Минздравсоцразвития россии государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования
| Вид материала | Документы |
- О проведении запроса котировок, 308.12kb.
- Учебная программа составлена на основе федерального государственного образовательного, 284.34kb.
- Воронежская и борисоглебская епархия централизованная православная религиозная организация, 6127.09kb.
- Правила приема в государственное образовательное учреждение высшего профессионального, 314.94kb.
- Правительство Российской Федерации Государственное образовательное бюджетное учреждение, 91.24kb.
- Правительство Российской Федерации Государственное образовательное бюджетное учреждение, 371.48kb.
- Правила приема и порядок зачисления студентов на первый курс очной формы обучения, 794.07kb.
- Правительство Российской Федерации Государственное образовательное бюджетное учреждение, 344.56kb.
- Правила приема в Федеральное государственное образовательное учреждение высшего профессионального, 799.39kb.
- Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального, 189.85kb.
ВЛИЯНИЕ антенатальной ГИПОКСИИ НА ПРОЛИФЕРАТИВНЫЕ ПРОЦЕССЫ В ПОПУЛЯЦИИ КЛЕТОК КОЖИ НОВОРОЖДЕННЫХ БЕЛЫХ КРЫСД.В. Яковенко, Я.О. Ермоленко401 групп фармацевтического факультетаСекция экспериментальной медициныКафедра нормальной физиологии, ЦНИЛНаучные руководители: д.м.н. Е.Н.СазоноваОдно из главных свойств кожи - регенерировать, восстанавливаться после повреждений. Процессы репарации имеют большое значение для выживания. От скорости протекания регенераторных процессов в коже зависит эпителизация повреждений, послеоперационное восстановление целостности дермы, заживление пупочной ранки. Последнее имеет особое значение в неонатальном возрасте. Замедленная репарация пупочной ранки определяет возможность септических осложнений, особенно на фоне иммунологического дефицита, сопутствующего детям с антенатальной патологией. Цель нашей работы заключалась в изучении пролиферативной активности различных клеточных популяций кожных покровов у новорожденных животных, перенесших антенатальную гипоксию. Материалы и методы: Самок белых крыс подвергали гипоксии с 14 по 19 день беременности. Крыс помещали в барокамеру натощак и "поднимали" на высоту 9000 метров над уровнем моря. Исследовали состояние регенеративных процессов к коже новорожденных белых крыс. Последствия антенатальной гипоксии пытались коррегировать антиоксидантами различной природы. Использовали полифенольный антиоксидант дегидрокверцетин (ДГК) и пептидный антиоксидант неопиатный аналог лей-энкефалина (НАЛЭ). Исследуемые вещества вводили новорожденным животным с 2 по 6 сутки жизни внутрибрюшинно (ДГК – в дозе 50 мг/кг; НАЛЭ – в дозе 100 мкг/кг). В биоптатах кожи новорожденного потомства оценивали количество ДНК-синтезирующих эпителиоцитов и фибробластов (индекс меченных ядер - ИМЯ) и среднее число треков серебра над ядром - показатель интенсивности метки (ИМ). ИМЯ подсчитывалось при просмотре 1000 ядер и выражали в процентах. Мечеными считались ядра, над которыми проецировалось не менее 5 зерен серебра. ИМ - среднее число треков над ядром, оценивалась путем подсчета зерен серебра над 50 ядрами. В исследовании было использовано 80 животных. Результаты были обработаны статистическими методами. Результаты исследования: Проведенные нами эксперименты свидетельствуют, что у новорожденных животных, перенесших антенатальную гипоксию, наблюдается достоверное снижение ИМЯ эпителия кожи на 29,7%, что свидетельствует о снижении пролиферативного пула. Использование антиоксидантов нивелирует отличие экспериментальной группы от интактного контроля (ИМЯ эпителия в контроле – 10,79 + 1,38%; антенатальная гипоксия –7,59 + 0,68%*; ДГК + гипоксия – 9,72±1,73%; НАЛЭ + гипоксия –9,08±1,19%). Интересно