Методическая разработка по подготовке и работе на лабораторном занятии №21 для студентов медицинского факультета Тема: Специфическая профилактика и терапия инфекционных заболеваний. Сыворотки и иммуноглобулины

Вид материала

Методическая разработка

Содержание Актуальность темы Цель изучения темы. Обеспечение исходного уровня знаний-умений. 3.2. Тесты на исходный уровень знаний-умений. 3. Содержание обучения. 4. Источники учебной информации. 6. Краткие методические указания для работы студентов на лабораторном занятии. Организационная структура проведения лабораторного занятия. Автор: ассистент, к.м.н. Бойко В.М. Тема: Методы индикации и идентификации виру сов. Принципы диагностики вирусных заболеваний. Цель изучения темы. Обеспечение исходного уровня знаний-умений. 3.2. Тесты на исходный уровень знаний-умений. 3. Содержание обучения. 4. Источники учебной информации. 5. Ориентировочная основа действия структуры вирусологического исследования патологического материала 6. Система контрольных заданий. 7. Краткие методические указания для работы студентов на лабораторном занятии. 8 . Организационная структура проведения лабораторного занятия. Автор: ассистент, к.м.н. Бойко В.М. ... Полное содержание

Подобный материал:

• Методическая разработка по подготовке и работе на лабораторном занятии №11 для студентов, 777.95kb.
• Методическая разработка по подготовке и работе на лабораторном занятии №31 для студентов, 622.65kb.
• Методическая разработка по подготовке лабораторного занятия №41 для студентов медицинского, 1130.19kb.
• Календарный план лекций по микробиологии, вирусологии и иммунологии для студентов, 23.61kb.
• Методическая разработка по хирургии для студентов IV курса медицинского факультета, 42.2kb.
• Методическая разработка по хирургии для студентов IV курса медицинского факультета, 67.29kb.
• Темы лекций по циклу «поликлиническая терапия» для студентов 6 курса лечебного факультета, 9.89kb.
• Тематические планы лекций Темы лекций по терапевтической стоматологии для студентов, 733.5kb.
• План лабораторных занятий по микробиологии для студентов 3 курса лечебного факультета,, 392.08kb.
• Шульга Наталья Григорьевна, мастер, 33.95kb.

Тема: Общая вирусология. Морфология и ультраструктура вирусов. Методы культивирования вирусов.


^ Актуальность темы. Вирусы - это автономные генетические структуры, которые способны репродуцироваться у восприимчивых к ним клетках, используя их генетический и белоксинтезирующий потенциал. Способность вирусов вносить новую генетическую информацию в генетический аппарат клетки хозяина, определяет их роль важного фактора изменчивости и биологической эволюции всего живого.


^ Цель изучения темы.

Цель общая. Ознакомиться с морфологией, ультраструктурой и методами культивирования вирусов.

Цель конкретная. Знать значения открытия Д.И.Ивановского, этапы развития вирусологии; систематическое положение вирусов среди представителей микромира.

. ^ Обеспечение исходного уровня знаний-умений.

Лекции „Вирусы. Общая характеристика. Биологические свойства” „Современные методы диагностики вирусных болезней” „Иммунитет. Особенности противовирусного иммунитета”.

^ 3.2. Тесты на исходный уровень знаний-умений.

Пример теста.

Тест . Укажите компоненты РСК для серологической диагностики вирусной инфекции.

A. Сыворотка больного, вирусный материал, комплемент, эритроциты барана

B. Парные сыворотки больного, вирусный диагностикум, комплемент, гемолитическая сыворотка

C. Вирусный диагностикум, парные сыворотки больного, комплемент, гемолитическая система

D. Вирус, специфическая сыворотка, комплемент, эритроциты барана

E. Специфическая сыворотка, вирусный диагностикум, гемолитическая система

Ответ: B. Парные сыворотки больного, вирусный диагностикум, комплемент, гемолитическая сыворотка


^ 3. Содержание обучения.

Граф логическая структура содержания.

Перечень теоретических вопросов

1. Значение открытия Д.И Ивановского. Этапы развития вирусологии;

2. Систематическое положение вирусов среди представителей микромира.

3. Принципы электронной микроскопии вирусов ;

4. Морфология, ультраструктура и классификация вирусов

5. Принципы культивирования вирусов


^ 4. Источники учебной информации.

Литература основная.

К.Д.Пяткин, Ю.С.Кривошеин. Микробиология, К., 1982. – С. 385-391.

А.И.Коротяев, С.А.Бабичев. Медицинская микробиология, иммунология и вирусология. С.-Петербург, 2002. – С. 319-327.

И.С. Гайдаш, В.В. Флегонтова. Медицинская вирология. Луганск, 2002. – С. 195-213.

И.Л.Дикий и соавт. Микробиология, Харьков, 1999. – С. 375-387.

С.И.Климнюк и соавт. Практическая микробиология. Тернополь, 2004. – С. 375-379.


Литература дополнительная.

Микробиология, вирусология, иммунология, инфекционные болезни. Словарь/ Ред Г.К.Палия, В.Г.Палия. – Киев: Здоровье, 2004. – С. 58, 122, 110-111.

