Эпизоотологический мониторинг и иммунопрофилактика классической чумы свиней и болезни ауески 16. 00. 03 ветеринарная микробиология, вирусология, эпизоотология, микология с микотоксикологией и иммунология

Вид материала

Автореферат

Содержание Цель исследований Научная новизна работы Внедрение результатов исследований. Основные положения исследований, выносимые на защиту Апробация результатов исследований. Публикация результатов исследований. Объем и структура диссертации. Собственные исследования 2 Результаты исследований 2.1.1 Анализ эпизоотической ситуации по классической чуме свиней и болезни Ауески в Республике Казахстан 2.1.2 Определение плотности поголовья животных на территории Республики Казахстан 2.1.3 Анализ риска заноса классической чумы свиней на территорию Республики Казахстан 2.1.4 Составление прогноза возможности заноса классической чумы свиней и проявления болезни Ауески на территории Республики Каза 2.2 Изучение биологических свойств вакцинных и эпизоотических штаммов вирусов классической чумы свиней и болезни Ауески 2.2.2 Характеристика биологических свойств эпизоотических штаммов вирусов классической чумы свиней и болезни Ауески 2.2.3 Отработка оптимальных условий получения высокоактивного вируссодержащего материала вируса классической чумы свиней 2.2.4 Определение оптимальных параметров культивирования вируса болезни Ауески в культурах клеток 2.3 Изучение иммуногенной эффективности вирусвакцин против классической чумы свиней и болезни Ауески 2.3.2 Изучение сохранения иммунобиологических свойств вирусов классической чумы свиней и болезни Ауески, пассированных в культур 2.3.3 Антигенная и иммуногенная активность вакцинных вирусов классической чумы свиней и болезни Ауески, при их ассоциированном п ... Полное содержание

Подобный материал:

• Иммунный статус поросят при пневмонии, вызванной вирусом репродуктивно-респираторного, 398.05kb.
• Функциональная и рецепторная характеристика белков суперсемейства иммуноглобулинов, 1127.13kb.
• Совершенствование системы ветеринарно-профилактических мероприятий и её влияние, 471.82kb.
• Темы рефератов для поступления в аспирантуру по научной специальности 06. 02. 02 ветеринарная, 14.27kb.
• Кудряшова жанна Алексеевна Теоретические и практические аспекты новых подходов профилактики, 392.23kb.
• Оптимизация системы контроля эпизоотического процесса некробактериоза крупного рогатого, 1086.61kb.
• Программа вступительного экзамена в аспирантуру по специальной дисциплине 06. 02., 270.79kb.
• Получение и использование моноклональных антител в диагностике гриппа птиц 16. 00., 455.11kb.
• Терапевтическая эффективность гинодиксина при эндометритах и маститах у коров, вызванных, 301.79kb.
• Резервуары лиссавирусов на территориях, стационарно неблагополучных по бешенству 16., 223.09kb.

УДК 619:616.9-036.22:005.584.1


На правах рукописи


Абдрахманов Сарсенбай Кадырович


ЭПИЗООТОЛОГИЧЕСКИЙ МОНИТОРИНГ И ИММУНОПРОФИЛАКТИКА КЛАССИЧЕСКОЙ ЧУМЫ СВИНЕЙ И БОЛЕЗНИ АУЕСКИ


16.00.03 – ветеринарная микробиология, вирусология, эпизоотология, микология с микотоксикологией и иммунология


Автореферат

диссертации на соискание ученой степени

доктора ветеринарных наук


Республика Казахстан

Астана, 2009


Работа выполнена в АО «Казахский агротехнический университет им. С. Сейфуллина» МСХ РК и Научно-исследовательском институте проблем биологической безопасности НЦБ МОН РК.