отметить, что угнетение пролиферативной активности после антенатальной гипоксии имело место только в популяции эпителиоцитов кожи, в то время как в популяции фибробластов дермы каких-либо отклонений пролиферативной активности выявлено не было. Известно, что популяция фибробластов относительно устойчива к действию гипоксии. Дополнительные исследования по оценке пролиферативной активности фибробластов, полученных от животных, перенесших антенатальную гипоксию, были получены in vitro. В первичной культуре фибробластов дермы, полученной от новорожденных животных, перенесших антенатальную гипоксию не было зарегистрировано достоверного изменения ИМЯ (контроль: 13,97 + 1,73, опыт: 10,90 + 2,06 ). Однако, имело место достоверное увеличение показателя интенсивности метки и отчетливая тенденция к увеличению плотности клеточной культуры, что говорит об увеличении пролиферативного потенциала фибробластов животных подопытной группы. Выводы: 1. Антенатальная гипоксия вызывает достоверное снижение пролиферативной активности эпителия кожи новорожденных белых крыс. 2. Использование антиоксидантов биофлаваноидной или пептидной природы нивелирует подавление пролиферативной активности эпителия у животных, перенесших антенатальную гипоксию. 3. Действие антенатальной гипоксии не изменяет пролиферативную активность фибробластов кожи in vivo, а in vitro зарегистрировано ее увеличение. ГАСТРОПРОТЕКТИВНОЕ ДЕЙСТВИЕ ДАЛАРГИНА ПРИ ЭТАНОЛ-ИНДУЦИРОВАННОЙ ГАСТРОПАТИИ С.С. Животов 101 группа, лечебный факультет Секция химические дисциплины Кафедра химии Научные руководители: к.м.н., доцент Н.Н. Минаева, к.м.н., доцент Е.Ю. Животова Различные состояния организма, такие как «здоровье или болезнь» - «адаптация или дезадаптация» - во много определяются наличием оптимального соотношения между восстановленными и окисленными формами компонентов антиоксидантной системы. Широкое участие свободнорадикальных процессов в развитии и течении различных патологических состояний, затрагивающих все без исключения органы и системы, предполагает возможность профилактики и коррекции таких нарушений фармакологическими средствами. В связи с чем для поддержания гомеостаза обоснованным является применение лекарственных препаратов, способных предотвращать избыточный синтез активных метаболитов кислорода (АФК), повышать содержание или активность антиоксидантных систем организма и нормализовать метаболические процессы в клетках. Даларгин (Tyr – D-Ala – Gly – Phe – Leu – Arg) – вещество пептидной природы, синтетический аналог лейцин-энкефалина, который является эндогенным опиоидным пептидом. Препарат успешно применяется в клинической практике при лечении язвенной болезни желудка и двенадцатиперстной кишки у взрослых, в комплексном лечении эрозивно-язвенной патологии желудка и двенадцатиперстной кишки у детей. Пептид стимулирует репаративные процессы в слизистой оболочке желудка и двенадцатиперстной кишки, подвздошной кишки, толстого кишечника. Даларгин обладает выраженной антиоксидантной активностью, подавляя процессы образования свободных радикалов как в изолированных органах лабораторных животных, так и на уровне целого организма. Пептид способен сдвигать баланс между окисляющими и восстанавливающими компонентами свободнорадикального статуса как в условиях нормы, так и на фоне окислительного стресса. В нашей экспериментальной работе на белых лабораторных мышах выяснено, что даларгин оказывает положительное влияние на течение экспериментальных этанол-индуцированных язв. Язвы слизистой оболочки желудка, вызывали при помощи зондового введения 96 % этанола. Средняя площадь язвенно-эрозивного поражения слизистой оболочки желудка (СОЖ) у животных, получавших этанол, составила 10,32 ± 0,96 мм² (при отсутствии