Влияние адаптации к периодической барокамерной гипоксии на липидный спектр сыворотки крови и состояние процессов перекисной модификации липидов и белков у больных инфарктом миокарда на амбулаторно-поликлиническом этапе реабилитации 14. 01. 05 Кардиология
| Вид материала | Автореферат |
- Клинико-функциональное обоснование применения лечебных физических факторов убольных, 395.16kb.
- На санаторном этапе, 310.13kb.
- Низкоинтенсивная лазерная терапия в комплексном восстановительном лечении больных,, 846.06kb.
- Гемодинамически независимые эффекты ингибиторов апф у больных инфарктом миокарда 14., 311.05kb.
- Е. Н. Ющук общая характеристика работы, 412.13kb.
- Результаты хирургического лечения постинфарктных разрывов миокарда левого желудочка, 83.68kb.
- Маркеры неблагоприятного прогноза у больных острым инфарктом миокарда с подъемом сегмента, 647.49kb.
- «Исследование эффективности применения дигидрокверцетина в комплексных программах медицинской, 72.17kb.
- Особенности структурно-функциональных изменений миокарда и нарушения сердечного ритма, 287.4kb.
- Системные биомаркеры сыворотки крови у больных хронической обструктивной болезнью легких, 303.23kb.
Апробация работы
Материалы диссертации представлены и обсуждены на Всероссийской научной конференции с международным участием «Актуальные проблемы профилактики неинфекционных заболеваний» (Москва, 2003), Конгрессе ассоциации кардиологов стран СНГ «Фундаментальные исследования и прогресс в кардиологии» (Санкт-Петербург, 2003), Российской научной конференции с международным участием «Реабилитация и вторичная профилактика в кардиологии», посвященной 40-летию советской и Российской кардиологической реабилитации (Москва, 2009).
По теме исследования опубликовано 8 научных работ, среди которых 2 статьи, 1 из которых - в журнале, рекомендованном ВАК.
Структура и объем диссертации
Работа изложена на 160 страницах машинописного текста, иллюстрирована 10 рисунками и 20 таблицами. Диссертация состоит из введения, обзора литературы, главы наблюдаемых больных и методов исследования, двух глав результатов собственных исследований, заключения, выводов, практических рекомендаций. Библиографический указатель включает 253 источника, из них 185 отечественных и 68 иностранных авторов.
Работа выполнена на кафедрах сестринского дела и биохимии Государственного образовательного учреждения высшего профессионального образования «Оренбургская государственная медицинская академия Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию РФ» на базе отделения восстановительного лечения Оренбургской областной клинической больницы №2.
СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫ
Объект и методы исследования
Обследовано 122 мужчины с инфарктом миокарда в возрасте от 29 до 65 лет. Критерии включения в исследование: срок ИМ от 2 до 4 месяцев, прохождение пациентами после стационарного этапа реабилитации курс лечения в местном санатории. Больные с кардиомегалией и клиническими проявлениями сердечной недостаточности выше IIА стадии по классификации Василенко В.Х. и Стражеско Н.Д. в исследование не включались. Для постановки диагноза использовали классификацию ишемической болезни сердца согласно рекомендациям по диагностике и лечению стабильной стенокардии (2006) и классификацию клинических форм ИМ [Сыркин А.М., 2003]. Все больные при наличии соответствующих показаний и в общепринятых дозировках получали антиангинальные препараты (бета-блокаторы, нитраты), дезагреганты (аспирин, тиклид), статины, ИАПФ и др.
Пациенты были разделены на 2 группы: основную и контрольную. В контрольную группу вошли больные с ИМ, которые после санаторного этапа реабилитации в кардиологическом отделении больницы восстановительного лечения поступали под наблюдение кардиолога отделения восстановительного лечения ООКБ № 2, где проходили курс реабилитации с применением метода дозированных физических нагрузок в соответствии с Рекомендациями МЗ РСФСР (1996). Пациентам основной группы в качестве метода реабилитации применяли курс адаптации к периодической гипоксии в барокамере «Урал-1».
У обследованных пациентов основной группы имелись сопутствующие заболевания: артериальная гипертония (в 61% случаев), хронический бронхит (20%), хронически гастрит и язвенная болезнь желудка и 12-перстной кишки (29%), ожирение (23%), сахарный диабет (в 7% случаев).
Основная и контрольная группы были рандомизированы по полу, возрасту, основной и сопутствующей патологии.