Сборник заданий для подготовки к тестовому экзамену по естественно научным дисциплинам «Крок-1. Общая врачебная подготовка» / За ред. В.Ф.Москаленка и соавт. – К.: Медицина, 2004. - С.328-331.

5. Ориентировочная основа действия структуры вирусологического исследования патологического материала.

Забор материала → обработка материала антибиотиком → культивирование вирусов

Серологична диагностика.

Выявление антител с помощью ИФА,РІА,РНГА.

Выявление антигенов ИФА, РИА.

Молекулярно генетический метод.

Выявление вирусных нуклеиновых кислот в патологическом материале с помощью ПЦР.

5. Система контрольных заданий.

Примеры тестов.

Тест Что такое цитопатическое действие вирусов?

A. Изменение биологических свойств вирусов после проникновения их в клетку.

B. Дегенеративные изменения в клетках под воздействием вирусов.

C. Изменение биологических свойств вирусов после выхода их из клетки.

D. Образование многоядерных клеток в результате проникновения в них вирусов. Е Образования внутриядерных или внутришнецитоплазматичних включений в

клетках под влиянием вируса

Ответ: В Дегенеративные изменения в клетках под воздействием вирусов.

^ 6. Краткие методические указания для работы студентов на лабораторном занятии.

Методика проведения занятия.

♦ ознакомиться с методом репродукции вирусов в культурах клеток;

♦ усвоить метод постановки цветной пробы


^ Организационная структура проведения лабораторного занятия.

№ етапа	Етап работи	Вре мя	Засоби навчання	Обладнання	Место прове-дения
1.	Организационная часть	2			Учебная лаборатория
2.	Проверка первичного уровня знаний	15	Тесты
3.	Инструктаж преподавателя. Преподаватель подчеркивает актуальность темы	10	Таблицы:
4.	Самостоятельная работа студентов.	40		Штативы Цветная проба
5.	Написание контролирующих тестов.	10	Тесты
6.	Подведение итогов, оценка деятельности каждого студент	5-10
7.	Задание для самостоятельной работы при изучении следующей темы 3	3

^ Автор: ассистент, к.м.н. Бойко В.М.


Методическая разработка

по подготовке и работе на лабораторном занятии №25

для студентов медицинского факультета


^ Тема: Методы индикации и идентификации виру сов. Принципы диагностики вирусных заболеваний.

Актуальность темы. Вирусы не растут на искусственных питательных средах, потому, что размножаются исключительно внутриклеточный. Вирусы культивируют на трех биологических моделях: в организме лабораторных животных, в эмбрионах птиц и культурах клеток тканей. Культивируемые вирусы определяют с помощью методов индикации и идентификации.

^ Цель изучения темы.

Цель общая. Ознакомиться с методами индикации и идентификации

Цель конкретная. Знать этапы постановки современных методов культивирования, индикации и идентификации вирусных заболеваний.

. ^ Обеспечение исходного уровня знаний-умений. Лекции „Вирусы. Общая характеристика. Биологические свойства” „Современные методы диагностики вирусных болезней” „Иммунитет. Особенности противовирусного иммунитета”.

^ 3.2. Тесты на исходный уровень знаний-умений.

Пример теста.

Тест. В основание классификации вирусов положены:

A. тип нуклеиновой кислоты

B. содержание пар гуанин/цитозин

C. тип симметрии вирионов

D. наличие или отсутствие суперкапсида

E. Все выше указано

Ответ: E. Все выше указано


^ 3. Содержание обучения.

Граф логическая структура содержания.

Перечень теоретических вопросов

1. Общая характеристика методов культивирования вирусов.

2. ознакомиться с методом цитопатичной действия вирусов

3. усвоить феномен бляшкоутворення и включений в цитоплазме

4 познакомиться с реакциями гемаглютинации, гемадсорбции и

нейтрализации


^ 4. Источники учебной информации.

Литература основная.

К.Д.Пяткин, Ю.С.Кривошеин. Микробиология, К., 1982. – С. 385-391.

А.И.Коротяев, С.А.Бабичев. Медицинская микробиология, иммунология и вирусология. С.-Петербург, 2002. – С. 319-327.

И.С. Гайдаш, В.В. Флегонтова. Медицинская вирология. Луганск, 2002. – С. 195-213.

И.Л.Дикий и соавт. Микробиология, Харьков, 1999. – С. 375-387.

С.И.Климнюк и соавт. Практическая микробиология. Тернополь, 2004. – С. 375-379.

Литература дополнительная.

Микробиология, вирусология, иммунология, инфекционные болезни. Словарь/ Ред Г.К.Палия, В.Г.Палия. – Киев: Здоровье, 2004. – С. 58, 122, 110-111.

Сборник заданий для подготовки к тестовому экзамену по естественно научным дисциплинам «Крок-1. Общая врачебная подготовка» / За ред. В.Ф.Москаленка и соавт. – К.: Медицина, 2004. - С.328-331.

