Тезисы докладов
| Вид материала | Тезисы |
- Тезисы докладов, 4952.24kb.
- Тезисы докладов, 1225.64kb.
- Правила оформления тезисов докладов Тезисы докладов предоставляются в электронном виде, 22.59kb.
- «Симпозиум по ядерной химии высоких энергий», 1692.86kb.
- Требования к тезисам докладов, 16.83kb.
- Тезисы докладов научно-практической, 6653.64kb.
- Тезисы докладов 1 Межвузовская научно -практическая конференция студентов и молодых, 100.64kb.
- Тезисы докладов и заявки на участие, 104.97kb.
- Тезисы докладов, принятые Оргкомитетом для опубликования в Материалах форума, 788.61kb.
- Тезисы докладов, принятые Оргкомитетом для опубликования в Материалах форума, 1066kb.
ПОЛУЧЕНИЕ БИОЛОГИЧЕСКИ АКТИВНЫХ ФРАКЦИЙ ЭКСТРАКТА ИЗ ПЕЧЕНИ НЕОНАТАЛЬНОГО ПОРОСЕНКА И ОПРЕДЕЛЕНИЕ ИХ ПРИРОДЫ И ФИЗИКО-ХИМИЧЕСКИХ СВОЙСТВ
И.В.Урываева 1), Э.И.Гальперин 2), Р.И.Атауллаханов 3), Т.Г.Дюжева 2), Л.В.Платонова 2), Н.Н.Ионочкина 2), М.Кочергин 2), А.В. Пичугин 3), Т.М.Мельникова 4) , Г.В.Делоне1)
1)Институт биологии развития РАН, 2)Московская медицинская академия им. И.М. Сеченова, 3)Институт иммунологии МЗ, 4) Институт органической химии РАН
Печень обладает большой способностью к обновлению своей массы после повреждения. Во многом это обусловлено выработкой в самой печени эндогенных веществ, способствующих восстановлению массы печени и ее функции. Несмотря на это для лечения многих заболеваний печени требуется усиление ее регенераторной и функциональной активности. Наши многочисленные данные (Гальперин Э.И. и др., 1985-2008) позволяют полагать, что восстановление органа может быть достигнуто при использовании многокомпонентного набора естественных индукторов регенерации печени (ЕИРП), находящихся в определенной пропорции.
Цель проекта: создать для лечения повреждений печени лекарственный препарат, состоящий из набора естественных индукторов регенерации печени, образующихся в органе в период регенерации.
Задачи проекта – выделить из ткани неонатальной печени набор биологически активных веществ, обладающих регенерирующей активностью, и установить их природу и основные физико-химические свойства.
Результаты. Проведено фракционирование экстракта, полученного из печени 2-3-дневного поросенка с использованием оригинальной технологии. Гель-проникающая хроматография оказалась наиболее эффективной для разделения компонентов экстракта и выделения активных фракций. Биологическую активность экстракта и полученных фракций оценивали по их воздействию на поврежденную печень на экспериментальной модели токсического повреждения печени мышей тиоацетамидом (ТАА, 250 мг/кг), измеряя изменение активности АСТ и АЛТ в сыворотке крови опытных животных по сравнению с контрольными. Из множества пиков хроматограммы только две фракции проявили высокую активность, повторяющуюся во всех сериях экспериментов. Это были фракции с объемом удерживания 137 мл (вещество А) и с объемом удерживания 443 мл (вещество В). Удельная активность вещества А выше исходного экстракта в 10 раз, а вещества В – в 60 раз. УФ-спектр вещества А имеет интенсивную полосу поглощения при 259 нм (поглощение гетероциклов). Элементный анализ и количественное определение фосфора по цветной реакции с молибдатом аммония показали содержание 12,6% фосфора в веществе А. Эти данные и хорошая растворимость в воде позволяют предположить, что вещество А является нуклеиновой кислотой. Низкомолекулярная фракция В неоднородна по структуре – левая часть имеет поглощение в УФ спектре при 238 нм, а правая часть при 274 нм. В веществе В фосфор не определяется даже в следовых количествах. Детальное изучение физико-химических свойств и природы веществ А и В продолжается.