Допуск к бароадаптации осуществляла специальная отборочная комиссия согласно методическим рекомендациям МЗ РСФСР (1989). Реабилитация больных ИМ указанным методом проводилась на основании письменного разрешения Республиканской проблемной комиссии «Недостаточность кровообращения и нарушения ритма сердца» о целесообразности применения методов гипоксической терапии у больных инфарктом миокарда N 23-3/61 от 03.04.01 г. и заключения этического комитета ООКБ №2 от 20 апреля 2001 г. Для этого использовалась первая отечественная медицинская вакуумная установка - барокамера «Урал-1», построенная на базе Оренбургской областной клинической больницы №2 на основе медико-технического задания, совместно разработанного НИИ общей патологии и патологической физиологии АМН СССР и Оренбургским медицинским институтом в НПО Криогенмаш [Меерсон Ф.З., 1987].
Методика адаптации к периодической барокамерной гипоксии была разработана в результате всесторонних исследований [Меерсон Ф.З. и соавт., 1989, Алешин И.А. и соавт., 1993, Тиньков А.Н., 1999, Прокофьев А.Б., 2005] и включала 22 трехчасовых сеанса на «высоте» 3500 м (460 мм рт.ст.), проводимых ежедневно, кроме трех выходных дней и двух технических. Первые сеансы проводились с постепенным увеличением высоты, начиная с 1000 м и далее, прибавляя ежедневно по 500 м до достижения максимальной «высоты» (3500 м). Скорость «подъема» и «спуска» составляла 2-3 м/с.
Оценка клинического статуса исследуемых больных и лабораторно-инструментальные исследования проводились у больных до и после курса лечения (через 4 недели). Оценивалась динамика частоты, продолжительности и интенсивности ангинозных приступов, а также жалоб больных на перебои в работе сердца, сердцебиение, одышку. За 2 недели до и в течение периода наблюдения пациенты не принимали гипохолестеринемических средств, но соблюдали диету.
Для изучения транспорта кислорода на микроциркуляторном уровне использовали чрескожный метод определения парциального давления кислорода с помощью электрода Кларка на аппарате ТСМ-2 фирмы «Radiometer» (Дания).
Велоэргометрическая проба проводилась сидя по методике ВОЗ на велоэргометре «Shiller» (Швейцария), при непрерывно-возрастающей ступенчатой нагрузке под контролем АД, пульса и с записью ЭКГ в отведениях «anterior», «inferior» и «dorsales» по Небу на многоканальном электрокардиографе «Shiller» (Швейцария).
Содержание общего холестерина (ОХС), триглицеридов (ТГ), холестерина липопротеидов высокой плотности (ХС ЛПВП) определяли ферментативным способом на автоматическом биохимическом анализаторе «Cobas integra 400 plus» (Швейцария-Германия). Содержание холестерина липопротеинов очень низкой плотности (ХС ЛОНП) рассчитывали по формуле: ХС ЛОНП = ТГ/2,2, в ммоль/л. Уровень холестерина липопротеинов низкой плотности (ХС ЛНП) рассчитывали по формуле Friedevald (1972): ХС ЛНП = общий ХС – ТГ/2,2 – ХС ЛВП, ммоль/л.
Контроль качества при выполнении исследований осуществляли с параллельной оценкой двух контрольных сывороток Precinorm U и Precipath U фирмы «Cobas integra» (Швейцария-Германия). Наличие нарушений липидного обмена устанавливали при уровнях общего холестерина > 5,2 ммоль/л, ТГ > 2,0 ммоль/л, ХС ЛВП < 1,0 ммоль/л, ХС ЛНП > 3,4 ммоль/л, а также при наличии повышенного (> 3,5) холестеринового коэффициента атерогенности: КА = ХС ЛНП/ХС ЛВП [Руководство по лабораторным методам диагностики, 2007].
Дополнительно в плазме крови определяли концентрацию неэтерифицированных жирных кислот (НЭЖК) по методу W.G. Duncombe (1964), в модификации И.А. Волчегорского (2000). На том же анализаторе определяли содержание апоА-I, апоВ, апоС-III и апоЕ по реакции преципитации со специфической антисывороткой турбодиметрическим методом при 340 нм. Контроль качества проводили контрольной антисывороткой Т (овечьей) к человеческому апоА-I, апоВ, апоС-III и апоЕ соответственно.
Фракционное разделение ЛП на ЛВП-содержащий супернатант и осадок, содержащий апоВ-ЛП, осуществляли с помощью реакции преципитации по классической технологии в модификации И.А. Волчегорского (2003). Осадок однократно промывали 0,9% раствором NaCl и затем ресуспендировали.