Научный консультант: доктор ветеринарных наук,

профессор С. М. Мамадалиев


Официальные оппоненты: доктор ветеринарных наук, профессор В.И. Пионтковский


доктор ветеринарных наук,

профессор Н.Н. Ахметсадыков


доктор ветеринарных наук,

А.М. Намет


Ведущая организация – Казахский научно-исследовательский ветеринарный институт


Защита диссертации состоится «11» июня 2009 г. в 10 часов на заседании Объединенного диссертационного совета ОД 18.08.03 при Казахском агротехническом университете им. С. Сейфуллина по адресу: 001011, г. Астана, проспект Победы, 62, тел.: (7172)32-22-94, www. agun. kz


С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Казахского агротехнического университета им. С. Сейфуллина


Автореферат разослан « » мая 2009 года


Ученый секретарь

диссертационного совета Т.Ж. Абдрахманов

ВВЕДЕНИЕ


Актуальность. В современных условиях ведения животноводства республики, когда основное поголовье сельскохозяйственных животных сосредоточено в частных подворьях, мелкотоварных, фермерских и кооперативных хозяйствах, актуальность проблемы профилактики и ликвидации инфекционных заболеваний имеет специфические особенности.

Расширение экономических, торговых и туристических связей между государствами, возросшее значение различных транспортных средств существенно повышают возможность заноса и распространения особо опасных болезней людей, животных и птиц.

Несомненную важность для здравоохранения и ветеринарной службы, а также для национальной безопасности страны, представляют особо опасные вирусные заболевания людей, животных, птиц и растений, периодически регистрирующиеся на территории страны. В связи с этим возникает необходимость в регулярном эпизоотологическом мониторинге особо опасных болезней на территории республики (Мамадалиев С.М., 2008).

В настоящее время свиноводство в республике имеет тенденцию к устойчивому развитию, при этом все большее развитие в этой отрасли находят крупные животноводческие предприятия. Показателем такой тенденции является заметный рост поголовья свиней в последние годы, количество которых достигло с 1 509,3 тыс. голов в 2005 г. до 1 935,5 тыс. голов в 2008 г. Однако ряд инфекционных болезней и угроза их распространения оказывают существенное тормозящее влияние на данную отрасль животноводства. В перечне этих болезней наиболее важное место занимают классическая чума свиней (КЧС), классифицирующаяся как особо опасная, и болезнь Ауески (БА), которая широко распространена в свиноводческих хозяйствах.

По данным МЭБ, КЧС и БА регистрируются во многих странах Европы, Америки, Африки и Азии, в виде энзоотий, которые на­носят большой экономический ущерб, слагающийся из массовой гибели по­росят, потерь в живом весе, абортов и пре­кращения лактации у свиноматок. В начале второго тысячелетия КЧС отмечали в 34 странах, в том числе 12 европейских, 12 азиатских, 8 американских и 2 африканских (Коломыцев А.А., Книзе А.В. и др., 2000).

Эпизоотическая ситуация по КЧС и БА в нашей стране характеризуется спорадическими случаями проявления. Последние вспышки чумы свиней зарегистрированы в 2001 г. в Костанайской, и в 2004 г. в Алматинской области, ущерб от которых составил около 10 млн. тенге.

Практический опыт показывает, что защита страны и хозяйств от заноса возбудителя КЧС, а тем более ликвидация возникшей эпизоотии чрезвычайно трудна и требует больших затрат. Эта болезнь за последние годы в европейских странах нанесла ущерб в 4 млрд. долларов США (Коломыцев А.А.,1998).

Основной мерой борьбы с данными болезнями, является вакцинопрофилактика в неблагополучных пунктах. Профилактическая иммунизация приводит к положительным результатам, однако необходимо проведение работы по оптимизации схем применения вакцин, с учетом эпизоотической ситуации, особенностей ведения хозяйства, возраста и физиологического состояния поголовья (Куриннов В.В. 2001, Сергеев В.А., 2008).

С обретением суверенитета перед ветеринарной службой республики, как аграрной страны остро встал вопрос о разработке отечественных препаратов для специфической профилактики инфекционных болезней животных с учетом особенностей ведения животноводства и эпизоотической ситуации, в частности КЧС и БА (Султанов А.А., 2003).

Решение данного вопроса способствовало бы поддержанию эпизоотического благополучия по данным инфекциям, возможность иметь свою технологию производства вирусвакцин на основе местных аттенуированных штаммов, что обеспечило бы биобезопасность страны, а также возможность иметь стратегический запас биопрепаратов на случай возможного возникновения вспышек данных инфекций (Сансызбай А.Р., 2003, Троицкий Е.Н., 2005).

