Фармакогностическое изучение сырья фенхеля обыкновенного в сравнительном аспекте
Контрольная работа - Медицина, физкультура, здравоохранение
Другие контрольные работы по предмету Медицина, физкультура, здравоохранение
веществ
Реакция с 1% раствором желатина. К 2 мл водного извлечения изучаемого сырья прибавляли несколько капель 1% раствора желатина.
Наблюдения: появилась муть, исчезающая при добавлении избытка желатины.
Реакция с раствором железоаммониевых квасцов. К 2 мл водного извлечения изучаемого сырья прибавляли 4к. раствора железоаммонийных квасцов.
Наблюдения: появлялось черно-зеленое окрашивание, что свидетельствует о наличии конденсированной группы дубильных веществ.
Обнаружение гидроксикоричных кислот
Гидроксикоричные кислоты в сырье изучали методом тонкослойной хроматографии в системе растворителей 15% кислота уксусная. Пятна кислот имели голубую флуоресценцию в УФ-свете. После обработки парами аммиака голубая флуоресценция усилилась. Схема хроматограммы водного извлечения представлена на рисунке 2.2.
Рис 2.2 Схема хроматограммы обнаружения гидроксикоричных кислот в водном извлечении травы фенхеля
Как видно из рисунка 2.2. в результате хроматографического анализа водного извлечения травы фенхеля в сравнении со значениями Rf, приведенными в литературных источниках [10], были идентифицированы феруловая, хлорогеновая и неохлорогеновая кислоты.
Обнаружение органических кислот
Органические кислоты изучали методом тонкослойной хроматографии в системе растворителей эилацетат-уксусная кислота-муравьиная кислота-вода (100:11:11:25) в сравнении с референтными образцами органических кислот (в виде 0,1% водного раствора). Высушенные пластины обрабатывали раствором смеси бромфенолового синего и метиленового красного (0,3 г бромфенолового синего, 0,1 г метиленового красного в 100 мл хлороформа).
Кислоты проявились в виде желтых пятен на синем фоне. Схема хроматограммы обнаружения органических кислот представлена на Рис. 2.3.
Рис. 2.3. Схема хроматограммы обнаружения органических кислот в водном извлечении травы фенхеля
Примечание: 1 - яблочная кислота, 2- валериановая, 3 - щавелевая, 4 - лимонная, 5 - аскорбиновая, 6 - винная, 7 - янтарная, 8 - водное извлечение травы фенхеля.
Данные рисунка 2.3. свидетельствуют о присутствии валериановой, лимонной и аскорбиновой кислот в сырье фенхеля обыкновенного.
Обнаружение кумаринов
Приготовление вытяжки. 3,0 г измельченного сырья помещают в колбу на 100 мл со шлифом, заливают 30 мл 95%-го спирта этилового, колбу закрывают обратным холодильником и кипятят на водяной бане 20 минут. После охлаждения вытяжку фильтруют и используют для проведения качественных реакций.
Лактонная проба. К 5 мл полученного раствора прибавляли 5 к. 10% раствора калия гидроксида и нагревали на водяной бане в течение 5 минут.
Наблюдения: появлялось желтое окрашивание.
Затем к окрашенному раствору прибавляли 10 мл воды очищенной и 10к. 10% кислоты хлористоводородной.
Наблюдения: раствор обесцветился и появилась муть.
Реакция со щелочью и диазореактивом. К 3 мл полученного раствора прибавляли 5к. 10% раствора калия гидроксида и нагревали на водяной бане несколько минут.
Наблюдения: содержимое пробирки окрасилось в желтый цвет.
Затем к окрашенному раствору прибавили 5к. свежеприготовленной диазотированной сульфаниловой кислоты.
Наблюдения: раствор приобрел красно-оранжевое окрашивание.
Обнаружение флавоноидов
Цианидиновая реакция по Брианту. К 2 мл водно-спиртового извлечения изучаемого сырья прибавляли 5-7к. концентрированной хлористоводородной кислоты и 10-15 г металлического магния.
Наблюдения: появлялось розовое окрашивание, указывающее на присутствие веществ флавоноидной природы.
К окрашенному раствору прибавляли 1 мл бутанола и встряхивали пробирку.
Наблюдения: органическая фаза приобретала розовое окрашивание более слабое, чем окрашивание водной фазы, что говорит о преобладании гликозидов над агликонами.
Хромонол Цианидин
Реакция с 10% раствором железа (III) хлорида (на фенольные гидроксилы). К 1 мл водно-спиртового извлечения изучаемого сырья прибавляли 1-2к. 10% раствора железа (III) хлорида.
Наблюдения: появлялось темно-зеленое окрашивание.
Реакция со щелочью. К 1 мл водно-спиртового извлечения изучаемого сырья прибавляли 2 мл 10% водно-спиртового раствора гидроксида калия.
Наблюдения: интенсивность окраски усилилась.
Реакция с раствором алюминия хлорида. К 1 мл водно-спиртового извлечения изучаемого сырья прибавляли 1 мл 2% раствора алюминия хлорида. Наблюдения: появилось желтое окрашивание.
Реакция с раствором свинца ацетата. К 1 мл водно-спиртового извлечения изучаемого сырья прибавляли 1 мл 10% раствора свинца ацетата.
Наблюдения: выпал желтый осадок.
7.2 Хроматографический анализ флавоноидного состава
Флавоноиды в траве фенхеля изучали с помощью тонкослойной хроматографии в двух системах растворителей: 1) н-бутанол - уксусная кислота - вода (4:1:2) и 2) хлороформ - уксусная кислота - вода (13:6:2) в сравнении с достоверными образцами флавоноидов в виде 0,5% спиртовых растворов. Идентификацию флавоноидов проводили в УФ и видимом свете до и после обработки 2% спиртовым раствором алюминия хлорида. Пятна флавоноидов окрашивались в грязно-желтый цвет и имели желтую флуоресценцию. Схемы хроматограмм флавоноидного состава представлены на рисунке 2.4. и 2.5.
Рис. 2.4
Рис.2.5
Примечание: 1 - гиперозид, 2 - кверцитин, 3 - вытяжка из травы фенхеля, 4 - рутин.<