В ЛВП-содержащем супернатанте определяли содержание фосфолипидов (ФЛ) колориметрическим методом с помощью диагностического набора («Chronolab», Швейцария) на спектрофотометре “APEL” PD-303UV (Япония).
Для оценки состояния процессов ПОЛ в супернатанте, содержащем ЛВП и осадке, содержащем апоВ-липопротеины (ЛОНП и ЛНП) определяли спектрофотометрически продукты ПОЛ с раздельной регистрацией липопероксидов в гептановой и изопропанольной фазах липидного экстракта по методу И.А. Волчегорского (2000). Спектрофотометрию каждой фазы липидного экстракта проводили при 220, 232 и 278 нм против соответствующего оптического контроля с расчетом единиц индексов окисления (ЕИО), отражающих относительный уровень первичных ЕИО232/220 (уровень диеновых коньюгатов) и вторичных - ЕИО278/220 (уровень кетодиенов и сопряженных триенов) продуктов окисления.
Окислительную модификацию аполипопротеинов оценивали по уровню образования динитрофенилгидразонов по методу Е.Е. Дубининой (1995). Степень окислительной модификации АпоЛП определяли измерением оптической плотности образовавшихся динитрофенилгидразонов при длине волны 270 нм (альдегидфенилгидразонов - АФГ) и 363 нм (кетонфенилгидразонов - КФГ) на спектрофотометре “APEL” PD-303UV (Япония). Результаты выражали в единицах оптической плотности на 1 мг АпоЛП ЛВП и апоВ-содержащих ЛП. Для определения концентрации белка в каждой подфракции липопротеиновых частиц использовали общепринятый метод Лоури [Досон Р., Элиот Д., 1991].
Степень окисления АпоЛП в составе ЛП также оценивали по содержанию SH-групп. Число сульфгидрильных групп определяли с помощью реактива Эллмана (5,5-дитиобис-2-нитробензойная кислота) по реакции тиол-дисульфидного обмена в щелочной среде колориметрическим методом [Северин Е.С., 1989]. В качестве контроля использовали раствор реактива Эллмана, но не содержащий белка. Расчет концентраций SH-групп рассчитывали по разности оптических плотностей, с использование коэффициента молярной экстинкции, равный 14000 М-1 · см-1 (при длине волны 412 нм).
О степени десиалирования АпоЛП судили по содержанию сиаловых кислот в ЛП. Уровень сиаловых кислот определяли колориметрическим методом с помощью диагностического набора «Сиалотест» (Россия) при длине волны 540 нм.
С целью оценки степени фрагментации окисленных АпоЛП разных подфракций ЛП использовали метод S.P. Wolff (1986). Кислоторастворимые пептиды определяли в ультрафиолетовой области спектров при длинах волн 254, 272 и 280 нм. Степень фрагментации окисленных АпоЛП выражали в единицах оптической плотности.
Результаты исследований вносились в базу данных и затем подвергались статистической обработке с помощью пакета прикладных статистических программ Statistica 6.1. Достоверность различий рассчитывали по парному критерию t Стьюдента для зависимых выборок, Z Вилкоксона. Различия опытной и контрольной групп определялись критерием t Стьюдента для независимых групп. Анализ зависимостей проводился путем определения коэффициента корреляции Пирсона и коэффициента ранговой корреляции Спирмена. Различия считали достоверными при р<0,05. Полученные результаты представлены в виде средней ± стандартное отклонение (стандартная ошибка средней) [Гланц С., 1999, Фадеев В.В., 2002].
Результаты исследования и их обсуждение
В процессе АПБГ на организм больных действовали два основных фактора: пониженное барометрическое давление и снижение парциального давления кислорода во вдыхаемом воздухе. Установлено, что в процессе достижения больными «плато» («высоты» 3500 м) барометрическое давление снижалось с 759±1,1 до 467±2,1 мм.рт.ст. (р<0,001). Параллельно у больных ИМ парциальное давление кислорода капиллярной крови, тестируемое транскутанным методом, снижалось с 72±3,2 до 40±2,6 мм. рт.ст. (р<0,001), что свидетельствует о развитии артериальной гипоксемии периферических тканей. При этом уровень гипоксемии периферических тканей, фиксируемый у пациентов, не приближался к критическим цифрам (35 мм. рт. ст. и ниже), при которых эффективность сеансов гипокситерапии считается сомнительной (Колчинская А.З., 1994).