^ 5. Ориентировочная основа действия структуры вирусологического исследования патологического материала

♦ ознакомиться с методом цитопатичной действия вирусов;

♦ усвоить феномен бляшкоутворення и включений в цитоплазме;

♦ познакомиться с реакциями гемаглютинации, гемадсорбции и нейтрализации


^ 6. Система контрольных заданий.

Примеры тестов.

.

Тест . Для индикации вирусов в исследуемом материале используют реакцию:

А. латексаглютинации

B. гемаглютинации

C. кильцепреципитации

D. коаглютинации

E. агглютинации

Ответ: B. гемаглютинации

^ 7. Краткие методические указания для работы студентов на лабораторном занятии.

1. Ознакомиться с принципом постановки методов индикации и идентификации

вирусных инфекций


^ 8


. Организационная структура проведения лабораторного занятия.

№ етапа	Етап работи	Вре мя	Засоби навчання	Обладнання	Место прове-дения
1.	Организационная часть	2			Учебная лаборатория
2.	Проверка первичного уровня знаний	15	Тесты
3.	Инструктаж преподавателя. Преподаватель подчеркивает актуальность темы	10	Таблицы:
4.	Самостоятельная работа студентов.	40		Штативы Цветная проба
5.	Написание контролирующих тестов.	10	Тесты
6.	Подведение итогов, оценка деятельности каждого студент	5-10
7.	Задание для самостоятельной работы при изучении следующей темы 3	3

^ Автор: ассистент, к.м.н. Бойко В.М.


Методическая разработка

по подготовке и работе на лабораторном занятии №26

для студентов медицинского факультета


^ Тема: : Серологические реакции в диагностике вирусных инфекций.


Актуальность темы. . Взаимодействие антигена с антителом проявляется в форме разнообразных иммунных, или серологичних реакций. В связи с их высокой чувствительностью и специфичностью они нашли широкое диагностическое применение.

^ Цель изучения темы.

Цель общая. Ознакомиться с серологичними реакциями в диагностике вирусных инфекций.

Цель конкретная. Знать дифференциальные признаки серологичних реакций которые используют для типування вирусов в исследуемом материале.

. ^ Обеспечение исходного уровня знаний-умений. Лекции „Вирусы. Общая характеристика. Биологические свойства” „Современные методы диагностики вирусных болезней” „Иммунитет. Особенности противовирусного иммунитета”.

^ 3.2. Тесты на исходный уровень знаний-умений.

Пример теста.

Тест. В основание классификации вирусов положены:

A. тип нуклеиновой кислоты

B. содержание пар гуанин/цитозин

C. тип симметрии вирионов

D. наличие или отсутствие суперкапсида

E. Все выше указано

Ответ: E. Все выше указано

^ 3. Содержание обучения.

Граф логическая структура содержания.

Перечень теоретических вопросов

1. Общая характеристика серологих реакций

2. Выявление антител с помощью ИФА,РІА,РНГА.

3. Выявление антигенов ИФА, РИА.

4. Молекулярно генетический метод.

5. Выявление вирусных нуклеиновых кислот в патологическом материале с помощью ПЦР.

^ 4. Источники учебной информации.

Литература основная.

К.Д.Пяткин, Ю.С.Кривошеин. Микробиология, К., 1982. – С. 385-391.

А.И.Коротяев, С.А.Бабичев. Медицинская микробиология, иммунология и вирусология. С.-Петербург, 2002. – С. 319-327.

И.С. Гайдаш, В.В. Флегонтова. Медицинская вирология. Луганск, 2002. – С. 195-213.

И.Л.Дикий и соавт. Микробиология, Харьков, 1999. – С. 375-387.

С.И.Климнюк и соавт. Практическая микробиология. Тернополь, 2004. – С. 375-379.

Литература дополнительная.

Микробиология, вирусология, иммунология, инфекционные болезни. Словарь/ Ред Г.К.Палия, В.Г.Палия. – Киев: Здоровье, 2004. – С. 58, 122, 110-111.

Сборник заданий для подготовки к тестовому экзамену по естественно научным дисциплинам «Крок-1. Общая врачебная подготовка» / За ред. В.Ф.Москаленка и соавт. – К.: Медицина, 2004. - С.328-331.

^ 5. Ориентировочная основа действия структуры вирусологического исследования патологического материала

Основные принципы использования серологичних реакций для диагностики вирусных инфекций

РГГА, реакция нейтрализации, ИФА, реакции имунодифузии.

Генетические методы идентификации вирусов

^ 6. Система контрольных заданий.

Примеры тестов.

Тест Для установления вида вируса, который обусловил болезнь используют

A. реакцию агглютинации

B. реакцию непрямой гемагглютинации

C. реакцию торможения гемагглютинации

D. реакцию гемагглютинации

E. реакцию гемадсорбции

Ответ: C. Реакцию торможения гемаглютинации

^ 7. Краткие методические указания для работы студентов на лабораторном занятии.


Серологична диагностика.

РГГА, реакция нейтрализации, ИФА, реакции имунодифузии.

выявление антител к определенным вирусным белкам с помощью имуноблотингу.

Молекулярно генетический метод.

Выявление вирусных нуклеиновых кислот в патологическом материале с

помощью ПЦР.