подобных изменений в контроле). Применение даларгина способствовало уменьшению площади язвенно-эрозивных дефектов в 1,52 раза (этанол - 10,32 ± 0,96 мм²; этанол + даларгин - 6,77 ± 1,66 мм²). При воздействии этанола на слизистую оболочку желудка имеют место несколько повреждающих механизмов. Одним из них является формирование на уровне органа и организма в целом окислительного стресса. Введение пептида, обладающего антиоксидантными и антирадикальными свойствами, на наш взгляд, является одним из возможных путей, способствующих заживлению язвенного дефекта слизистой оболочки желудка при этанол-индуцированных гастропатиях. ВЛИЯНИЕ ВНУТРИУТРОБНОЙ ГИПОКСИИ НА ТКАНЕВОЙ ГОМЕОСТАЗ МИОКАРДА ПОЛОВОЗРЕЛЫХ БЕЛЫХ КРЫС С. И. Зубенко 302 группа лечебного факультета, Е. В. Белоусов 207 группа педиатрического факультета Секция экспериментальной биологии и медицины Кафедра нормальной физиологии, ЦНИЛ Научный руководитель: д. м. н. Сазонова Е. Н. Внутриутробная гипоксия (ВУГ) является универсальным повреждающим фактором в системе «мать-плод» и сопровождает большинство патологических состояний беременности. В миокарде млекопитающих, подвергнутых ВУГ, развивается оксидативный стресс. При этом в избытке образуются активные метаболиты кислорода, которые могут изменять ход пролиферативных процессов в миокарде. Известна ведущая роль ранних периодов онтогенеза для становления структурного гомеостаза миокарда млекопитающих. Целью нашей работы было исследование отдаленных последствий ВУГ на некоторые структурные показатели миокарда половозрелых белых крыс. ВУГ в условиях эксперимента моделировали гипобарическим воздействием (9000 м над уровнем моря, с экспозицией 4 часа) на беременных самках белых крыс с 14 по 19 день гестации. Оценку последствий ВУГ проводили у потомства - новорожденных 1-суточных крысят, а также половозрелых (60 суточных) крысах-самцах. Исследовали массу сердца и количество ядрышек в ядрах кардиомиоцитов. Для изучения показателей ядрышкового аппарата (ЯОР) изготавливали гистологические препараты, окрашенные азотнокислым серебром. Подсчитывали среднее количество ЯОР путем просмотра не менее 150 ядер в субэндокардиальном слое левого и правого желудочков. Для изучения скорости и активности синтеза ДНК в кардиомиоцитах использовали методику авторадиографии с меченым Н3-тимидином. Подсчитывали среднее количество меченых ядер на 1000 кардиомиоцитов (ИМЯ) и среднее количество меток в одном ядре в не менее чем 50 меченых ядрах (ИМ). Полученные данные обрабатывались в программе «Statistica 6.0». Результаты исследования. Показатель ИМЯ у новорожденных крысят подопытной группы был достоверно снижен по сравнению с контрольными параметрами и составил 13,92±0,15% и 9,90±0,15% (в контрольной и гипоксической группах, соответственно). Уменьшение показателя составило 29%. Зарегистрированное снижение пролиферативной активности кардиомиоцитов в критический период развития миокарда может иметь существенные последствия для тканевого гомеостаза сердца. Масса сердца 60-суточных крыс-самцов подопытной группы была достоверно ниже контрольного параметра. Этот показатель составил 914,17 + 24,63мг в контрольной группе и 810,87 + 18,35 мг в подопытной, снижение показателя на 11%, р=0,02. При анализе параметров ЯОР нами было зарегистрировано достоверное снижение количества ядрышек в кардиомиоцитах правого желудочка животных подопытной группы: контроль – 2,01 +0,04; опыт – 1,83+0,04; отклонение на 9%, р=0,006 Показатели ядрышкового аппарата отражают активность анаболических белок-синтетических процессов в клетке. Выводы: 1) Внутриутробная гипоксия достоверно снижает ДНК-синтетическую активность кардиомиоцитов желудочков 1-суточных белых крыс. 2) Внутриутробная гипоксия приводит к снижению количества