Клиническая эффективность гипокситерапии у обследуемых лиц определялась уменьшением или исчезновением ангинозных жалоб, а также редукцией неспецифических симптомов (загрудинные боли при выполнении нагрузок, перебои в работе сердца, сердцебиение, одышка, утомляемость).
Основные показатели липидного статуса до и после лечения и представлены в таблице 1.
Курс АПБГ привел к достоверному 5,5% понижению ОХС и ХС ЛНП на 7%, а также на 5,6% достоверно повысился ХС ЛВП. Вышеуказанные изменения привели к достоверному снижению коэффициента атерогенности на 14%. Снижение показателей триглицеридов и ЛОНП не было достоверным.
Таблица 1
Динамика показателей липидного спектра крови (M±SD (m)).
| | Основная группа (n = 90) | Контрольная группа (n = 32) | ||||
| | до лечения | после лечения | р | до лечения | после лечения | р |
| ОХС, ммоль/л | 5,97 ± 1,35 (0,14) | 5,64 ± 1,31 (0,13)* | 0,01 | 6,06 ± 1,42 (0,25) | 5,78 ± 1,23 (0,22) | 0,08 |
| ХС ЛОНП, ммоль/л | 0,88 ± 0,46 (0,04) | 0,79 ± 0,50 (0,05) | 0,06 | 0,94 ± 0,61 (0,1) | 0,85 ± 0,48 (0,08) | 0,27 |
| ХС ЛНП, ммоль/л | 4,01 ± 1,28 (0,13) | 3,72± 1,24 (0,13)* | 0,01 | 4,11 ± 1,23 (0,21) | 3,92 ± 1,02 (0,18) | 0,31 |
| ХС ЛВП, ммоль/л | 1,07 ± 0,26 (0,03) | 1,13 ± 0,26 (0,03)* | 0,02 | 1,00 ± 0,22 (0,04) | 1,01 ± 0,19 (0,03) | 0,67 |
| ТГ, ммоль/л | 1,95 ± 1,01 (0,1) | 1,74 ±1,11 (0,11) | 0,06 | 2,08 ± 1,34 (0,23) | 1,87 ± 1,05 (0,18) | 0,27 |
| КА | 4,00 ± 1,68 (0,17) | 3,45 ± 1,38 (0,14)* | 0,002 | 4,34 ± 1,64 (0,28) | 3,94 ± 1,04 (0,18) | 0,1 |
* - различия статистически значимы по сравнению с исходными данными
- различия значимы по сравнению с контрольной группой (р = 0,02).
У больных контрольной группы не наблюдалось достоверных изменений липидного спектра. При этом различия после курса лечения между опытной и контрольной группой оказались достоверны по показателю ЛВП (р=0,02), а по показателю КА приближались к достоверному уровню (р=0,07).
Предположив, что изменения липидного спектра на фоне АПБГ могли иметь разнонаправленный характер у больных с разным исходным уровнем показателей, мы при анализе данных разделили пациентов на группы: с высокими, нормальными и низкими значениями показателей (таб. 2).
Из таблицы 2 видно, что у лиц с исходно повышенным уровнем холестерина содержание его после АПБГ достоверно уменьшилось на 8,7%, с нормальным – осталось на прежнем уровне, а с низким – даже несколько возросло. То есть, барокамерная гипоксия оказала нормализующее влияние на обмен холестерина у исследуемых больных. Такие же изменения происходили и с другими атерогенными фракциями липидов - ЛНП и ТГ. Достоверное снижение ЛНП на 12% получено только в группе с исходно повышенным уровнем его. Изначально высокие показатели ТГ снизились статистически значимо на 21,1%, хотя общее уменьшение ТГ после АПБГ не было достоверным. При этом необходимо отметить, что у большинства больных (59 из 90) уровень ТГ исходно находился в пределах нормы.
Таблица 2.
