Методическая разработка по подготовке и работе на лабораторном занятии №11 для студентов медицинского факультета. Тема: Генетика микроорганизмов. Основы генной инженерии. Трансдукция. Трансформация. Конъюгация

Вид материалаМетодическая разработка

Содержание


Определение экзотоксинов и экзоферментов
1.7.2. Организационная структура лабораторного занятия
Автор: доцент, к.м.н. З.Н.Прокопчук
1.1. Актуальность темы
1.2. Цели изучения темы
1.2.2. Цель конкретная
1.3. Обеспечение исходного уровня знаний-умений.
1.4. Содержание обучения.
Подобный материал:
1   2   3   4   5   6





3. Разрез внешних покровов начинают из продольного разреза кожи от нижней челюсти к лобку. Кожу отсепарируют. Делают надрезы по направлению к конечностям. Отмечают состояние подкожной клетчатки и лимфатических узлов. При наличии в них изменений готовят мазки-отпечатки и осуществляют посев на питательные среды.



4. Разрез грудной полости. Всю область разреза обрабатывают дезинфицирующим раствором. Пинцетом захватывают мечевидний отросток, после чего делают продольные разрезы. Исследуют состояние органов грудной клетки. (отмечают наличие эксудата, делают посев крови в среду и мазки-отпечатки из легочной ткани.





5. Разрез брюшной полости. Поднимают пинцетом брюшную стенку, ножницами осуществляют продольные разрезы от диафрагмы до лобка и 2 поперечных разреза. После этого отворачивают мышечные лоскуты и исследуют состояние органов брюшной полости. Обращают внимание на размер, цвет, консистенцию селезенки, печени, надпочечников.




6. После завершения работы трупп животных и инструменты опускают в дезраствор.


Определение экзотоксинов и экзоферментов


Гиалуронидаза

Гидролизует гиалуроновую кислоту, которая перестает образовывать сгусток при добавлении уксусной кислоты. Для определения этого фермента в пробирку с субстратом вносят суточную культуру бактерий, инкубируют 15 мин при 370С. Потом прибавляют 2-3 капли концентрированной уксусной кислоты. В пробах, где содержится гиалуронидаза, не происходит образование сгустка

Плазмокоагулаза

Определяют при посеве исследуемой культуры в стерильную цитратную плазму. Посевы инкубируют при 370С на протяжении 2-5 ч. В результате происходит образование белков плазмы, тогда как в контроле она не изменяет своей консистенции.

Гемолизин

Изучают путем посева исследуемой культуры „бляшками” в чашки Петри с кровяным агаром. Чашки инкубируют в термостате на протяжении суток. При положительном результате вокруг посева образуются прозрачные зоны гемолиза.

Лецитиназа

Обнаруживают при посеве на агар с лецитином. Вокруг колоний бактерий, которые выделяют фермент, образуется зона помутнения с перламутровым блеском.

Цитотоксины

Для выявления некоторых бактериальных токсинов используют культуры клеток, где они проявляют цитопатическое действие (ЦПД). Бактериальные токсины различают по характеру ЦПД, которое может сопровождается изменением формы, размеров клетки, появлением вакуолей в цитоплазме, нарушением целостности клеточного монослоя.


1.7. Короткие методические указания для работы студентов на лабораторном занятии.


1.7.1. Методика проведения занятия.

1. Провести вскрытие трупа белой мыши, которая погибла от экспериментальной инфекции: отсепарировать кожу, отметить изменения в подкожной клетчатке, сделать разрез грудной и брюшной полостей.

2. Сделать посев крови из сердца, кусочков внутренних органов в сахарный МПБ.

3. Сделать мазки-отпечатки из органов, окрасить по Грамму, промикроскопировать.

4. Выучить действие ферментов патогенности бактерий (гемолизы, лецитиназа, плазмокоагулаза) в демонстрационном опыте.

5. Оформить протокол, сделать выводы.


1.7.2. Организационная структура лабораторного занятия




этапа

Этапы работы

Время

(мин.)

Средства

обучение

Оборудование

Место

проведение

1.

Организационная часть

3

-

-

Учебная

комната

2.

Проверка первичного уровня знаний:

Устно- по вопросам

Письменно - по тестам



5

10

Источники обуч. информации

Тесты на исходный уровень знаний

-

-

3.

Инструктаж преподавателя по выполнению практической работы согласно методическим указаниям

5

Метод. разработка




-

4.

Самостоятельная работа студентов:
  1. Вскрытие трупа лабораторного животного
  2. Посев крови и кусочков внутренних органов на питательные среды
  3. Изготовление мазков-отпечатков из внутренних органов



  1. Изучение действия ферментов патогенности



  1. Оформление протокола и выводов к лабораторному занятию



20


3


10


10

Таблица,

Алгоритм исследования

Фиксированный труп лабораторного животного,

Инструменты (ножницы, скальпель),

Пастеровские пипетки, дезраствор, перчатки, газовая горелка.

Предметные стекла, набор анилиновых красителей, микроскоп


Демонстрационные чашки с посевами для изучения ферментов патогенности

-

5.

Оценка деятельности каждого студента и проверка усвоения темы:

Устно - согласно теоретическим вопросам к занятию;

Письменно - по системе обучающих задач;



10


10

Система обучающих

задач







6.

Подведение итогов занятия, задача для самостоятельной работы студентов при подготовке к следующей теме

2










Автор: доцент, к.м.н. З.Н.Прокопчук


Методическая разработка

по подготовке и работе на лабораторном занятии №15

для студентов медицинского факультета


Тема: Видовой иммунитет. Исследование факторов неспецифичной резистентности организма человека.


1.1. Актуальность темы: Сегодня известно, что в процессе эволюции у теплокровных сформировалась целая система противодействия генетически чужеродным веществам (антигенам), которые проникают в макроорганизм, или при определенных условиях, возникают в нем. Поэтому, есть довольно актуальным и необходимым изучение механизмов защиты организма человека от антигенов. Это разрешает достигать значительных результатов в снижении численности инфекционных заболеваний, сохранении и поддержании здоровья населения планеты.


1.2. Цели изучения темы:


1.2.1. Цель общая: Ознакомиться с понятием „иммунитет”. Выучить основные виды и формы иммунитета. Ознакомиться с особенностями видового иммунитета и факторами защиты, которые его обуславливают.

1.2.2. Цель конкретная:

1. Выучить основные анатомо-физиологические факторы защиты.

2. Овладеть методикой определения титра комплемента по 100% гемолизу. Ознакомиться с составом и особенностями получения гемолитической (индикаторной) системы.

3. Овладеть методикой определения активности лизоцима в биологических жидкостях (слюна, слезы и др).

4. Выучить этапы фагоцитоза, как одного из основных механизмов защиты организма человека. Освоить методику определения уровня фагоцитарной активности (определение фагоцитарного числа и фагоцитарного индекса).


1.3. Обеспечение исходного уровня знаний-умений.

1. Кожа. Структура. Функции.

2. Соединительная ткань. Структура. Функции.

3. Клетки ретикуло-эндотелиальной системы

4. Фагоцитирующие клетки, их разновидности, функции.

5. Нормальная микрофлора организма человека, ее функции.

1.4. Содержание обучения.

1.4.1. Граф логической структуры содержания: