Классическая чума свиней. Особенности проявления и специфическая профилактика
Диссертация - Сельское хозяйство
Другие диссертации по предмету Сельское хозяйство
?дно-масляной эмульсии предохраняла поросят от клинического проявления болезни и гибели после контрольного заражения их через 3 недели после вакцинации. Вакцина была стабильной в течение, по крайней мере, 18 месяцев, полностью сохраняя свою иммуногенность. Компонентная вакцина Porcilis Pesti, приготовленная из гликопротеина Е2 содержала не менее 40 ед. Е2, и вызывала у свиней образование ВНА в титре не менее чем 1:32.
Создана также ДНК-вакцина против КЧС и стратегия первичной бустеризации, состоящая из введения сначала ДНК-вакцины, а затем аденовирусного рекомбинанта [47, 43].
В 1991 г. было осуществлено встраивание генов гликопротеинов ВКЧС в вектор (вирус осповакцины). Полученный рекомбинантный вирус оказался высокоиммуногенным. Изучая роль разных белков вируса в иммунитете против КЧС, свиней прививали рекомбинантными вирусами осповакцины экспрессирующими различные белки ВКЧС. Устойчивыми к контрольному заражению оказались только те животные, которые были привиты рекомбинантным вирусом вакцины, экспрессирующим Еr n s и Е2. Гликопротеин Еr n s - второй по значению протективного антигена ВКЧС. Конструкции рекомбинантного вируса, не содержащие гена, кодирующего Е2, не вызывали образования ВНА, но индуцировали протективный иммунитет.
В настоящее время получен рекомбинантный аттенуированный вирус БА, в котором ген, кодирующий белок gЕ, заменяли геном, кодирующим белок Е2 ВКЧС. Он вызывал у свиней выраженный иммунитет против обоих вирусов.
Позже создали живые комбинированные вакцины на основе аденовируса и вируса оспы свиней.
Маркированная вакцина также может быть основана на генно-инженерном живом делеционном мутанте вируса. Получены делеционные мутанты, в которых полностью или частично отсутствуют гены Е2 и Еr n s. При введении таких вакцин свиньям репродукцию инфекционного вируса у привитых после заражения не обнаруживали.
Мутанты пестивирусов ВКЧС, ВДБС, вируса пограничной болезни имеют пониженную способность к репликации, выражающуюся в образовании мелких бляшек, и содержат мутации в 5'-нетранслируемой области генома. Разработана вакцина для профилактики классической чумы свиней, состоящая из специфических вирусных полипептидов, векторные вакцины, способные экспрессировать нуклеотидные последовательности, кодирующие такие полипептиды. Данные полипептиды и нуклеотидные последовательности могут использоваться и для диагностики обусловленной ВКЧС инфекции. Получено пять перекрывающихся синтетических пептидов, охватывающих последовательность области В/С (аминокислотные остатки 693-777) гликопротеина Е2 штамма Ши-Мынь ВКЧС. Отдельные пептиды конъюгировали с бычьим сывороточным альбумином и иммунизировали полученными препаратами кроликов. На все пять пептидов получен ответ антител в высоких титрах. Комбинация этих же препаратов, введенных свиньям, индуцировала сильный и специфичный гуморальный ответ на все пять компонентов.
Получены химерные штаммы на основе С штамма ВКЧС, в котором Е2 или Еr n s гены были заменены соответствующими генами вируса диареи крупного рогатого скота. Через 7 дней после введения химерных штаммов, они полностью защищали свиней против летальной инфекции вирусом КЧС.
Все эти вакцины позволяют различать инфицированных и вакцинированных свиней на основе антительного ответа на Еr n s, если вакцина содержит ген, кодирующий Е2, или на основе антител к Е2, если вакцина содержит ген, кодирующий Еr n s [47].
Однако, не смотря на разнообразие вакцин нового поколения, специфическая профилактика КЧС по-прежнему основывается на применении традиционных живых вакцин. Они эффективнее стимулируют выработку ВНА после иммунизации животных. Из-за отсутствия стандартизированных критериев оценки затруднена сравнительная оценка безопасности и эффективности вакцин нового поколения. Только субъединичную Е2 вакцину предложили для испытания в практических условиях.
10.3 Инактивированные вакцины
В 1935 году Дорсетом была предложена кристаллвиолетвакцина, которая представляла собой консервированную раствором глицерина с краской кристаллвиолет и инактивированную теплом дефибринированную кровь свиней, больных чумой. Вводилась вакцина двукратно с интервалом 10-14 дней, иммунитет наступал к 15-20 дню и длился у молодняка до 5 месяцев.
С 1967 г. этот препарат в странах СНГ не применяется, хотя попытки получения инактивированного и абсолютно безвредного препарата продолжают предприниматься. Так, например, установлено, что ВКЧС, выращенный любыми технологическими приемами, надежно инактивировался сернокислой медью (3-5 мМ) при 37С в течение 98 ч с сохранением иммуногенных свойств. Использование других инактивантов (глутаральдегид, димер-этиленимина, тритон Х-100) не обеспечивает получения иммуногенных препаратов в нативном виде (максимальная доза АГ). Разработана инактивированная вакцина против КЧС, содержащая культуральный материал вирулентного шт. Ши-Мынь, сернокислую медь в качестве инактиванта и гидроокись алюминия. Вакцина создавала 100%-ную защиту привитых животных от контрольного заражения вирулентным вирусом (1000-10000 ЛД50), в то время как аналогичные препараты из шт. ЛК обеспечивали, в общей сложности, 30%-ную защиту. Во Франции разработана инактивированная вакцина против КЧС. Культуральный вирус инактивировали глутаральдегидом (0,01-0,001%-ным при 25-35С в течение 4-7 ч), а затем эмульгировали в масляном адъюванте. В ВНИТИБП были получены опытные образцы инактивированной вакцины против КЧС из шт. Гудзон, выращенног