Изменение показателей липидного спектра крови на фоне АПБГ в зависимости от исходного значения (M±SD (m)).
| Исходный уровень показателя | n | до лечения | после лечения | р | |
| ОХС, ммоль/л | < 3,9 | 6 | 3,42 ± 0,52 (0,21) | 3,97 ± 0,75 (0,3) | 0,29 |
| 3,9 - 5,2 | 19 | 4,66 ± 0,36 (0,08) | 4,84 ± 0,91 (0,21) | 0,36 | |
| > 5,2 | 65 | 6,61 ± 0,98 (0,08) | 6,04 ± 1,21 (0,15)* | 0,0006 | |
| ХС ЛВП, ммоль/л | < 1,0 | 45 | 0,86 ± 0,09 (0,01) | 1,01 ± 0,19 (0,03)* | 0,00007 |
| 1,0 - 1,45 | 37 | 1,19 ± 0,15 (0,02) | 1,21 ± 0,26 (0,04) | 0,63 | |
| > 1,45 | 8 | 1,67 ± 0,12 (0,04) | 1,45 ± 0,19 (0,06)* | 0,003 | |
| ХС ЛНП, ммоль/л | < 3,4 | 28 | 2,57 ± 0,57 (0,1) | 2,83 ± 0,91 (0,17) | 0,13 |
| > 3,4 | 62 | 4,68 ± 0,9 (0,11) | 4,13 ± 1,15 (0,14)* | 0,0004 | |
| ТГ, ммоль/л | < 2,0 | 59 | 1,32 ± 0,35 (0,04) | 1,35 ± 0,54 (0,07) | 0,69 |
| > 2,0 | 31 | 3,13 ± 0,77 (0,14) | 2,47 ± 1,5 (0,27)* | 0,02 | |
| КА | < 3,5 | 34 | 2,39 ± 0,71 (0,12) | 2,52 ± 0,96 (0,16) | 0,49 |
| > 3,5 | 56 | 4,99 ± 1,29 (0,17) | 4,03 ± 1,28 (0,17)* | 0,0002 |
* - различия в группах статистически значимы
Изменения ХС ЛВП также были разнонаправлены: практически не поменялись исходно нормальные показатели, низкие (что особенно важно) достоверно увеличились, а высокие значимо снизились. Последнее также заслуживает пристального внимания, так как высокие значения ХС ЛВП (>1,8-2,1 ммоль/л) в 2,5 раза увеличивают риск коронарных событий, если значения aпo А-I также не являются высокими [A. Olsson et al., 2007]. Повышение низких показателей ЛВП не менее значимо, так как именно с ними выявлена достоверная отрицательная связь (r -0,45) с увеличением тромбообразования и выбросом провоспалительных цитокинов при острых коронарных событиях [Nofer J.R., Brodde M.F., Kehrel B.E., 2010].
Результатом описанных процессов явилось выраженное снижение (на 20%) исходно повышенного КА, что говорит о значительном снижении риска дальнейшего течения атеросклероза.
Чтобы оценить возможности влияния метода АПБГ на липидный спектр, было оценено общее количество больных, достигшее после лечения целевых уровней показателей в соответствии с современными рекомендациями (табл. 3). Целевыми уровнями считали: <5,0 ммоль/л для ОХС, >1,0 ммоль/л для ХС ЛВП, <1,7 ммоль/л для ТГ и <3,0 ммоль/л для ХС ЛНП для всех и <2,0ммоль/л для больных инфарктом миокарда [Диагностика и коррекция нарушений липидного обмена с целью профилактики и лечения атеросклероза (IV пересмотр), 2009].
Таблица 3
Количество больных, достигших целевых уровней показателей липидного спектра.
| Показатели | Основная группа | Контрольная группа | ||
| | кол-во больных | % больных от общего числа (90) | кол-во больных | % больных от общего числа (32) |
| ОХС | 30 | 33% | 8 | 25% |
| ХС ЛВП | 59 | 65% | 13 | 40% |
| ХС ЛНП (<3,0 ммоль/л) | 25 | 27% | 7 | 22% |
| ХС ЛНП (<2,0 ммоль/л) | 7 | 8% | 1 | 3% |
| ТГ | 53 | 58% | 18 | 56% |
Безусловно, полученный процент больных, достигших целевых уровней, более низок, чем при применении статинов. Но необходимо отметить, что для большинства применяемых препаратов для максимального достижения целевых уровней требуется более 4-х недель [С.В. Недогода, 2008]. Возможно, при исследовании показателей липидного спектра после АПБГ через более продолжительный срок было бы получено большее их снижение. При этом можно ожидать, что совместное применение гиполипидемической терапии и АПБГ даст гораздо более быстрые и значимые результаты.
Для оценки механизмов полученных изменений у 16 больных основной группы были определены дополнительные показатели липидного обмена, динамика которых представлена в таблице 4.