^ 6. Система обучающих заданий.

Примеры тестов.

Тест Для установления вида вируса, который обусловил болезнь используют

A. реакцию агглютинации

B. Реакцию непрямой гемаглютинации

C. Реакцию торможения гемаглютинации

D. реакцию гемаглютинации

E. реакцию гемадсорбции

Ответ: C. Реакцию торможения гемаглютинации

^ 7. Кратки методические указания для работы студентов на лабораторном занятии.

Методика проведения занятия.

1. Ознакомиться с принципом постановки имуноферментного метода с целью выявления специфических -антитіл в сыворотке крови больного.

Для воссоздания принципа ИФА на занятии в качестве твердофазного носителя используются планшетки с адсорбируемыми на дне луночек антигенами.

Студенты в луночки вносят по одной капле исследуемых сывороток и вмещают планшетки в термостат на 30 С). Потом промывают буферным раствором и вносят меченые ферментомминут (37 (пероксидазой хрону) антивидовые (антииммуноглобулину) сыворотки. Планшеты С. Промывают луночкипримищують в термостат на 30-40 минут при температуре 37 буферным раствором, вносят по капли перекиси водорода и ортофенилдиамину (ОФД).


^ 8. Организационная структура проведения лабораторного занятия.

№ етапа	Етап работи	Вре мя	Засоби навчання	Обладнання	Место прове-дения
1.	Организационная часть	2			Учебная лаборатория
2.	Проверка первичного уровня знаний	15	Тесты
3.	Инструктаж преподавателя. Преподаватель подчеркивает актуальность темы	10	Таблицы:
4.	Самостоятельная работа студентов.	40		Штативы Цветная проба
5.	Написание контролирующих тестов.	10	Тесты
6.	Подведение итогов, оценка деятельности каждого студент	5-10
7.	Задание для самостоятельной работы при изучении следующей темы 3	3

^ Автор: ассистент, к.м.н. Бойко В.М.


Методическая разработка

по подготовке и работе на лабораторном занятии №27

для студентов медицинского факультета


^ Тема: Вирусы бактерий (фаги). Строение и свойства. Практическое использование фагов.

Актуальность темы. . Бактериофаги – вирусы бактерий. Бактериофагия – процесс взаимодействия фагов с бактериями, который заканчивается их разрушением.

^ Цель изучения темы.

Цель общая. Ознакомиться с явлениями специфического фаголизиса и применение фагов в мелицине.

Цель конкретная. Знать этапы использования фагов для идентификации инфекционных болезней.

2. ^ Обеспечение исходного уровня знаний-умений. Лекции „Вирусы. Общая характеристика. Биологические свойства” „Современные методы диагностики вирусных болезней” „Иммунитет. Особенности противовирусного иммунитета”.

^ 3.2. Тесты на исходный уровень знаний-умений.

Пример теста.

Тест Вирус получает суперкапсид во время следующей стадии своей репродукции:

A. проникновение

B. синтеза белка

C. раздевание

D. составление

E. выход вирусных частиц из клетки

Ответ: Е выход вирусных частиц из клетки

^ 3. Содержание обучения.

Граф логическая структура содержания

В демонстрационном опыте ознакомиться с литическим действием фага на кишечную палочку методом «стекающей капли», усвоить метод фаготипирования.


Перечень теоретических вопросов

1. Общая характеристика морфологии фагов.

2. Механизм взаимодействия вирулентного фага с бактериальной клеткой

3. Лизогения и фаговая конверсия.

4. Использование фагов в практической медицине


^ 4. Источники учебной информации.

Литература основная.

К.Д.Пяткин, Ю.С.Кривошеин. Микробиология, К., 1982. – С. 385-391.

А.И.Коротяев, С.А.Бабичев. Медицинская микробиология, иммунология и вирусология. С.-Петербург, 2002. – С. 319-327.

И.С. Гайдаш, В.В. Флегонтова. Медицинская вирология. Луганск, 2002. – С. 195-213.

И.Л.Дикий и соавт. Микробиология, Харьков, 1999. – С. 375-387.

С.И.Климнюк и соавт. Практическая микробиология. Тернополь, 2004. – С. 375-379.

Литература дополнительная.

Микробиология, вирусология, иммунология, инфекционные болезни. Словарь/ Ред Г.К.Палия, В.Г.Палия. – Киев: Здоровье, 2004. – С. 58, 122, 110-111.

Сборник заданий для подготовки к тестовому экзамену по естественно научным дисциплинам «Крок-1. Общая врачебная подготовка» / За ред. В.Ф.Москаленка и соавт. – К.: Медицина, 2004. - С.328-331.

5. Ориентировочная морфология структуры фага и его взаимодействие с бактериальной клеткой
   

^ 6. Система контрольных заданий.

Примеры тестов.

Тест Вмонтирован в хромосому клетки бактериофаг носит название:

А. интерфаг

B. лизофаг

C. профаг

D. все ответы верны

E. все ответы не верны

Ответ: C. профаг


^ 7. Краткие методические указания для работы студентов на лабораторном занятии.

Методика проведения занятия.