В настоящее время, в связи с отказом проведения вакцинации в республике против ряда инфекционных болезней, актуально проведение мониторинговых исследований. Данные таких исследований позво­ляют получать объективные данные об эпизоотической ситуации, эффективности проводимых профилактических мероприятий, разработке краткосрочных и долгосрочных прогнозов проявления и рас­пространения инфекций, представления оператив­ной и достоверной информации об эпизоотической ситуации как внутри страны, так и в приграничных зонах (Макаров В.В., Джупина С.И.,1998, Дрыгин В.В. 2003).

Таким образом, совершенствование имеющихся и сбор новых данных об особенностях эпизоотической ситуации на территории республики, проведение научных исследований по мониторингу, разработке средств специфической профилактики и приемлемых инструктивных документов против таких опасных болезней, как КЧС и БА и их практическая реализация, являются актуальной задачей ветеринарной науки и практики.

Цель исследований: Разработать научно-обоснованную систему эпизоотологического мониторинга и средства специфической профилактики КЧС и БА.

Для достижения поставленной цели были определены следующие задачи:

1. Разработать научные основы эпизоотологического мониторинга КЧС и БА;
   
2. Провести анализ эпизоотической ситуации по КЧС и БА в республике, с определением плотности поголовья и степенью потенциального риска возникновения в различных регионах;
   
3. Анализ риска возможного заноса КЧС на территорию республики;
   

4. Изучить биологические свойства аттенуированных и патогенных штамммов вирусов КЧС и БА и отбор штаммов наиболее пригодных для приготовления вакцинных препаратов;

5. Разработать технологию производственного изготовления вакцин против КЧС и БА, нормативно-техническую документацию на изготовление, контроль и применение этих препаратов;

6. Определить неспецифические факторы стимуляции иммунной системы животных и возможность получения новых дешевых и практичных в хранении и применении форм вирусвакцин;

7. Апробировать и внедрить разработанные вакцинные препараты в практику отечественной ветеринарии;

8. Разработать рекомендации по проведению противоэпизоотических мероприятий против КЧС и БА и методические указания по лабораторной диагностике заболеваний при ведении международной торговли;

9. Оценка экономической эффективности научных разработок.

Научная новизна работы состоит в том, что впервые в отечественной практике в пределах ее регионов проведен мониторинг и анализ эпизоотической ситуации по КЧС и БА, состояние хозяйственной деятельности животноводческих субъектов, позволившие провести зонирование территории страны в регионы с различной степенью риска возникновения и распространения этих заболеваний.

На основе результатов проведенных исследований получены новые отечественные производственные штаммы вирусов КЧС и БА, пригодные для приготовления и контроля вакцинных препаратов и обладающие оригинальными иммунобиологическими свойствами.

С использованием данных штаммов вирусов разработаны технологии серийного производства вакцин против КЧС и БА и нормативно-технические документации на изготовление, контроль и применение вакцин против данных болезней.

Определена противоэпизоотическая и экономическая эффективность вакцин против КЧС и БА в производственных условиях. Применение вакцин, показало их высокие иммуногенные свойства и эффективность, в комплексе с другими ветеринарно-санитарными мероприятиями, подтверждением которых явилось стойкое благополучие свинопоголовья хозяйствующих субъектов республики по данным заболеваниям в течение всего периода использования препаратов.

Научная новизна исследований подтверждена 8 предварительными патентами РГКП «Национальный институт интеллектуальной собственности» Министерства юстиции РК: «Штамм вируса классической чумы свиней Pestis suum “КТ”, используемый в качестве вакцинного штамма». Предварительный патент №29303, от 15.06.2001 г., с последующей ежегодной перерегистрацией; «Штамм «УБ-95» вируса болезни Ауески, используемый в производстве вакцины». Предварительный патент №28680, от 16.04.2001 г., с последующей ежегодной перерегистрацией; «Штамм «Кордай» вируса болезни Ауески, используемый для проверки иммуногенности вакцин». Предварительный патент №29297, от 15.06.2001 г., с последующей ежегодной перерегистрацией; «Способ приготовления вакцины против болезни Ауески». Предварительный патент №45420, от 02.04.2004 г., с последующей ежегодной перерегистрацией; «Способ культивирования штамма вируса классической чумы свиней Pestis suum «КТ»». Предварительный патент №52833, от 17.09.2007 г.; «Станок для фиксации свиней». Предварительный патент №54353, от 25.02.2008 г. «Электросверло для нанесения отверстий в скорлупе куриного эмбриона». Предварительный патент №56103 от 28.05.2008 г.; «Способ культивирования штамма УБ-95 вируса болезни Ауески». Предварительный патент №57068, от 17.11. 2008 г.

