборатории. Наши сравнительные исследования дают практическую пользу в этом выборе наиболее подходящей методики.

1. Материалы и методика.

1.1. Лигирование.

Для выполнения процедуры лигирования нами был использован лигазный набор (Kit) производства ООО ”Лаборатория Медиген”, г. Новосибирск.

В нашем случае ампликоны представляли собой ПЦР-фрагменты ДНК длиной 1-1,5 тыс. пар нуклеотидов. Необходимое для клонирования количество амплификата составляло не менее 200 нг с учетом возможных потерь при последующих процедурах.

Перед лигированием проводили “полировку” концов ДНК при помощи Pfu-полимеразы. Используемый в опытах амплификат обычно несёт на своих концах один или несколько выступающих нуклеотидов. Смысл “полировки” заключается в отщеплении этих нуклеотидов, что позволяет молекулам ДНК сшиваться между собой, поскольку вектор не имеет выступающих концов.

Вектор представлял собой плазмиду рВSII SК вскрытую рестриктазой SmаI. Лигирование проводили 12-14 часов при 4°С.

1.2. Трансформация.

Cначала мы подготовили компетентную культуру бактерий, то есть клетки способные эффективно поглощать чужеродную ДНК. После того, как компетентная культура была готова, мы провели процедуру трансформации, в результате которой в бактериях началась выработка устойчивости к антибиотикам.

Высеяли клетки на агаризованную селективную среду, используя методику растирания.

1.3. Тестирование бактерий путём ? -комплементации.

Существует несколько методов, которые используют для определения колоний бактерий, содержащих рекомбинантные плазмиды. Мы в своей работе использовали метод ?-комплементации, отличающийся от других своей сравнительной простотой и точностью.

Использование этого простого цветового метода позволило значительно упростить определение рекомбинантов. Структура рекомбинантных плазмид позже определяется путём анализа минипрепаратов плазмидной ДНК.

2. Результаты и обсуждение.

При трансформации в отрицательном контроле не выросло колоний, что свидетельствует об отсутствии у бактерий мутаций устойчивости к антибиотику.

В положительном контроле мы получили результаты, позволяющие нам заявить то, что число трансформированных бактерий определялось только количеством компетентных клеток, а не количеством добавленных молекул плазмиды.

В ходе работы мы провели 7 опытов по трансформации, используя две различных лигазы (российскую, производства фирмы “Медиген”, и английскую Amersham Biosciences) и различные методы подготовки сшиваемых молекул ДНК.

После обработки результатов мы убедились, что как английская, так и отечественная лигазы обладают хорошей и почти равной активностью. Сравнение результатов всех опытов показало, что при сопоставимых уровнях эффективности работы лигазы, выход рекомбинантов (белых колоний) менялся в несколько раз, и был выше всего в опытах с “полировкой” (зачисткой) концов сшиваемых молекул. Сравнение результатов клонирования по тупым (зачищенным) концам и результатов клонирования ПЦР продукта в векторе с выступающими концами (проведённого в прошлом году (4)) показало, что выход рекомбинантов не упал – в прошлом году он составил 12,5%, а в нашей работе – в диапазоне от 13,25% до 36,46%. Исключение составляли опыты, где использовалась нерекомендуемая методика – проводилось склеивание вектора с тупыми концами со вставкой с “незачищенными” выступающими концами (от 0,36 до 5,05%). Качество же лигаз по сравнению с прошлым годом улучшилось - эффективность лигирования была 1,3%, а в нашей работе – от 3,95% до 11,03%.

3. Выводы.

1. В проведённой нами работе эффективность трансформации компетентной культуры Е. cоli составила 2,5х105 колоний на мкг для положительного контроля и 7,5х105 колоний на мкг для опытов.

2. В выращенной нами культуре было 0,1% компетентных клеток.

3. Эффективность лигирования находилась в диапазоне от 3,95% до 11,03%. Причём отечественная лигаза оказалась ничем не хуже английской.