С целью определения титра коли-фага за Аппельманом, студенты по принципу серийных разведений переносят пипеткой по 0,5мл фага в 10 прорбирок в которых разлито по 4,5 мл МПБ. Потом во все разведения фага вносят по -2 капли зависи кишечной палочки. Учет проводят после суточного инкубирования.

^ 8. Организационная структура проведения лабораторного занятия.

№ етапа	Етап работи	Вре мя	Засоби навчання	Обладнання	Место прове-дения
1.	Организационная часть	2			Учебная лаборатория
2.	Проверка первичного уровня знаний	15	Тесты
3.	Инструктаж преподавателя. Преподаватель подчеркивает актуальность темы	10	Таблицы:
4.	Самостоятельная работа студентов.	40		Штативы по Аппельману
5.	Написание контролирующих тестов.	10	Тесты
6.	Подведение итогов, оценка деятельности каждого студент	5-10
7.	Задание для самостоятельной работы при изучении следующей темы 3	3

^ Автор: ассистент, к.м.н. Бойко В.М.


Методическая разработка

по подготовке и работе на лабораторном занятии №28

для студентов медицинского факультета


^ Тема: Вирусы гриппа, парагриппа, кори. Биологические свойства. Методы лабораторной диагностики заболеваний.

1. Актуальность темы. Вирусы гриппа, парагриппа, кори вызывают тяжелые инфекционные заболевания со склонностью к осложнениям: пневмония, энцефалит. В 40-60 % детей после иммунизации наблюдаются клинически выраженные симптомы кори (митигированная форма). Существует возможность трансплацентарной передачи вируса кори. У пациентов с выраженной клинической картиной гриппа и парагриппа диагностическое значение имеет нарастание титра антител в 4 раза. Против кори вакцинируют детей в возрасте 1 года живой вакциной. Для иммунизации против гриппа используют живую, инактивированную, химическую вакцины. Вирус гриппа имеет высокую степень изменчивости, которая усложняет разработку вакцинных препаратов.
   

2. Цели изучения темы.
   
   0. Цель общая. Усвоить методы лабораторной диагностики гриппа, парагриппа, кори.
      
   1. Цель конкретная. Уметь идентифицировать вирус гриппа; проводить учет результатов нарастания титра антител в парных сыворотках больного парагриппом; знать препараты для активной и пассивной иммунизации против гриппа.
      

3. Обеспечение исходного уровня знаний-умений.
   

3.1. Лекции „Вирусы. Общая характеристика. Биологические свойства”, „Специфическая профилактика и терапия инфекционных болезней”, „Современные методы диагностики инфекционных болезней”.

^ 3.2. Тесты на исходный уровень знаний-умений.

Пример теста.

При размножении (репродукции) вирусов его составные части (нуклеиновая кислота, вирусные белки) синтезируются в клетке отдельно и лишь потом идет сборка вирионов. Такой тип размножения носит название:

А - репродуктивный

В - дизъюнктивный

С - лизогенный

Д - спонтанный

Е - рекомбинативный

Правильный ответ: В - дизъюнктивный.

4. ^ Содержание обучения.
   

1. Граф логической структуры содержания.
   

Вирусы гриппа, парагриппа, кори

Семейство	Ortomyxoviridae - вирус гриппа Paramyxoviridae - вирусы парагриппа, кори
Морфология	Тип НК	Однониточная РНК
Форма	Сферическая
Сложность строения	Сложный
Антигенное строение	Вирус гриппа N- нейраминидаза (N1, N2) H- геагглютинины (H1, H2, H3)	^ Вирус парагриппа H, N	Вирус кори H
Методы культивирования	куриный эмбрион (вирус гриппа) культура клеток
Резистентность	Чувствительны к высушиванию, УФЛ, ультразвуку, изменению рН, дезинфектантам. Устойчивые к низким температурам.
Источник заражения	Больной человек
Механизм и пути передачи заболевания	Воздушно-капельный
Органотропность	Клетки слизистых оболочек верхних дыхательных путей, клетки органов дыхания
Иммунитет	Грипп, парагрипп - неустойчивый Корь - стойкий
Методы лабораторной диагностики	Вирусологический Серологический РИФ Риноцитоскопия
Специфическая профилактика	Противогриппозный и противокоревой гамма-глобулин Живая, инактивированная, рекомбинантная, химическая гриппозные вакцины Живая коревая вакцина
Специфическая терапия	Противогриппозный и противокоревой гамма-глобулин

2. Перечень теоретических вопросов.
   
   1. Систематическое положение, ультраструктура, антигенное строение и изменчивость вируса гриппа.
      
   2. Резистентность вируса гриппа. Методы культивирования, индикации и идентификации вируса гриппа.
      
   3. Патогенез гриппа, методы лабораторной диагностики заболевания.
      
   4. Систематическое положение, ультраструктура, антигенное строение вируса парагриппа.
      
   5. Резистентность вируса парагриппа. Методы культивирования, индикации и идентификации вируса парагриппа.
      
   6. Патогенез парагриппа, методы лабораторной диагностики заболевания.
      