Практическая значимость работы. Результаты исследований явились основой для разработки нормативно-технической, рекомендательной и методической документации:

1. «Вирусвакцина сухая против классической чумы свиней из лапинизированного штамма «КТ»» [ТУ640РК-38934366-РГКП-06-99, временная инструкция по изготовлению и контролю, наставление по применению], утвержденные Департаментом ветеринарного надзора МСХ РК, 12.12.1999г. Вакцина зарегистрирована в ГИЦССО Госстандарта РК № 116/000536 от 14 декабря 1999 г., перерегистрирована за №010/000027 от 21 октября 2004 г. сроком на 5 лет.

2. «Вирусвакцина сухая культуральная против болезни Ауески из штамма «УБ-95» [ТУ640РК-38934366-РГКП-05-99, временная инструкция по изготовлению и контролю, наставление по применению], утвержденные Департаментом ветеринарного надзора МСХ РК, 12.12.1999 г. Вакцина зарегистрирована в ГИЦССО Госстандарта РК №116/000535 от 14 декабря 1999 г., перерегистрирована за №010/000026 от 21 октября 2004 г., сроком на 5 лет.

3. Рекомендации по проведению противоэпизоотических мероприятий при классической чуме свиней. Утверждены директором Департамента ветеринарии МСХ РК 13.10.2006 г., Астана.

4. Рекомендации по проведению противоэпизоотических мероприятий при болезни Ауески. Утверждены директором Департамента ветеринарии МСХ РК 13.10.2006 г., Астана.

5. Методические указания по диагностике классической чумы свиней при ведении международной торговли. Утверждены директором Департамента развития животноводства и ветеринарной безопасности МСХ РК 16.01.2008 г., Астана.

6. Методические указания по диагностике болезни Ауески при ведении международной торговли. Утверждены директором Департамента развития животноводства и ветеринарной безопасности МСХ РК 16.01.2008 г., Астана.

Результаты исследований нашли широкое практическое применение в хозяйствующих субъектах республики и послужили основой обеспечению стойкого благополучия свинопоголовья по изучаемым заболеваниям.

Внедрение результатов исследований. Разработанная система эпизоотологического мониторинга внедрена в практику ветеринарии и используется при организации профилактических мероприятий против КЧС и БА в РК. Вирусвакцины против КЧС и БА широко апробированы в хозяйствах страны и до 2007 года ежегодно применялись для специфической профилактики болезней. В течение 2000-2006 гг. привито вакциной против БА 1 815 474 головы различных видов животных и вакциной против КЧС -1 611 882 головы свиней. В настоящее время данные вакцины используются в качестве республиканского запаса ветеринарных препаратов.

Учебные пособия, разработанные на основе материалов диссертационной работы: «Специфические биологические препараты, применяемые при инфекционных болезнях животных" и «Эпизоотологический мониторинг и противоэпизоотический план», используются в учебном процессе при подготовке кадров по специальностям 051201-Ветеринарная медицина, 051202-Ветеринарная санитария и 050701-Биотехнология, в Казахском агротехническом университете им. С. Сейфуллина, Казахском Национальном аграрном университете и Западно-Казахстанском аграрно-техническом университете им. Жангир Хана.

Материалы работы нашли также отражение в УМК для колледжей «Основы ветеринарного дела», рекомендованного МОН РК в качестве учебного пособия, при подготовке специалистов со средне-специальным ветеринарным образованием.

Основные положения исследований, выносимые на защиту:

- анализ эпизоотической ситуации по классической чуме свиней и болезни Ауески в Республике Казахстан;

- научные основы эпизоотологического мониторинга КЧС и БА в республике;

- научные и практические основы оценки риска проявления и распространения КЧС и БА;

- научные и практические основы зонирования территории страны и рекомендуемых к проведению мероприятий против КЧС и БА;

- биологические свойства аттенуированных и патогенных штаммов вирусов КЧС и БА, результаты отбора штаммов наиболее пригодных для приготовления и контроля вакцинных препаратов;

- технологии изготовления, контроля и применения вакцин против КЧС и БА;

- иммунобиологические свойства вакцин против КЧС и БА;

-экономическая оценка эффективности научных разработок.

Апробация результатов исследований. Основные положения диссертации доложены и получили положительную оценку на ежегодных отчетах аспирантов, докторантов, соискателей на заседаниях Ученого Совета Казахского агротехнического университета им. С. Сейфуллина в 2000-2008 гг., г. Астана и Научно-иследовательского института проблем биобезопасности, в 1998-2008 гг., пгт. Гвардейский, Жамбылской области, заседаниях Координационного Совета при КазНИВИ, по Программе 042 «Прикладные научные исследования в области агропромышленного комплекса» (Ветеринария), 2006-2008 гг., г. Алматы, Международной научно-практической конференции «Актуальные проблемы биологии и ветеринарии», г. Троицк, 2000 г., Международной научно-практической конференции, посвященной 10-летию Независимости РК, Астана, 2001 г., Международной научно-практической конференции «Современные проблемы аграрной науки и образования», Астана, 2002 г.; Международной научно-практической конференции, посвященной 50-летию освоения целины. Астана, 2004 г., Международной научно-практической конференции «Состояние и перспективы оздоровления хозяйств от инфекционных и незаразных болезней сельскохозяйственных животных», посвященной 100-летию со дня рождения К. П. Студенцова. Алматы 2006 г., 3-й Международной научно-практической конференции. Состояние и перспективы развития производства ветеринарных биопрепаратов. Алматы. 2006 г., 2-й Международной научно-практической конференции «Аграрная наука-сельскому хозяйству», Барнаул, 2007 г., 3-й Международной научно-практической конференции «Актуальные проблемы ветеринарии и сельскохозяйственной биотехнологии». Павлодар, 2007 г., Международной научно-практической конференции посвященной 50-летию основания АО «Казахский агротехнический университет им. С. Сейфуллина», Астана, 2007 г., Международной научно-практической конференции «Актуальные проблемы патологии, иммунологии и морфологии», посвященной 80-летию академика УААН Красникова Г.А., г. Харьков, 2008 г., Международной научно-практической конференции, посвященной 50-летию НИИПББ НЦБ РК, Алматы, 2008 г.

Публикация результатов исследований. По материалам диссертации опубликовано 42 научные работы, в том числе 8 предварительных патентов, выданных РГКП «Национальный институт интеллектуальной собственности» Министерства юстиции Республики Казахстан.

Объем и структура диссертации. Диссертация изложена на 265 страницах компьютерного текста и состоит из введения, обзора литературы, собственных исследований, обсуждения полученных результатов, заключения и списка использованной литературы. Работа иллюстрирована 40 таблицами и 52 рисунками, а также дополнена приложениями. Диссертационная работа процитирована 355 источниками литературы.


СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ


1 Материалы и методы исследований


Работа выполнена в период 1995-2008 гг. на кафедре ветеринарной санитарии АО «Казахский агротехнический университет им. С. Сейфуллина» МСХ РК и ДГП «Научно-исследовательский институт проблем биологической безопасности» НЦБ РК, а также в животноводческих хозяйствах РК по тематическим планам: «Поддержание и пополнение коллекции музейных (эталонных) образцов и производственных штаммов микроорганизмов возбудителей сельскохозяйственных, диких животных и птиц» (НИСХИ НЦБ РК, пгт. Гвардейский, Жамбылской области), 1992-1995 гг., программе РНТП Ц 0252 «Научно-техническое обеспечение и организация производства биотехнологической продукции в РК» на 2001-2005 гг., бюджетной программе 042 МСХ РК, номер гос. рег. 0106РК01277 (2006-2008 гг.).

В опытах использовали штаммы «Pestis suum «КТ» (аттенуированный) и «Ши-Мынь» (эпизоотический) вируса КЧС, «УБ-95» (аттенуированный), «ВНИЯИ» и «Кордай» (вирулентные) вируса БА. Для изучения иммунобиологических свойств вирусов были использованы овцы породы казахский меринос 3-6 мес. возраста, кролики ж. м. 2,5-3,0 кг, породы «Шиншилла», свиньи крупной белой породы, 2-6 мес. возраста.