ядрышек в кардиомиоцитах правого желудочка половозрелых белых крыс. 3) У половозрелых белых крыс, перенесших ВУГ имеет место снижение абсолютной массы сердца. Результаты проведенного исследования позволяют утверждать, что антенатальная гипоксия индуцирует отсроченные морфогенетические эффекты в миокарде. Выявленные последствия внутриутробной гипоксии могут изменять реакцию миокарда на патологические воздействия, включая ишемию-реперфузию. ВЛИЯНИЕ РАСТИТЕЛЬНОГО АНТИОКСИДАНТА ДИГИДРОКВЕРЦЕТИНА НА СТРУКТУРНЫЙ ГОМЕОСТАЗ ПЕЧЕНИ НОВОРОЖДЕННЫХ МЛЕКОПИТАЮЩИХ. М.А. Ивасюк 211 группа, лечебный факультет, О.В. Дещеня 207 группа, педиатрический факультет Секция экспериментальной биологии и медицины Кафедра нормальной физиологии, ЦНИЛ Научный руководитель: д.м.н. Е.Н.Сазонова Печень – самая массивная железа и самый крупный непарный орган человека. Болезни печени входят в число самых распространенных причин смерти в развитых странах. Практически все патологические процессы, протекающие в печени, сопровождаются тканевой гипоксией и оксидативным стрессом. Препаратами, ограничивающими активность процессов свободнорадикального окисления, являются антиоксиданты. Однако сведения о влиянии антиоксидантов на регенеративную и анаболическую активность клеток печени являются малоизученными. Целью исследования было изучить показатели структурного гомеостаза печени новорожденных млекопитающих после введения растительного антиоксиданта дигидрокверцетина. Дигидрокверцетин — это нативный (т.е. с ненарушенной природной структурой) флавоноид антиоксидантной группы Р-витаминов. На сегодняшний день он является эталонным антиоксидантом, и работает на уровне клеточных мембран. Его антиоксидантное действие существенно превышает уровень действия широко известных витаминов А, С и Е. В ходе работы были исследованы новорожденные белые беспородные крысы неонатального возраста, которым вводился антиоксидант – дигидрокверцетин и оказываемое им влияние на пролиферативную и анаболическую активность гепатоцитов. Дигидрокверцетин вводили новорожденным крысам в дозе 50 мг/кг внутрибрюшинно со 2-х по 6-е сутки жизни. Анализ ДНК-синтетической активности и показателей ядрышкового аппарата гепатоцитов производили через 24 часа. Для обнаружения ядрышкового организатора в ядрах гепатоцитов пользовались гистологическими препаратами, окрашенными азотнокислым серебром по методике Ag NORS. Состояние ДНК-синтетической активности гепатоцитов оценивали с помощью авторадиографии. Подсчитывали индекс меченых ядер с 3H-тимидином, отражающий среднее количество ДНК-синтезирующих ядер, а также интенсивность метки, которая указывает на скорость ДНК-синтетической активности гепатоцитов. В результате исследования было выявлено, что введение ДГК достоверно увеличивает индекс меченых ядер гепатоцитов на 31,2 %. Возрастание индекса меченых ядер свидетельствует об увеличении пролиферативного пула. Имело место также достоверное повышение интенсивности метки на 36,5 %, что косвенно свидетельствует об увеличении скорости ДНК-синтетических процессов. Также наблюдалось увеличение на 8,8% числа зон ядрышковых организаторов. Последний параметр указывает на усиление анаболической активности гепатоцитов. Из результатов исследования можно сделать выводы, что растительный антиоксидант дигидрокверцетин стимулирует способен стимулировать анаболическую и пролиферативную активность гепатоцитов новорожденных млекопитающих. ВЛИЯНИЕ β-КАЗОМОРФИНА-7 НА АНАБОЛИЧЕСКУЮ АКТИВНОСТЬ МЫШЕЧНОЙ ТКАНИ НОВОРОЖДЕННЫХ МЛЕКОПИТАЮЩИХ Л.В. Коноплёва 211 группа, лечебный факультет А.В. Шевнина 204 группа, педиатрический факультет Секция экспериментальной биологии и медицины Кафедра нормальной физиологии, ЦНИЛ Научный руководитель: д.м.н Е.Н.