Была проведена работа по идентификации известных цитокинов и факторов регенерации печени в исходных экстрактах печени 2-3-дневных поросят и в активных фракциях А и В. Детектировали цитокины IL-6, IL-10, MCP-1, IFN-γ, TNF, IL-12p70 с помощью тест-систем фирмы BD Biosciences на проточном цитофлуориметре FACS Calibur (BD Biosciences). Кроме того, методом иммуноферментного анализа с использованием реагентов фирмы R&D Systems и прибора MRX Dynex исследовали содержание факторов регенерации печени, в частности, фактора роста гепатоцитов, эпидермального фактора роста и кардиотрофина. Эти исследования продолжаются.
Выводы. Получены фракции экстракта из печени 2-3-дневного поросенка, обладающие регенерирующей эффективностью в процессе восстановления поврежденной печени, превосходящие удельную активность экстракта в 10 и 60 раз. Во фракции А обнаружено высокое содержание фосфора и ее хорошая растворимость в воде, что позволяет предположить, что вещество А является нуклеиновой кислотой. Низкомолекулярная фракция В неоднородна. Детальное изучение физико-химических свойств и природы веществ А и В продолжается. Проведены работы по идентификации цитокинов и факторов роста во фракциях А и В. Исследования продолжаются.
НАНОРАЗМЕРНЫЕ ПОЛИМЕРНЫЕ НОСИТЕЛИ
ДЛЯ ПРОТИВОТУБЕРКУЛЕЗНЫХ ПРЕПАРАТОВ
А.Р.Хохлов1,2), А.И.Барабанова1), Е.В.Корчагина2), Г.В.Болотова2),
И.Н.Федорова1), В.Г.Бабак1), О.Е.Филиппова2), В.С.Вележева1)
1) Институт элементоорганических соединений им. Несмеянова РАН, Москва
2) Физический факультет Московского государственного университета, Москва
Туберкулез занимает лидирующее положение среди других инфекционных заболеваний по количеству смертей. Среди основных причин высокой смертности можно выделить резистентность микобактерий (Mycobacterium tuberculosis) к существующим лекарственным препаратам и отсутствие направленного транспорта лекарства в места персистенции возбудителя туберкулеза (макрофаги). Новые противотуберкулезные препараты (ПТП) должны принципиально отличаться от уже существующих лекарств и проявлять антимикобактериальную активность в отношении резистентных микобактерий. Синтез ПТП нового поколения, а также создание носителя для ПТП, который будет способствовать проникновению лекарственного вещества в макрофаги и его постепенному высвобождению, являются поэтому одними из первоочередных задач.
Цель настоящего исследования состояла в разработке новых терапевтических агентов, активных против резистентных форм туберкулеза, а также полимерных носителей, способных направленно доставлять эти агенты к местам персистенции возбудителя болезни.
В продолжение поиска новых ПТП в ряду пиридазино[4,3-b]индолов обнаружено соединение GS-11, которое, по данным испытаний in vivo, проявляет высокую противотуберкулезную активность, сопоставимую с активностью препарата первого ряда – изониазида. Испытания проведены в 2008 г. в США (Colorado State University, программа NIAID`s Tuberculosis Antimicrobial Acquisition and Coordinating Facility (TAACF), руководитель д-р A. Lenaerts).
Предложено два разных типа полимерных носителей для указанного препарата. Одним из них являются наночастицы хитозана и его гидрофобного производного, самопроизвольно образующиеся в водных растворах за счет гидрофобных взаимодействий. Методом динамического светорассеяния показано, что гидродинамический радиус наночастиц составляет порядка 150 нм. Другим типом носителей являются наночастицы хитозана с полиэтиленоксидными цепями на поверхности. Метод получения таких частиц основан на коацервации разбавленных водных растворов хитозана с ростом рН в ядрах мицелл, образованных блок-сополимерами этиленоксида и пропиленоксида (плюроники). Ожидается, что включение рН-чувствительных полисахаридов в мицеллы блок-сополимеров повысит их стабильность в среде организма.
Изучено влияние полимерной матрицы на противотуберкулезную активность GS-11 двумя методами: (1) по росту микобактерий в жидкой питательной среде, содержащей исследуемые препараты, и (2) по контролю за размножением микобактериальных клеток (редупликацией микобактериальной ДНК) методом полимеразной цепной реакции. В первом методе оценивали действие препарата на «свободные» микобактерии, а во втором случае – на микобактерии, фагоцитированные макрофагами. Показано, что наночастицы вызывают усиление противотуберкулезной активности GS-11.