Из таблицы 4 видно снижение НЭЖК на 43%. Это может быть следствием повышения мощности системы митохондрий в ходе адаптации к гипоксии, доказанное для кардиомиоцитов [Меерсон Ф.З., 1973] и гепатоцитов [Никоноров А.А., 1990]. Тем самым активируется захват НЭЖК с последующей утилизацией их в процессе β-окисления.
Таблица 4
Динамика показателей липидного спектра крови основной группы (n=16) (M±SD (m)).
-
до АПБГ
после АПБГ
р
ФЛ, ммоль/л
2,66 ± 1,66 (0,41)
3,61 ± 0,85 (0,21)*
0,004
ФЛ ЛВП, ммоль/л
0,68 ± 0,44 (0,11)
0,93 ± 0,22 (0,05)*
0,002
ФЛ/ХСЛВП, у.е.
0,71 ± 0,39 (0,09)
1,13± 0,3 (0,07)*
0,001
НЭЖК, мэкв/л
0,44±0,13 (0,03)
0,25±0,08 (0,02)*
0,002
* - различия статистически значимы
Уровень фосфолипидов и фосфолипидов ЛВП увеличился на 36%, а соотношение ФЛ к холестерину в ЛВП выросло на 59%. Это может лежать в основе механизма показанной ранее постадаптационной индукции ЛХАТ – реакции [Твердохлиб В.П., 1989]. Косвенным подтверждением этого факта можно считать увеличение соотношения ФЛ/ХС в составе ЛВП под влиянием АПБГ, поскольку именно они служат эффективным акцептором свободного холестерина [Томпсон Г.Р., 1991, Saddar S., Mineo C., 2010]. Вместе с доказанным ростом ЛВП описанные изменения характеризуют усиление антиатерогенного эффекта их после АПБГ.
В настоящее время все большее значение в развитии атеросклероза отводят апопротеинам. Соотношение aпoB/aпoА-I было признано наиболее важным предиктором развития острого ИМ. Поэтому несомненный интерес представляло изучение влияния АПБГ на состояние основных апопротеинов сыворотки крови (таблица 5).
Из таблицы видно, что курс АПБГ сопровождался статистически значимым ростом на 7% апоА-I в крови больных основной группы. То есть, на фоне баротерапии происходит ускорение элиминации ХС, что значительно уменьшает его атерогенную активность. В основной группе выявлено снижение на 6% АпоВ, статистически не значимое, хотя уровень р приближается к достоверному (р 0,06). При этом значимых изменений содержания АпоЛП в крови лиц контрольной группы не наблюдалось, за исключением некоторого снижения апоА-I против повышения его в основной группе.
Уменьшение аполипопротеинового коэффициента атерогенности (соотношения апоВ/апоА-I) на 17% в основной группе указывает на увеличение скорости элиминации атерогенных ЛП из кровотока (т.е. усиление функции апоА-I), что можно считать одним из главных позитивных эффектов адаптационного воздействия.
Таблица 5
Динамика апопротеинового спектра (M±SD (m)).
| | Основная группа | Контрольная группа | ||||||
| | n | до лечения | после лечения | р | n | до ле-чения | после лечения | р |
| апо А1, г/л | 46 | 1,32 ± 0,26 (0,04) | 1,41 ± 0,18 (0,02)* | 0,04 | 26 | 1,36 ± 0,19 (0,04) | 1,27 ± 0,19 (0,04)* | 0,03 |
| апоВ, г/л | 46 | 1,1 ± 0,33 (0,05) | 1,03 ± 0,29 (0,04) | 0,06 | 26 | 1,03 ± 0,5 (0,09) | 1,01 ± 0,33 (0,06) | 0,75 |
| апоВ/ апоА-I | 46 | 0,89 ± 0,42 (0,06) | 0,74 ± 0,24 (0,03)* | 0,007 | 26 | 0,74 ± 0,3 (0,06) | 0,79 ± 0,01 (0,002) | 0,3 |
| апоЕ, мг/дл | 24 | 2,7 ± 1,81 (0,37) | 3,25 ± 1,15 (0,23)* | 0,001 | 16 | 2,21 ± 0,14 (0,03) | 2,15 ± 0,1 (0,02) | 0,21 |
| апоС-III, г/дл | 24 | 17,51 ± 8,89 (1,81) | 13,65 ± 5,39 (1,1)* | 0,007 | 16 | 17,33 ± 6,06 (1,51) | 16,78 ± 6,49 (1,62) | 0,62 |
* - различия статистически значимы
Интересен факт 20% повышения концентрации апоЕ у лиц основной группы после курса адаптации к ПБГ, учитывая, что это происходило на фоне снижения ХС ЛОНП и ХС ЛНП. В организме апоЕ обеспечивают рецепторный эндоцитоз транспортных форм липидов, которые не имеют домена лиганда и для которых на мембране клеток нет рецепторов [Титов В.Н., 2008]. Поэтому снижение содержания ХС в апоВ-зависимых ЛП связано с активацией их поглощения периферическими клетками с помощью апоЕ. В связи с этим изменения уровней транспортных и динамичных АпоЛП разнонаправлены (повышение апоЕ и снижение апоВ). Это позволяет сделать предположение, что в ходе адаптационной активации генетического аппарата клеток [Меерсон Ф.З., 1973] увеличивается синтез динамичных аполипопротеинов, содержащихся преимущественно в ЛВП, поскольку именно эта фракция транспортных ЛП достоверно увеличивается.