   7. Систематическое положение, ультраструктура, антигенное строение вируса кори.
      
   8. Резистентность вируса кори. Методы культивирования, индикации и идентификации вируса кори.
      
   9. Патогенез кори, методы лабораторной диагностики заболевания.
      
   10. Препараты для лечения и специфической профилактики гриппа и кори.
       

3. Источники учебной информации.
   

Литература основная.

К. Д. Пяткин, Ю. С. Кривошеин. Микробиология, М., 1980. - С. 406-411, 413-415.

В. Д. Тимаков. Микробиология, М., 1983. - С. 403-413.

А. И. Коротяев, С. А. Бабичев. Медицинская микробиология, иммунология и вирусология. С.-Петербург, 2002. - С. 263-269, 271-273.

И. Л. Дикий и соавт. Микробиология, Харьков, 1999. - С. 348-354.

Л. Б. Борисов. Руководство к практическим занятиям по микробиологии, М., 1984. - С. 229-239.

Ю. С. Кривошеин. Руководство к практическим занятиям по медицинской микробиологии, М., 1986. - С. 221-225.

М. Н. Лебедева. Руководство к практическим занятиям по медицинской микробиологии, М., 1973. - С. 232-235, 261.

Литература дополнительная.

Микробиология, вирусология, иммунология, инфекционные болезни. Словарь/ Под ред Г.К.Палия, В.Г.Палия. - Киев: Здоровье, 2004.

Сборник задач для подготовки к тестового экзамену по естественно-научным дисциплинам «Крок-1. Общая врачебная подготовка» /Кол.авторов; Под ред. В.Ф.Москаленка и соавт. - К.:Медицина, 2004. - С.328-331.

4. Ориентировочная основа действия.
   

Граф логической структуры лабораторного исследования гриппа и парагриппа.

Материал для исследования: смыв из носоглотки, кровь, секционный материал.

Вирусологическое исследование

• Заражение куриных эмбрионов (вирус гриппа)
  
• Заражение культуры клеток
  

• индикация: бляшкообразование на ХАО, капилляротоксикоз, ЦПД (вирус гриппа), РГА, РГадс (вирусы гриппа и прагриппа)
  
• идентификация: РТГА, РТГАдс, РН, РИФ
  

Серологическое исследование

Выявление титра антител в парных сыворотках больного с помощью РТГА, РН, РСК.

Биологический метод (грипп)

• заражение белых мышей или хомяков
  

• индикация вируса по изменениям в трахеях, бронхах, легких, РГА
  
• идентификация вируса в РТГА, РН
  

Экспресс-диагностика

• РИФ
  
• Риноцитоскопия
  

Граф логической структуры лабораторного исследования кори.

Материал для исследования: смывы из носоглотки, кровь, моча, секционный материал.

Вирусологическое исследование

• Заражение культур клеток
  

• индикация: ЦПД (симпластообразование), РГА
  
• идентификация: РН, РТГА, РСК
  

Серологическое исследование

• РТГА, РСК
  

Экспресс-диагностика

• РИФ
  

4. Система целевых обучающих задач.
   

Примеры тестов.

Вирус кори принадлежит к семейству:

А. Orthomyxoviridae

B. Paramyxoviridae

C. Togaviridae

D. Rinoviridae

E. Adenoviridae

Ответ: В – Paramyxoviridae

4. Короткие методические указания для работы студентов на лабораторном занятии.
   
   1. Методика проведения занятия.
      

1. Для серотипирования вируса гриппа ставят РТГА капельним методом. На предметные стекла наносят 5 капель смыва из носоглотки больного. Прибавляют по капле типоспецифические антигриппозные сыворотки N1H1, N2H2 и нормальную сыворотку для контроля. Потом в каждую каплю прибавляют по 1 капле взвеси куриных эритроцитов. Результаты учитывают через 2-5 мин. Тип вируса отвечает той диагностической сыворотке, в присутствии которой происходит торможение гемагглютинации. Другие сыворотки, в частности нормальная, не тормозят агглютинацию эритроцитов.
   
2. Студенты учитывают результаты РТГА в демонстрационном опыте для выявления титра противогриппозных антител в парных сыворотках больного.
   

^ Разведение сыворотки	1:10	1:20	1:40	1:80	1:160	1:320	1:640
Начало заболевания
N1H1
N2H2
Через 7 дней
N1H1
N2H2

3. Студенты учитывают результаты РСК в демонстрационном опыте для выявления титра противопарагриппозных антител в парных сыворотках больного.

^ Разведение сыворотки	1:10	1:20	1:40	1:80
Начало заболевания
I
II
Через 5 дней
I
II

4.Студенты в протокол записывают сведения о диагностических, терапевтических и профилактических препаратах, которые применяют при гриппе, парагриппе, кори.

5. Студенты записывают в протокольную тетрадь сроки плановой вакцинации против кори.
   

4. ^ Организационная структура проведения лабораторного занятия.
   

