Методическая разработка по подготовке и работе на лабораторном занятии №21 для студентов медицинского факультета Тема: Специфическая профилактика и терапия инфекционных заболеваний. Сыворотки и иммуноглобулины

Вид материала

Методическая разработка

Содержание Методическая разработка 1. Актуальность темы. 3.2. Тесты на исходный уровень знаний-умений. Характеристика возбудителей вирусных гепатитов Picorna- viridae Краткие методические указания для работы студентов на лабораторном занятии. Разведение сыворотки Разведение сыворотки Организационная структура проведения лабораторного занятия.

Подобный материал:

• Методическая разработка по подготовке и работе на лабораторном занятии №11 для студентов, 777.95kb.
• Методическая разработка по подготовке и работе на лабораторном занятии №31 для студентов, 622.65kb.
• Методическая разработка по подготовке лабораторного занятия №41 для студентов медицинского, 1130.19kb.
• Календарный план лекций по микробиологии, вирусологии и иммунологии для студентов, 23.61kb.
• Методическая разработка по хирургии для студентов IV курса медицинского факультета, 42.2kb.
• Методическая разработка по хирургии для студентов IV курса медицинского факультета, 67.29kb.
• Темы лекций по циклу «поликлиническая терапия» для студентов 6 курса лечебного факультета, 9.89kb.
• Тематические планы лекций Темы лекций по терапевтической стоматологии для студентов, 733.5kb.
• План лабораторных занятий по микробиологии для студентов 3 курса лечебного факультета,, 392.08kb.
• Шульга Наталья Григорьевна, мастер, 33.95kb.

Автор: доцент, к.б.н. А.В.Крижановская


^ Методическая разработка

по подготовке и работе на лабораторном занятии №30

для студентов медицинского факультета

Тема: Вирусы гепатитов. Биологические свойства. Методы лабораторной диагностики заболеваний.

^ 1. Актуальность темы. Проблема заболеваемости вирусными гепатитами чрезвычайно актуальна сегодня, так как возбудители служат причиной массовые заболеваний на всех континентах. Ежегодно регистрируют приблизительно 350 случаев заболевания на 100 тыс. население. Сейчас описано и изучено 9 видов вирусов гепатитов, которые принадлежат к разным семействам. Наиболее полно изучены вирусы гепатитов А и В.

2. Цели изучения темы.
   
   0. Цель общая. Ознакомиться с методами микробиологической диагностики гепатитов.
      
   1. Цель конкретная. Знать дифференциальные признаки вирусов гепатитов; уметь объяснить принципы постановки иммуноферментного анализа (ИФА) с целью выявления антигенов вирусов в исследуемом материале.
      
3. Обеспечение исходного уровня знаний-умений.
   

3.1. Лекции «Вирусы. Общая характеристика. Биологические свойства”, „Современные методы диагностики инфекционных болезней”.

^ 3.2. Тесты на исходный уровень знаний-умений.

Пример теста.

Защита организма от возбудителей инфекционных болезней обеспечивается неспецифичными и специфическими факторами иммунитета. Определите факторы, которые характерные для противовирусного иммунитета.

А. Ингибиторы ферментов агрессии

В. Интерферон, секреторные иммуноглобулины А

С. Нормальные антитела

Д. Реагины

Е. Специфические антитела-антитоксины

Правильный ответ: В. Интерферон, секреторные иммуноглобулины А.

2. Содержание обучения.
   
   0. Граф логической структуры содержания.
      

^ ХАРАКТЕРИСТИКА ВОЗБУДИТЕЛЕЙ ВИРУСНЫХ ГЕПАТИТОВ

	вга	вгв	bгс	вгд	вге	ВГF	ВГG
Семейство	^ Picorna- viridae	Hepadna- viridae	Flaviviridae	Дефектный рибозим	Сalici-viridae	Аdeno-viridae	Flaviviridae
Размеры (нм)	27	42	30-60	35	30-32	50-100	40-50
Форма	Икосаедр	Сферичес- кий	Сферичес-кий	Сферичес-кий	Икосаедр	Икосаедр	Сфери-ческий
Геном	Рнк	днк	рнк	рнк	рнк	днк	Рнк
Вирион	простой	сложный	сложный	сложный	простой	простой	сложный
Резистент- ность	Стойкий к кислотам, дезрастворам, t0 (90)	Стойкий к t0 (120), чувствителен к кислотам	Чувстви-телен к эфиру, кислотам	Чувстви-телен к кислотам	Чувстви-телен к перепаду температур	Стойкий к кислотам	Стойкий к T0 (90)
Механизм передачи	фекально-оральный	паренте- ральный	паренте-ральный	паренте-ральный	фекально-оральный	фекально-оральный	паренте- ральний
Распро-стра-нение	Сезонное	Везде	Везде	Эпидемии-ческое	Эпидемии-ческое	Споради-ческое	Эпидемии-ческое
Форма инфекции	Острая	Хроническая	Хроничес-кая	Хроничес-кая	Острая	Острая	Хрони-ческая
Степень тяжести	Легкая	Средняя	Легкая	Тяжелая	Легкая	Легкая	Средняя
Онкогенные свойства	Нет	Есть	Есть	Есть	Нет	Нет	Есть

0. Перечень теоретических вопросов.
   
   0. Классификация вирусов гепатитов. Их дифференциальные признаки.
      
   1. Ультраструктура, антигенное строение и резистентность вируса гепатита А.
      
   2. Патогенез вирусного эпидемического гепатита.
      
   3. Ультраструктура, антигенное строение и резистентность вируса гепатита В.
      
   4. Патогенез вирусного эпидемического гепатита.
      