Уровень апоС-III достоверно уменьшился на 22%. Увеличение концентрации этого белка связывают с компенсирующей деятельностью ЛП этого вида при снижении активности липолитического фермента гидролиза ТГ в ЛОНП [Титов В.Н., 2006]. То есть, при снижении ТГ и ЛОНП уровень апоС-III ЛП снижается, что и подтверждают данные этого исследования.
В контрольной группе динамичные ЛП изменились недостоверно.
Таким образом, полученные результаты свидетельствуют о положительном влиянии АПБГ, способствующем нормализации липидтранспортных систем.
Общеизвестно, что в организме больных ИБС активизируется свободно-радикальное окисление липидов, а также происходит снижение активности эндогенной антиокислительной системы. Атерогенные сдвиги липидного спектра сыворотки крови в сочетании с усилением процессов ПОЛ в настоящее время рассматриваются как важнейшие звенья развития атеросклероза и прогрессирования ИБС, в том числе [Белая О.Л., 2008]. Поэтому нами было изучено влияние АПБГ на процессы окисления ЛП крови у больных ИМ (таб. 6).
Таблица 6
Динамика активности ПОЛ в липопротеиновых частицах больных основной и контрольной групп (M±SD (m))
| | Основная группа (n = 48) | Контрольная группа (n = 24) | ||||||
| | До лечения | После лечения | До лечения | После лечения | ||||
| Индексы окисления | ЕИО 232/220 | ЕИО 278/220 | ЕИО 232/220 | ЕИО 278/220 | ЕИО 232/220 | ЕИО 278/220 | ЕИО 232/220 | ЕИО 278/220 |
| апоВ-ЛП (гептан. фракция) | 0,74 ± 0,13 (0,02) | 0,12 ± 0,03 (0,004) | 0,70 ± 0,16 (0,02) | 0,09 ± 0,03 (0,004)* | 0,75 ± 0,12 (0,02) | 0,11 ± 0,09 (0,02) | 0,73 ± 0,13 (0,03) | 0,12 ± 0,05 (0,01) |
| ЛВП (гептан. фракция) | 0,72 ± 0,15 (0,02) | 0,16 ± 0,07 (0,01) | 0,70 ± 0,17 (0,02) | 0,08 ± 0,03 (0,004)* | 0,71 ± 0,14 (0,03) | 0,15 ± 0,1 (0,02) | 0,70 ± 0,13 (0,03) | 0,13 ± 0,06 (0,01) |
| апоВ-ЛП (изопроп. фракция) | 0,81 ± 0,13 (0,02) | 0,34 ± 0,15 (0,02) | 0,51 ± 0,06 (0,008)* | 0,19 ± 0,08 (0,01)* | 0,79 ± 0,16 (0,03) | 0,38 ± 0,15 (0,03) | 0,77 ± 0,11 (0,02) | 0,39 ± 0,1 (0,02) |
| ЛВП (изопроп. фракция) | 0,71 ± 0,12 (0,02) | 0,34 ± 0,07 (0,01) | 0,55 ± 0,1 (0,014)* | 0,23 ± 0,07 (0,01)* | 0,69 ± 0,13 (0,03) | 0,33 ± 0,1 (0,02) | 0,70 ± 0,14 (0,03) | 0,31 ± 0,12 (0,02) |
* - достоверность отличий после курса АПБГ в опытной группе, р ≤ 0,001
Влияние АПБГ на относительное содержание гептанофильных (жирных кислот) и изопропанолрастворимых (фосфолипидов) продуктов ПОЛ было исследовано в разных подфракциях ЛП. При этом количество первичных продуктов (диеновых коньюгатов) отражал индекс окисления 232/220, а вторичных (кетодиенов и сопряженных триенов) – индекс 278/220.