№ этапа	Этап работы	Вре-мя (мин)	Средства обучения	Оборудование	Место прове-дення
1.	Организационная часть	2			Учебная лаборатория
2.	Проверка первичного уровня знаний	15	Тестовые задачи
3.	Инструктаж преподавателя. 1) Объясняет методику постановки РТГА для установления типа вируса гриппа. 2) Объясняет задание для проведения учета результатов демонстрационной РТГА с парными сыворотками больного гриппом. 3) Объясняет задание для проведения учета результатов РСК с парными сыворотками больного парагриппом. 4) Демонстрирует профилактические, лечебные, диагностические препараты, которые применяют при гриппе, парагриппе, кори.	10	Таблицы: Схема строения вируса гриппа. Лабораторная диагностика гриппа и парагриппа. Строение вириона гриппа и парагриппа. Классификация вирусов человека. Результаты взаимодействия вируса с клеткой. Вакцины, сывороточные и лечебные препараты.
4.	Самостоятельная работа студентов.	40		Типовые антигриппозные сыворотки N1H1, N2H2, нормальная сыворотка, смыв из носоглотки, 5% взвесь куриных эритроцитов, пипетки, предметные стекла, посуда с дезинфицирующим раствором - 1:2 Планшеты с результатами РТГА - 1:4 Пробирки в штативах с результатами РСК - 1:4
5.	Написание контролирующих тестов.	10	Тестовые задачи
6.	Подведение итогов, оценка деятельности каждого студента	5-10
7.	Задание для самостоятельной работы при изучении следующей темы	3

^ Автор: доцент, к.б.н. А.В.Крижановськая


Методическая разработка

по подготовке и работе на лабораторном занятии №29

для студентов медицинского факультета

^ Тема: Вирусы полиомиелита, ЕСНО, Коксаки. Биологические свойства. Методы лабораторной диагностики заболеваний.

6. Актуальность темы. Основное количество случаев заболеваемости на полиомиелит, ЕСНО, Коксаки приходится на детей. Важное значение в предупреждении заболевания имеет вакцинация против полиомиелита, разрыв путей передачи заболевания.
   
7. Цели изучения темы.
   
   0. Цель общая. Ознакомиться с методами вирусологической диагностики полиомиелита, ЕСНО, Коксаки.
      
   1. Цель конкретная. Студенты должны знать принципы микробиологической диагностики энтеровирусных инфекций, уметь проводить учет результатов „цветной пробы”, ЦПД вируса на культуре клеток, реакции нейтрализации цветной пробы; знать преимущества и недостатки живой и инактивированной вакцин против полиомиелита, календарь прививок против полиомиелита.
      
8. Обеспечение исходного уровня знаний-умений.
   

3.1. Лекции „Вирусы. Общая характеристика. Биологические свойства”, „Специфическая профилактика и терапия инфекционных болезней”, „Современные методы исследования инфекционных болезней”.

^ 3.2. Тесты на исходный уровень знаний-умений.

Пример теста.

Перед заражением культуры клеток врач-лаборант обработал исследуемый материал пенициллином и стрептомицином. Какой возбудитель планируется выделить от больного?

А. Бактерии

В. Грибы

С. Риккетсии

Д. Вирусы

Е. Простейшие

Правильный ответ: Д – вирусы

9. ^ Содержание обучения.
   
   0. Граф логической структуры содержания.
      

Вирусы полиомиелита, ЕСНО, Коксаки

Семейство	Picornaviridae
Морфология	Тип НК	Однониточная РНК
Форма	Многогранник
Сложность строения	Простой
Антигенное строение	Вирус полиомиелита - серовары I, II, III Вирусы ЕСНО - 31 серотип Вирусы Коксаки А - 23 серотипа Вирусы Коксаки В - 6 серотипов
Методы культивирования	Культура клеток фибробластов, HeLa
Резистентность	Устойчивые к детергентам, спиртам Чувствительны к альдегидам, соединениям хлора, фенола, УФЛ, высушиванию
Источник заражения	Больной человек, носитель
Механизм и пути передачи заболевания	Фекально-оральный механизм Алиментарный путь
Органотропность	Энтероциты, лимфоидный аппарат тонкого кишечника, мотонейроны головного и спинного мозга
Иммунитет	Типоспецифический
Методы лабораторной диагностики	Вирусологический Серологический РИФ
Специфическая профилактика	Полиомиелита: Живая вакцина Сейбина Инактивированная вакцина Солка
Терапия	Интерферон, иммуноглобулин

0. Перечень теоретических вопросов.
   
   0. Классификация пикорнавирусов. Морфология и антигенная структура вирусов полиомиелита, ЕСНО, Коксаки.
      
   1. Резистентность, методы культивирования вирусов полиомиелита, ЕСНО, Коксаки.
      
   2. Патогенез полиомиелита, ЕСНО, Коксаки.
      
   3. Методы лабораторной диагностики заболеваний.
      
   4. Профилактика заболеваний: неспецифичная, препараты для специфической профилактики полиомиелита.
      
1. Источника учебной информации.
   

Литература основная.

К. Д. Пяткин, Ю. С. Кривошеин. Микробиология, М., 1980. - С. 418-423.

В. Д. Тимаков. Микробиология, М., 1983. - С. 388-393.