Сазонова Казоморфины – экзогенные опиоидные пептиды, продукты гидролиза казеина молока. Казоморфины играют важную роль в раннем постнатальном онтогенезе млекопитающих. Установлена способность β-казоморфинов влиять на поведенческие реакции и материнско-детское взаимодействие (Дубынин В.А., Ивлеева Ю.А., Малиновская И.В., 2001 ). Существует гипотеза о роли казоморфинов в развитии аутических расстройств (Соколов О.Ю., Кост Н.В.,2007). Вместе с тем, малоизученны структурные эффекты казоморфина. Целью исследования было выяснить влияние β-казоморфина-7 на анаболическую активность симпластов языка и гладких миоцитов кишечника новорожденных млекопитающих. Материалы и методы: β-казоморфин-7 (Tyr-Pro-Phe-Pro-Gly-Pro-Ile) вводили новорожденным белым крысам в дозе 1мг/кг ежесуточно со вторых по шестые сутки жизни. Для исследования использовали биоптаты языка и двенадцатиперстной кишки. Окраску препаратов производилась азотнокислым серебром по методу AgNORs. Анаболическую активность симпластов языка и гладких миоцитов двенадцатиперстной кишки оценивали по количеству ядрышек, окрашенных азотнокислым серебром. Согласно результатам проведенного исследования введение β-казоморфина-7 индуцировало достоверное увеличение количества зон ядрышкового организатора в симпластах языка на 54,47%. Язык занимает важное место функциональной системе питания. В частности, он принимает участие в акте сосания, являющимся одним их основополагающих актов роста и развития организма. Повышение анаболической активности симпластов языка является позитивным изменением. В гладких миоцитах двенадцатиперстной кишки мы получили эффект иной направленности. Зарегистрировано достоверное уменьшение количества зон ядрышкового организатора в гладких миоцитах двенадцатиперстной кишки на 6,96%. Возможно, угнетающее влияние β-казоморфина-7 на анаболическую активность гладких миоцитов кишечника опосредовано взаимодействием пептида с опиоидными рецепторами. В гастроэнтерологии используются опиоидные лиганды, оказывающие антидиарейное воздействие. Вероятно, снижение анаболической активности при воздействии на гладкие миоциты β-казоморфина-7 имеет ту же природу. Механизмы и физиологическое значение выявленных эффектов β-казоморфина-7 требуют дальнейшего исследования. Особенности поведения белых крыс в открытом поле разной конфигурации: Методический аспект Г.Д. Сунозова, Е.К. Иванов 205 группа, педиатрический факультет. Секция экспериментальной биологии и медицины Кафедра нормальной физиологии, ЦНИЛ Научный руководитель: д.м.н. Сазонова Е.Н. Открытое поле - это метод количественного измерения компонентов поведения животного, помещенного в новое открытое пространство, выбраться из которого ему мешает огораживающая пространство стенка. Метод открытого поля является основным способом исследования поведения животных и используется повсеместно. Между тем этот метод не достаточно стандартизован в некоторых принципиальных моментах, от которых зависит, результат исследования. Целью исследования было выявить различия в показателях оценки поведенческих реакций в открытых полях одной площади, но разной конфигурации (круглом и квадратном) Материалы и методы: Было изготовлено две модели «открытого поля»: 1) круглая арена диаметром 1 м, стенкой 20 см и 2) квадратном поле со стороной 1м и стенкой 20см, пол которых размечен вертикальными и горизонтальными линиями. В течении 3 мин регистрировали подвижность животных (30-суточных белых крыс) - по числу пересеченных периферических и центральных секторов поля (горизонтальная двигательная активность) и количеству стоек (вертикальная двигательная активность), а также количество дефекаций, как результат вегетативных нарушений и время груминга, как проявление антистрессового поведения. В эксперименте