Из таблицы 6 видно, что уровень вторичных продуктов окисления ФЛ изначально был значительно выше (почти в 3-4 раза), чем липидов гептановой фракции. Так как ФЛ являются более полярными частицами, чем нейтральные жиры, то вполне закономерно, что они легче и окисляются, и легче поддаются действию антиоксидантных систем. Этим же можно объяснить значительное уменьшение обоих индексов окисления ЛВП и ЛНП изопропаноловой фракции в основной группе после лечения. Это свидетельствует о значительном снижении пероксидации фосфолипидов, что положительно сказывается на активности ЛХАТ-реакции, а также может косвенно обозначать стабилизацию мембранных структур кардиомиоцитов.
Достоверное снижение интермедиатов пероксидации жирных кислот ЛП, экстрагируемых гептановой фазой анализа, произошло только для индекса 278/220. Это, почти двукратное, уменьшение, особенно в составе ЛВП, можно связать с повышением мощности их антиоксидантной системы, что может рассматриваться как положительный момент адаптации, направленный на снижение атерогенности ЛП частиц. В контрольной группе достоверных изменений показателей индексов окисления не выявлено.
Статистически значимого снижения индекса 232/220 в гептановой фракции ЛВП и ЛНП получено не было, но прослеживается тенденция к уменьшению его на фоне АПБГ. При этом количество диеновых коньюгатов (отраженных индексом 232/220) изначально было примерно одинаковым для липидов и гептановой, и изопропаноловой фракций. Возможно, эти изменения появились не только под влиянием гипобарической гипоксии, но и под воздействием периодов реоксигенации, что вызывало избыточную генерацию активных форм кислорода. Поэтому уровень первичных продуктов ПОЛ в гептановой фракции снизился незначительно. Полученное параллельно значимое снижение первичных продуктов изопропаноловой фракции можно объяснить большей полярностью этих молекул, быстрее поддающихся воздействию антиоксидантных механизмов.
Таким образом, можно заключить, что наиболее выраженное влияние АПБГ имеет на уменьшение пероксидации фосфолипидов (особенно в ЛНП), так как уровень вторичных продуктов их окисления изначально был в несколько раз выше и снизился наиболее значительно. При этом торможение модификации фосфолипидных молекул может означать повышение активности ЛХАТ-реакции и косвенно указывать на стабилизацию мембранных структур эндотелия и миокардиоцитов. Все вышеописанное можно считать основой антиатерогенного воздействия АПБГ при ИМ.
В плазме крови активные формы кислорода денатурируют молекулы белка, не способные выполнять свою функциональную роль [Титов В.Н., 2006]. При нарушении липидного обмена таковыми являются ЛП, перегруженные липидными компонентами, которые рассматриваются как эндогенные аутоантигены и подлежат удалению. Поскольку структурная организация и функциональная активность ЛП определяется их аполипопротеиновым составом, то действие АФК, в первую очередь, направлено на денатурацию белковых компонентов ЛП [Климов А.Н., 1999]. В связи с этим изучение окислительной модификации АпоЛП является актуальным (таб. 7).
Таблица 7
Изменение уровня продуктов перекисного
окисления белковых компонентов ЛП (M±SD (m)).
| | Основная группа (n = 48) | Контрольная группа (n = 24) | ||||||
| | До лечения | После лечения | До лечения | После лечения | ||||
| | АФГ | КФГ | АФГ | КФГ | АФГ | КФГ | АФГ | КФГ |
| ЛНП+ ЛОНП | 56,54 ± 25,6 (3,69) | 9,78 ± 6,34 (0,91) | 28,2 ±12,2 (1,76)* | 4,52 ±3,38 (0,48)* | 57,46 ±24,22 (4,94) | 10,08 ± 6,29 (1,28) | 55,9 ± 21,53 (4,39) | 9,81 ± 5,65 (1,15) |
| ЛВП | 22,72 ± 6,52 (0,94) | 5,49 ± 2,11 (0,3) | 12,85 ±3,84 (0,55)* | 2,24 ±1,06 (0,15)* | 22,66 ±5,85 (1,19) | 5,67 ± 1,98 (0,4) | 22,2 ± 6,4 (1,3) | 5,56 ± 1,9 (0,38) |