Структура лекарственно-устойчивого туберкулеза в Минской области в 2008–2011 гг.
Дипломная работа - Медицина, физкультура, здравоохранение
Другие дипломы по предмету Медицина, физкультура, здравоохранение
?зотопов и специального радиометрического оборудования, сложность работы с изотопной технологией;
необходимость дополнительного посева на плотную питательную среду при возникновении проблем с идентификацией или интерпретацией результатов (Бардисявичене, Сосновская, 1996).
туберкулез возбудитель заражение лекарственный
1.3.8 Методы исследования лекарственной чувствительности микобактерий
Для определения лекарственной чувствительности (ЛЧ) МБТ должны использоваться только стандартизованные методы исследования, что позволяет:
правильно вести лечение пациентов;
интерпретировать и сравнивать данные, полученные из различных источников;
проводить оценку уровней лекарственной устойчивости и тенденций, наблюдаемых в разных регионах или странах.
В настоящее время нет единого универсального метода определения ЛЧ МБТ. Имеются культуральные методы с использованием плотных и жидких питательных сред, с полуавтоматической и автоматической детекцией роста микобактерий, а также молекулярно-генетические экспрессные методы.
Все имеющиеся методы определения ЛЧ МБТ можно условно разделить на 2 категории:
методы прямого определения ЛЧ МБТ;
методы непрямого определения ЛЧ МБТ.
При использовании методов прямого определения ЛЧ МБТмокрота или другие клинические материалы, предварительно обеззараженные и прошедшие гомогенизацию, высеваются непосредственно на среды, содержащие и не содержащие соответствующий препарат. Количество инокулята определяется в зависимости от количества КУМ, определенного при микроскопии мазка.
Методы прямого определения ЛЧ имеют ряд недостатков:
)для исследования нельзя использовать образцы диагностического материала, имеющие отрицательный результат микроскопии;
)при проведении данного исследования повышается риск контаминации;
)может наблюдаться недостаточный рост культуры, не позволяющий сделать достоверные выводы.
При использовании методов непрямого определения ЛЧ МБТпроводится выделение микроорганизмов из клинических образцов при культивировании, а затем на контрольную и содержащую препарат яичную или плотную агаровую среду высевается гомогенная суспензия или культура, выросшая на бульоне.
В литературе описаны три основных классических микробиологических метода непрямого определения ЛЧ МБТ:
)Метод пропорций, предложенный в 1963 г. Canetti, RistandGrosset и детализированный в 1985 г. MiddlebrookandCohn;
)Метод коэффициента устойчивости, разработанный в 1961 г. Mitchison и др.
)Метод абсолютных концентраций на плотных и жидких средах, модифицированный в 1970 г. Meissener (Севастьянова, 2009).
В Беларуси наиболее распространенным и традиционно используемым методом определения ЛЧ МБТ является непрямой метод абсолютных концентраций на плотной яичной питательной среде Левенштейна-Йенсена. Остальные методы тестирования ЛЧ МБТ являются альтернативными.
1.3.9 Серологические методы диагностики туберкулеза
Серологические методы изучения компонентов плазмы крови при туберкулезе разрабатывались на протяжении всего XX столетия. Особый интерес исследователей концентрировался на использовании серологических методов при изучении внелегочных форм туберкулеза. Однако, в отличие от многих инфекционных болезней,для которых серодиагностика оказалась эффективным инструментом, для туберкулеза этот тип исследования не достиг достаточного уровня чувствительности и специфичности, что определяло бы обоснованность его использования в клинической практике.
Таким образом, пока эти методики не позволяют в значительной степени повысить диагностическую и экономическую способность традиционных методов обнаружения туберкулеза (микроскопия МБТ и культуральные методы выявления МБТ). Однако в результате быстрого прогресса в разработке сложных молекулярно-биологических методов, несомненно, в скором времени будет создан новый, эффективный и дешевый серологический тест выявления туберкулеза (Кошечкин, Иванова, 2006).
1.3.10 Иммунологические и молекулярно-биологические исследования
Определение противотуберкулезных антител для диагностикитуберкулеза было начато еще в 20-е гг. XX века (лейкогглютинация, лейкоцитолиз, пассивная гемагглютинация). С конца 70-х гг. развиваются методы иммуноферментного анализа (ИФА), широко распространенные в клинической практике (например, для диагностики вирусных гепатитов или ВИЧ-инфекции). В диагностике туберкулеза серологические методы, в том числе ИФА, не оправдали всех возлагавшихся надежд, поскольку не удалось обнаружить специфичных антигенов М. tuberculosis, на которые у большинства больных вырабатываются соответствующие антитела.
Существующие иммуноферментные тест-системы обладают специфичностью на уровне 90-94% (6-10% ложноположительных результатов у здоровых лиц или больных нетуберкулезными заболеваниями), тогда как чувствительность (число положительных результатов у больных активным туберкулезом) составляет, в среднем, около 70% (Вишневская, 1998). Поэтому говорить о самостоятельном значении данного метода для дифференциальной диагностики туберкулеза органов дыхания пока не представляется возможным. Предложенные в последние годы для определения противотуберкулезных антител иммунохроматографические тесты хотя и отличаются простотой и быстротой выполнения, но обладают теми же недостатками, что и традиционный ИФА.
Для определения антигенов М.tuberculosis используются аффинно очищенные антисыворотки ?/p>