использовались 104 белые крысы. Полученные данные обрабатывались в программе «Statistica 5.0». Согласно результатам проведенного исследования животные проявляют большую двигательную активность (как горизонтальную, так и вертикальную) в круглом поле. По сравнению с аналогичными параметрами, зарегистрированными в квадратном поле, на круглой арене было примерно втрое увеличено количество стоек и посещенных периферических квадратов. При этом, показатели груминга и дефекаций не зависели от типа открытого поля. Механизмы наблюдаемых поведенческих отличий требуют дальнейшего исследования. Влияние антенатальной гипоксии на развитие репродуктивной системы самок белых крыс О.А.Рябухина 601 группа, педиатрический факультет. Секция экспериментальной биологии и медицины Кафедра нормальной физиологии, ЦНИЛ Научный руководитель: д.м.н. Сазонова Е.Н. Гипоксия является широко распространенным явлением и возникает как в условиях дефицита кислорода во внешней среде, так и при различных болезнях и патологических процессах, связанных с нарушением функций дыхательной, сердечно-сосудистой систем, а также транспортной функции крови и работы ферментов. Во всех случаях в конечном итоге происходит снижение доставки и потребления кислорода до уровня, недостаточного для сохранения структуры, поддержания на должном уровне метаболизма и функциональных возможностей органов и тканей (Агаджанян Н.А., Башкиров А.А., 1978). Недостаточное снабжение кислородом организма плода - антенатальная гипоксия – выявляется при патологии беременности любого типа и может иметь значительные отдаленные последствия для организма в последующие периоды онтогенеза. Целью данной работы было изучить влияние антенатальной гипоксии на развитие репродуктивной системы самок белых крыс. Беременных крыс подвергали гипоксическому воздействию с 14 по 19 сутки гестации. Гипоксию моделировали путем «подъема» животных в барокамере «на высоту 9000 м». что соответствовует давлению 224 мм рт ст и насыщению кислородом 42 мм рт ст. Разрежение воздуха в камере осуществляли с помощью вакуума, контролируя величину разрежения по манометру. Исследовали потомство подопытных самок. Группу контроля составляло потомство интактных животных. Всего в эксперименте было использовано 46 белых крыс. Оценивали сроки полового созревания крыс-самок, перенесших антенатальную гипоксию, по тесту открытия вагины. Выявлено, что половое созревание самок подопытной группы наступает достоверно позже, по сравнению с контрольными животными. В группе контроля исследуемый показатель составил 54,76 + 0,76 суток , в то время как в подопытной группе 58,07 + 0,95 суток * (р=0,01). Полученные нами данные согласуются с результатами ссылка скрыта. et al (2005), описывавшими замедление полового созревания у девочек с задержкой внутриутробного развития. В нашем исследовании мы провели скрещивание половозрелых крыс-самок, перенесших антенатальную гипоксию, и крыс-самок контрольной группы с интактными самцами. Течение беременности также было интактным – никаких воздействий во время беременности не проводилось. Анализировали параметры 20-суточных плодов. Было выявлено, что у крыс-самок подопытной группы имело место достоверное уменьшение количества 20-суточных плодов: в контроле - 12,40 + 0,81; в опыте - 8,33 + 1,48* (р=0,048). Масса плодов у животных, перенесших антенатальную гипоксию, также была достоверно ниже: контроль - 1,492 + 0,025 г; опыт - 1,373 + 0,03* (р=0,004). Результаты проведенного экспериментального исследования позволяют утверждать, что антенатальная гипоксия индуцирует существенные нарушения функционирования женской репродуктивной системы. Влияние антенатальной гипоксии на некоторые структурно-функциональные показатели головного мозга белых крыс |