А. И. Коротяев, С. А. Бабичев. Медицинская микробиология, иммунология и вирусология. С.-Петербург, 2002. - С. 278-284.

И. Л. Дикий и соавт. Микробиология, Харьков, 1999. - С. 361-369.

Л. Б. Борисов. Руководство к практическим занятиям по микробиологии, М., 1984. - С. 264-248.

Ю. С. Кривошеин. Руководство к практическим занятиям по медицинской микробиологии, М., 1986. - С. 238-245.

М. Н. Лебедева. Руководство к практическим занятиям по медицинской микробиологии, М., 1973. - С. 236-239, 260.

Литература дополнительная.

Микробиология, вирусология, иммунология, инфекционные болезни. Словарь/ Под ред Г.К.Палия, В.Г.Палия. - Киев: Здоровье, 2004.

Сборник задач для подготовки к тестового экзамену по естественно-научным дисциплинам «Крок-1. Общая врачебная подготовка» /Кол.авторов; Под ред. В.Ф.Москаленка и соавт. - К.:Медицина, 2004. - С.328-331.

10. Ориентировочная основа действия.
    

Граф логической структуры лабораторного исследования полиомиелита, ЕСНО и Коксаки

Материал для исследования: фекалии, ликвор, кровь, моча, секционный материал.

Вирусологическое исследование

1. Культивирование вирусов: заражение культуры клеток HeLa (вирусы полиомиелита, ЕСНО, Коксаки), белых мышей (вирусы Коксаки).
   
2. Индикация вирусов по ЦПД, бляшкообразованию, „цветной” пробе, спастическому параличу и смерти мышей.
   
3. Идентификация вирусов в РСК, РН в культуре клеток или на новорожденных мышах.
   

Серологическое исследование

Выявление титра антител в парных сыворотках с помощью РСК, РН.

Экспресс-диагностика

РИФ, иммунная электронная микроскопия

11. ^ Система целевых обучающих задач.
    

Примеры тестов.

У больного ребенка из испражнений выделены вирусы ЕСНО. К какому семейству они принадлежат?

А. Ortomyxoviridae

B. Picornaviridae

C. Coronaviridae

D. Herpesviridae

E. Retroviridae

Ответ: B. Picornaviridae


^ 7. Короткие методические указания для работы студентов на лабораторном занятии.

1. Методика проведения занятия.
   

1. Микроскопия и зарисовка неизмененной культуры клеток и ЦПД вируса полиомиелита.
   
2. Учет результатов РН методом „цветной” пробы для идентификации вируса полиомиелита.
   

№ пробирки	Компоненты для постановки реакции	Рисунок
1	Культура клеток в среде 199	Сыворотка пациента	Вирус типа І
2	Культура клеток в среде 199	Сыворотка пациента	Вирус типа ІІ
3	Культура клеток в среде 199	Сыворотка пациента	Вирус типа ІІІ

3. Учесть результаты РН методом „цветной” пробы для установления титра антител в сыворотке крови больного полиомиелитом.

^ Разведение сыворотки
1:4	1:8	1:16	1:32	1:64

4. Учесть результаты РСК. Определить титр антител в парных сыворотках больного полиомиелитом.
   

^ Тип вируса	Разведение сыворотки
1:5	1:10	1:20	1:40	1:80	1:160
Начало заболевания
І
ІІ
10-и день заболевания
І
ІІ

5. Познакомиться с препаратами для профилактики и диагностики полиомиелита, ЕСНО, Коксаки.

7. ^ Организационная структура проведения лабораторного занятия.
   

№ этапа	Этап работы	Время (мин)	Средства обучения	Оборудование	Место прове-дення
1.	Организационная часть	2			Учебная лаборатория
2.	Проверка первичного уровня знаний	15	Тестовые задачи
3.	Инструктаж преподавателя. 1) Демонстрация культуры клеток и ЦПД вируса полиомиелита с помощью микроскопа. 2) Объясняет задание для проведения учета результатов демонстрационной РН для идентификации вируса полиомиелита. 3) Объясняет задание для проведения учета результатов РН с сывороткой больного полиомиелитом. 4) Объясняет задание для проведения учета результатов РСК с парными сыворотками больного полиомиелитом. 5) Демонстрирует профилактические, диагностические препараты, которые применяют при полиомиелите, ЕНСО, Коксаки. 6) Объясняет преимущества и недостатки живой и инактивированной вакцин для профилактики полиомиелита.	10	Таблицы: Лабораторная диагностика энтеровирусных инфекций. Видимые проявления вирусов в культуре клеток. Схема постановки РСК.
4.	Самостоятельная работа студентов.	40		1.Демонстрационные препараты культуры клеток и ЦПД вируса полиомиелита. 2. Пробирки с результатами РН для идентификации вируса полиомиелита - 1:4 3. Пробирки в штативах с результатами РН - 1:4 4. Пробирки в штативах с результатами РСК - 1:4
5.	Написание контролирующих тестов.	10	Тестовые задачи
6.	Подведение итогов, оценка деятельности каждого студента	5-10
7.	Задача для самостоятельной работы при изучении следующей темы	3