Для выделения вирусов, культивирования, титрования, а также изучения антигенных свойств использовали первичные культуры клеток почек ягнят (ПЯ), телят (ПТ), тестикул ягнят (ТЯ), фибробластов куриных эмбрионов (ФКЭ), почек поросят (ПП), почек котят (ПК), почек щенят (ПЩ), клетки щитовидной железы поросят, и субкультуры до десятого пассажа культуры ФКЭ, перевиваемые линии клеток почки овцы (ПО), почки эмбриона свиньи (СПЭВ), почки сирийского хомячка (BHK-21), почки свиньи (PK-15). При работе с вышеперечисленными культурами клеток в качестве питательной использовали среду Игла или ПСП, с 5 % сыворотки крови крупного рогатого скота (КРС).

В исследованиях по обнаружению вируса КЧС в пробах биоматериалов использовали: набор ИФА «Сеditest CSFV Ag», для выявления антигена вируса КЧС, набор ИФА «Сеditest CSFV Ab», для выявления антител к вирусу КЧС, набор для выявления РНК (RNeasy Mini Kit cat 74106 Oiagen), тест-система для выявления вируса КЧС методом ПЦР в режиме реального времени (CSFW Virus RNA Test Kit, Polimerase Chain Reaction Tetracore).

Исследуемые вирусы репродуцировали в монослойных культурах клеток, приготовленных в круговых сосудах, вращающихся с помощью роллерных аппаратов барабанного типа и в суспензионных, поддерживаемых в ферментерах фирмы «Techne».

Эпизоотическую ситуацию по КЧС и БА изучали путем анализа данных ветеринарной отчетности Комитета государственной инспекции в АПК МСХ РК и результатов собственных исследований, полученных в животноводческих хозяйствах, проведенного согласно методическим рекомендациям Джупиной С.И. и Ведерникова В.А.

Определение чувствительности культур клеток к вирусам и пассирование вирусов в культурах клеток проводили общепринятыми методами. Учет результатов титрования осуществляли по цитопатическим изменениям в зараженных культурах клеток при отсутствии таковых в контрольных. Титр вируса рассчитывали по Риду и Менчу.

Вируснейтрализующую активность сывороток крови определяли в реакции нейтрализации. Постановку ИФА для выявления специфических антител проводили согласно наставлению. Иммунизацию животных против КЧС осуществляли вирусвакциной из штамма «КТ» введением ее внутримышечно в объеме 2 см³ против БА вирусвакциной из штамма «УБ-95», которую вводили подкожно в дозе 2 см³.

Контрольное заражение иммунизированных и интактных животных проводили вирулентным штаммом «Ши-мынь» вируса КЧС в дозе не менее 10^6,0 ЛД_50/гол и патогенным штаммом «Кордай» вируса БА в дозе не ниже 10^5.0 ИД_50/гол, заключенных в 1 см³ вируссодержащей суспензии.

Результаты иммунизации и заражения учитывали по данным клинических наблюдений (общее состояние организма, характер реакции в местах введения вирусвакцины и контрольного вируса, результатам термометрии) и титрам вируснейтрализующих антител в сыворотках крови животных.

Реактогенность и иммуногенность вариантов вирусвакцин из штамма «КТ» против КЧС и штамма «УБ-95» вируса БА проверяли на клинически здоровых, неиммунных овцах и подсвинках. За подопытными животными, вели клиническое наблюдение в течение 21 сутки. Реактогенность препаратов оценивали по характеру местной и общей реакций организма привитых животных.

Для оценки иммуногенности вирусвакцин через определенный промежуток времени после прививки, животных заражали контрольным вирусом, а также определяли титры антител в серологических реакциях (РН, ИФА). Одновременно, с привитыми инфицировали и интактных животных, в качестве контрольных. Иммуногенность вирусвакцин оценивали по реакции привитых животных на контрольное заражение. Вакцинированных животных считали иммунными, если в течение 14 суток после заражения они не заболевали соответствующей болезнью, а температура их не превышала физиологическую норму, при заболевании контрольных животных (подсвинки, овцы) КЧС или БА с проявлением клинических признаков, типичных для данных заболеваний.

Статистическую обработку результатов исследований проводили по методам, описанным в руководстве И.П. Ашмарина, А.А.Воробьева. Экономическая эффективность разработок определена по методике И.Н. Никитина. Определение средних величин, среднеквадратических отклонений доверительных границ и достоверности проводилось с помощью мастера статистических функций программы Microsoft Excel.