Классическая чума свиней. Особенности проявления и специфическая профилактика
Диссертация - Сельское хозяйство
Другие диссертации по предмету Сельское хозяйство
о в культурах клеток РК-15, ПЭКр и первичной культуре клеток почки поросенка. Вирус инактивировали этиленамином и эмульгировали с разными масляными адъювантами. Вакцина обеспечивала 75-100%-ную защиту в экспериментальных условиях при контрольном заражении /10000 ЛД50. Имеется патент на вакцину, содержащую полипептид вируса КЧС [43, 47].
Во ВНИВИ (Россия) разработана радиоинактивированная вакцина "Гаммавак-ВНИВИ" против КЧС, сконструированная на принципиально новой основе. Она представляет собой комплексный препарат, содержащий культуральный инактивированный белок ВКЧС (шт. "Ши-Мынь") и высокомолекулярный водорастворимый иммуностимулятор ксимедон. Вирус культивировали на КК невриномы гассерова узла крысы (НГУК-1), накопление вируса достигало до 6,5-7 lg ИД50/мл. Инактивировали биомассу на гамма-установке "Исследователь" дозой 25-30 кГр, источник ионизирующего излучения - радиоактивный изотоп 60Со. Инактивированная гамма-лучами сухая культуральная вакцина против КЧС безвредна, авирулентна. Обладает антигенной активностью; ее введение индуцировало в организме привитых животных образование специфических антител к вирусу чумы в титре 1:8. Двукратная вакцинация приводила к титру 1:13. Схема иммунизации включала двукратную вакцинацию с интервалом 14 дней. Через 14 дней все ревакцинированные животные противостояли контрольному заражению [2].
10.4 Серологическая оценка поствакцинального иммунитета
В Республике Беларусь обязательна вакцинация против КЧС всего свинопоголовья. Напряженнocть иммунитета у вакцинированных свиней определяют в соответствии с "Методическими указаниями по определению в РНГА_специфических антител у свиней, вакцинированных против чумы", утвержденными 4.08.1989 года Главным управлением ветеринарии СССР.
Оценка напряженности поствакцинального иммунитета проводится по титру AT.
В лабораторию для исследования напряженности иммунитета посылают не менее 10-15 проб сыворотки крови от свиней через 20-25 дней после иммунизации их против чумы.
Для исследования используют свежие сыворотки крови, которые хранят при температуре плюс 4С не более недели или -20С в течение месяца.
РНГА ставят с использованием антигенного эритроцитарного диагностикума (3%-ная взвесь эритроцитов барана, сенсибилизированных антигеном вирусвакцины чумы свиней).
Результаты РНГА с испытуемыми сыворотками считают положительными при обнаружении агглютинации эритроцитарного антигена, начиная с разведения 1:4 и выше.
Обнаружение специфических антител в титре 1:4 и выше у 84% исследованных проб сыворотки крови указывает на наличие иммунитета у вакцинированных против КЧ свиней.
Кроме РНГА для определения напряженности иммунитета можно использовать метод ИФА. Суть метода - иммунологический планшет с иммобилизованным рекомбинантным антигеном Е2 вируса КЧС вносят исследуемую сыворотку в различных разведениях и специфические моноклональные антитела к Е2, коньюгированные с пероксидазой хрена. При отсутствии в исследуемой сыворотке вирусспецифических антител, моноклональный коньюгат свободно взаимодействует с иммобилизированным антигеном и после добавления субстрата и хромогена в лунке появляется окраска. Если в исследуемой сыворотке имеются антитела к ВКЧС, происходит их взаимодействие с иммобилизированным антигеном, его частичная или полная блокировка, в результате чего связывание коньюгата с антигеном снижается.
Также оценку поствакцинального иммунитета можно проводить при помощи РДСК, РН. Вакцинацию можно считать успешной, если титр AT в РН флюоресцирующих микробляшек, спустя 2-5 месяцев после иммунизации, составляет 1:20 и выше.
Так, титр AT 1:32 и выше свидетельствует о напряженном иммунитете. У молодняка до 2-3 месяцев иммунитет ненапряженный и титр AT в РНГА составлял 1:4-1:8. Через 20 дней после вакцинации поросят вирус-вакциной титр ВНА постепенно повышался до максимального уровня к 60-му дню, клеточной реакции не отмечено. В трех группах поросят, привитых штаммами, вызывающими хроническую чуму, ВНА не обнаружено, клеточный иммунный ответ наблюдали у 4 животных из 9. Наивысший клеточный иммунный ответ был у поросят, иммунизированных инактивированным вирусом. Хотя иммунный ответ у поросят в разных подопытных группах был неодинаковым, после контрольного заражения вирулентным вирусом выжили все животные. У поросят, отнятых в 7-дневном возрасте от иммунных свиноматок, пассивная защита может продолжаться свыше 2 месяцев. При этом уровень иммунитета будет зависеть от времени, прошедшего между вакцинацией свиноматки и опоросом. Так, поросята, рожденные от свиноматок, вакцинированных за 10 месяцев до родов, могут быть вакцинированы не ранее возраста 5 недель. Бустер-вакцинация поросят этой группы в возрасте 6 месяцев вызывала подъем титров AT и устойчивость к вирусу продолжительностью до 4 лет. В ряде опытов поросят, рожденных от свиноматок, вакцинированных за 1 месяц до случки, иммунизировали в возрасте 5, 7 и 9 недель. Несмотря на то, что перед вакцинацией животные имели эквивалентные титры пассивно приобретенных AT, в последующем уровень иммунитета зависел от времени вакцинации: чем позже вакцинированы поросята, тем выше титры AT. Наилучшие результаты получены в группе поросят, вакцинированных в возрасте 9 недель.
Установлено, что при титре ВНА в РН флюоресцирующих бляшек 1:4 и выше животные устойчивы к внутримышечному заражению эпизоотическим штаммом в дозе 104 ЛД50, при титре 1:2 - переболевают и независимо от исхода представля