4. “Полировка” концов амплификатов – вшиваемых в вектор молекул ДНК - повышает выход рекомбинантных колоний в несколько раз.

5. Опыты по лигированию и трансформации следует признать успешными, поскольку в них было получено достаточное число рекомбинантных (белых) колоний, плазмиды которых содержат фрагмент клонируемой человеческой ДНК. Из рекомбинантов в дальнейшем в лаборатории был успешно получен материал для секвенирования.


4. Список литературы.

  1. Маниатис Т., Фрич Э., Сэмбрук Дж. Молекулярное клонирование. Пер. с английского. Изд. “Мир”, М. 1982 – 482 с. (глава 8, с.240-242).
  2. Ханаан Д. Методы трансформации E. coli. Клонирование ДНК. Методы. Пер. с английского. Под ред. Д. Гловера. Изд. “Мир” М. 1988 – 538 с. (глава 6, с. 140-171).
  3. Sambrook J., Fritsch F., Maniatis T. Molecular cloning. Second edition. Cold Spring Harbour Laboratory Press, 1989.
  4. Барашкова Полина, Рыжков Алексей. Оценка эффективности процедур лигирования и трансформации при клонировании ПЦР-продукта в плазмидном векторе. СПб 2003. (Олимпиадная работа).
  5. Инструкция по применению набора (Kit), “Медиген” Новосибирск.
  6. Стент Г., Кэлиндар Дж. Молекулярная генетика. Изд. “Мир”, М. 1985.
  7. Брода П. Плазмиды. Изд. “Мир”, М. 1976.


Мир муравьев.

Савченко Яна 9 “А” класс, гимназия №622


Написание работы заняло у меня чуть более полугода. Во время изучения данной темы я посещала читательские залы библиотек, изучала видеоматериалы, вела наблюдения за муравьями.

Гуляя по лесу, я часто встречала муравейники, всегда останавливалась и наблюдала за муравьями. Мне хотелось больше узнать об этих удивительных насекомых. Интерес к муравьям и стал причиной выбора темы исследовательской работы.

В начале работы я поставила перед собой насколько определенных целей:

1)Определить активность муравьев от времени суток и погодных условий.

2)Выяснить, что используется для строительства муравейника.

3)Сколько видов муравьев существует в природе.

По мере проведения исследовательской работы круг вопросов расширился. Интерес к этой теме постоянно возрастал.

Организацию работы можно условно разделить на следующие этапы:

 определение темы и подбор литературы;

 изучение и анализ источников;

 сравнение информации из различных литературных источников;

 соединение выбранной информации, корректировка со стороны научного руководителя.

Основные положения работы:

Первая часть посвящена описанию разнообразных видов муравьев, их мест жительства, а так же внутреннему строению муравья.

Вторая часть посвящена описанию устройства муравейника, формированию муравьиных семей.

Третья часть посвящена описанию наблюдений за насекомыми, анализу полученных данных.

В работе я собрала весь нужный материал для изучения муравья и его жизни.

Для написания работы я использовала различные источники.

П.А. Мантейрель “Рассказы натуралиста” Москва 1984 год,

Эврика- Мол. Гвардия Москва 1992 год,

Андрей Льямас “Секреты животного мира” -Корвус,

А.М. Брэм “Жизнь животных” Москва 1992 год,

П. Фабр “Насекомые” издательство “Мир” Москва 1976 год,

Энциклопедия “Аванта+”1993 год.

Книги и учебные пособия по биологии.

Таким образом, написав эту работу, я в первую очередь узнала много полезной информации, познакомилась с азами исследовательской работы, научилась работать с различными источниками.


ТРЕТЬИ ГИМНАЗИЧЕСКИЕ ЧТЕНИЯ


2006 год


ЛАУРЕАТЫ

третьих городских гимназических ученичеких чтений

2006 г