Классическая чума свиней. Особенности проявления и специфическая профилактика
Диссертация - Сельское хозяйство
Другие диссертации по предмету Сельское хозяйство
атравок (праймеров) при температуре плюс 60С и синтез с них комплементарных цепей ДНК с помощью термостабильной ДНК полимеразы при температуре плюс 72С. С помощью данной тест-системы вирус КЧС может быть обнаружен в инфицированных культурах клеток и патматериале от больных и павших животных (кровь, селезенка, сердце, печень) в течение от 8 до 24 часов.
Относительно эффективным при выявлении вируса классической чумы свиней является также метод иммуноферментного анализа и цитохимический вариант иммуноферментного анализа (ЦВИА).
Для обнаружения вируса КЧС в патологическом материале могут использоваться РНГА, РДП, иммуноэлектроосмофорез (ИЭОФ) и другие.
Серо - и ретроспективная диагностика КЧС в последние годы базируется на использовании преимущественно трех серологических реакций: реакция нейтрализации флюоресцирующих микробляшек (РНФБ); реакции непрямой ИФ и непрямой вариант твердофазного ИФА.
Выделение вируса из патматериала производится заражением культуры клеток ПК-15 (перевиваемая линия клеток почки поросенка). Вирулентные штаммы ВКЧС в этой культуре активно репродуцируются при плюс 39-40С, образуя большие флюоресцирующие участки клеток. Вакцинные штаммы в культуре ПК-15 размножаются медленно при плюс 33-34С, образуя небольшие флюоресцирующие участки клеток.
Идентификация вируса КЧС проводится методами МФА, ИФА, ПЦР или нейтрализации флюоресцирующих микробляшек. Последний метод используется также для дифференциации эпизоотических и вакцинных штаммов вируса. Срок исследований - 15 дней.
В лабораторию для исследований следует направлять кусочки селе- зенки, миндалин, заглоточных, подчелюстных и брыжеечных лимфоузлов почек, легких, пробы крови и костного мозга из грудной кости, отобранные в первые 2 часа после гибели или убоя больных животных. Материал отбирают в стерильную посуду и доставляют в термосе со льдом. От новорожденных поросят (до приема молозива) берут кровь (1-2 мл) помещают в пенициллиновые флаконы, которые хранят и транспортируют для исследования в замороженном виде. Если пробы крови берут от нескольких безмолозивных поросят, то они должны быть из разных пометов. Материал для исследования направляют с сопроводительным письмом, в котором указывают эпизоотическое состояние хозяйства, отмеченные симптомы болезни, патологоанатомические изменения.
Для гистоисследования в лабораторию посылают кусочки полушарий головного мозга, продолговатого мозга, четверохолмия, спинного мозга. Кусочки указанных органов (1-2 х 1 х 1 см) помещают в стеклянные банки с 10%-ным водным раствором формалина. Объем консерванта берут в 10 раз больше, чем объем взятого патматериала.
Данная схема лабораторных исследований на КЧС принята во всех европейских странах.
В настоящее время диагностикумы готовятся на основе моноклональных антител, что позволяет дифференцировать не только эпизоотические и вакцинные штаммы вируса, но и близкородственные пестивирусы.
На основании изучения эпитопного профиля 18 штаммов ВКЧС с использованием МАт к трем пестивирусам (ВКЧС, BflKFC и ПЮ) был выявлен у 4 штаммов нетипичный для ВКЧС профиль и высказана гипотеза, что свиньи чувствительны не только к пестивирусам КРС и овец, но и другим вирусам чумы, хозяин которых еще не установлен [63].
С помощью вируснейтрализующих МАт было установлено, что ответственным за индукцию протективного иммунного ответа против КЧС является оболочечный гликопротеин gp55 [70, 71]. С ним же связана и нейтрализация инфекционности вируса антителами.
В отдельных случаях прибегают к постановке биопробы, которая является относительно не дорогим, но исключительно достоверным методом диагностики.
В каждом отдельном случае на проведение биопробы необходимо иметь разрешение Главного управления ветеринарии Республики Беларусь. Биопроба должна проводиться под методическим руководством Республиканской ветеринарной лаборатории в условиях, исключающих возможность рассеивания возбудителя. Подтверждение диагноза биопробой можно получить лишь через 30 суток и более, после установления сероконверсии у переболевших поросят [25].
В отдельных случаях биологическая проба при диагностике КЧС является решающей. Однако условий для ее постановки в Республике Беларусь нет из-за отсутствия свиней неиммунных к классической чуме.
Диагноз на КЧС следует считать установленным при выделении вируса из патологического материала в культуре клеток и его идентификации или положительной биопробе.
При диагностике КЧС во всех сомнительных случаях надо исключить (или подтвердить) такие болезни как африканская чума свиней, рожа, сальмонеллез, пастереллез, листериоз, болезнь Ауески, ТГС, болезнь Тешена, дизентерию, отравления протекающие с признаками геморрагического диатеза.
Лечение неэффективно, больных КЧС свиней немедленно убивают. В случае выздоровления больные КЧС свиньи остаются вирусоносителями в течение 1 года и более [32, 31, 22, 46, 7, 50, 51, 52, 8,48, 9, 42, 15, 58, 53, 23, 30, 25, 35, 33, 10, 34].
10. Иммунитет и специфическая профилактика
10.1 Живые вакцины
Иммунитет при КЧС обусловлен ВНА. Из-за отсутствия экспрессии вирусспецифических белков на поверхности клеток иммунные реакции, направленные на цитолиз инфицированных клеток, не "работают". Однако формирование резистентности к заражению вакцинированных свиней происходит до выявления ВНА. Лейкоциты и лимфоциты иммунизированных свиней способны лизировать аутогенные инфицированные ВКЧС клетки (?/p>