   5. Методы лабораторной диагностики вирусных гепатитов.
      
   6. Профилактика вирусных гепатитов.
      
1. Источника учебной информации.
   

Литература основная.

А. И. Коротяев, С. А. Бабичев. Медицинская микробиология, иммунология и вирусология. С.-Петербург, 2002. - С. 286-295.

И. Л. Дикий и соавт. Микробиология, Харьков, 1999. - С. 356-361, 387-391.

Л. Б. Борисов. Руководство к практическим занятиям по микробиологии, М., 1984. - С. 246-248.

Ю. С. Кривошеин. Руководство к практическим занятиям по медицинской микробиологии, М., 1986. - С. 245-248.

Литература дополнительная.

Микробиология, вирусология, иммунология, инфекционные болезни. Словарь/ Под ред Г.К.Палия, В.К.Палия. - Киев: Здоровье, 2004.

Сборник задач для подготовки к тестовому экзамену по естественно-научным дисциплинам «Крок-1. Общая врачебная подготовка» /Кол.авторов; под ред. В.Ф.Москаленка и соавт. - К.:Медицина, 2004. - С.328-331.

2. Ориентировочная основа действия.
   

Граф логической структуры микробиологического исследования гепатитов

Материал для исследования: сыворотка крови, испражнения.

1. Выявление вирусов - иммунная электронная микроскопия
   
2. Выявление антигенов вирусов - ИФА, РИА.
   
3. Выявление антител - РНГА, ИФА, РИА.
   
4. Выявление генетического материала вирусов - ПЦР.
   

2. Система целевых обучающих задач.
   

Примеры тестов.

К вирусам гепатитов, которые содержат РНК принадлежат:

А. Вирус гепатита А, дельта-вирус

В. Вирусы гепатитов F и D

С. Вирусы гепатитов А и В

Д. Вирусы гепатита G и TT-вирус

Е. Вирусы гепатита В и Sen-вирус

Ответ: А - Вирус гепатита А, дельта-вирус

2. ^ Краткие методические указания для работы студентов на лабораторном занятии.
   

Методика проведения занятия.

1. Ознакомиться с принципом постановки ИФА с целью выявления специфических антигенов в сыворотке крови больного. На занятии в качестве твердофазного носителя используют планшеты с адсорбированными на дне лунок антителами. У лунки вносят по 1 капле исследуемой сыворотки и помещают планшеты в термостат при t 37 ⁰C. Промывают луночки буферным раствором и вносят меченые ферментом (пероксидазой) антитела против этого антигена (прямой вариант). Планшеты помещают в термостат при t 37 ⁰C. Промывают луночки буферным раствором, вносят по 1 капле перекиси водорода и ортофенилдиамина (ОФД). Планшеты помещают в термостат до появления желтой окраски в лунке с контролем. Количество присоединенного к твердой фазе энзима соответствует количеству антигенов. При наличии в исследуемой сыворотке антигенов вируса в лунках изменяется цвет жидкости на желтый или на желто-коричневый (результат положительный). В лунках с сывороткой, которая не содержит антигенов вирусов, цвет жидкости не изменяется (результат отрицательный). Зарисовать схему реакции.
   
2. Познакомиться с принципом постановки реакции гибридизации нуклеиновых кислот. Целью метода является выявление в исследуемом материале участков ДНК, характерные для данного возбудителя. Для этого используют их гибридизацию с диагностическими ДНК-зондами. ДНК-зонды - это однониточные фрагменты ДНК (комплементарные к специфическим участкам ДНК возбудителя), меченные радионуклидами, ферментами или флуорохромами. Схему реакции зарисовать.
   
3. Провести учет результатов реакции связывания комплемента, поставленную с сывороткой больного гепатитом А.
   

   ^ Разведение сыворотки
   1:5	1:10	1:20	1:40	1:80	1:160

4. Провести учет результатов реакции пассивной гемагглютинации, поставленную с сывороткой больного хроническим гепатитом В и эритроцитами, нагруженными HBsAg.
   

   ^ Разведение сыворотки
   1:5	1:10	1:20	1:40	1:80	1:160
   Начало заболевания
   Через 7 дней

5. Записать препараты для профилактики гепатитов А и В план прививок против гепатита В.
   

2. ^ Организационная структура проведения лабораторного занятия.
   

№ этапа	Этап работы	Время (мин)	Средства обучения	Оборудование	Место прове-дення
1.	Организационная часть	2			Учебная лаборатория
2.	Проверка первичного уровня знаний	15	Тестовые задачи
3.	Инструктаж преподавателя. Преподаватель подчеркивает актуальность темы. Знакомит с принципом постановки ИФА, РИА, гибридизации нуклетновых кислот. Знакомит с календарем прививок против гепатита В и препаратами для профилактики гепатитов А и В. Демонстрирует РСК, поставленную с сывороткой больного гепатитом А. Демонстрирует РПГА, поставленную с парными сыворотками больного хроническим гепатитом В.	10	Таблицы: Ультраструктура вируса гепатита В. Дифференциальные признаки вирусов гепатитов. Схема постановки ИФА. Схема постановки реакции гибридизации нуклеиновых кислот.
4.	Самостоятельная работа студентов.	40		Планшеты с демонстрацией результатов ИФА (положительные и отрицательные результаты) (1 на группу) Штативы с результатами РСК (1:4). Планшеты с результатами РПГА (1:4).
5.	Написание контролирующих тестов.	10	Тестовые задачи
6.	Подведение итогов, оценка деятельности каждого студента	5-10
7.	Задача для самостоятельной работы при изучении следующей темы	3

Автор: доцент, к.б.н. А.В.Крижановская