Структура лекарственно-устойчивого туберкулеза в Минской области в 2008–2011 гг.
Дипломная работа - Медицина, физкультура, здравоохранение
Другие дипломы по предмету Медицина, физкультура, здравоохранение
?ия изониазида - 4 ч. у слабых инактиваторови меньше - у сильных (Репин,2007).
Рифамицины(Rifamycine)Антибиотики группы рифамицина обладают широким спектром действия, включающим МБТ.
Механизм действия рифамицинов на МБТ основан наинактивации бактериальной ДНК-зависимой РНК-полимеразы путем образования стабильного комплекса молекулы антибиотика с ферментом бактериальной клетки, благодаря чему нарушается транскрипции ДНК. Результатом ингибирования РНК- полимеразы является нарушение синтеза нуклеиновых кислот и белков и гибель бактериальной клетки. Аналогичного процесса ингибирования полимеразы и синтеза РНК в животных клетках не происходит ввиду отсутствия способности фермента эукариотических клеток к образованию стабильного комплекса с молекулами антибиотика.
Механизм возникновения лекарственной устойчивости МБТ к рифамицинам функционирует в результате спонтанных мутаций. В популяции микобактерий с критической численностью образуются бактерии с измененной РНК-полимеразой, теряющей способность к формированию стойкого комплекса с молекулами антибиотика, блокирующего действие фермента. Таким образом осуществляется механизм устойчивости, связанный с изменением мишени для действия антибиотика. Далее вступает в действие механизм селекции мутантных бактерий с измененной нечувствительной РНК- полимеразой в условиях неадекватной химиотерапии, как правило, и являющейся основной причиной развития ЛУ штаммов МБТ с высоким порогом устойчивости.
Рифампицин (Rifampycin) - полусинтетический дериват рифамицина-В. Препарат хорошо всасывается в желудочно-кишечном тракте и равномерно распределяется в тканях и жидкостях организма. Благодаря хорошему проникновению через тканевые барьеры, рифампицин проникает в фагоциты и убивает внутриклеточно расположенные микобактерии. МПК рифампицина для чувствительных микобактерий составляет 1мкг/мл. В зависимости от локализации генной мутации возникает различный уровень ЛУ МБТ - отнизкой, с МПК 1 - 2 мкг/мл, до средней устойчивости с МПК 16 - 20 мкг/мл и высокой устойчивостью до 50 мкг/мл и более. Время полувыведения из крови составляет от 1 до 3 ч (Репин,2007).
Этамбутол (Ethambutol) - синтетическийпрепарат, обладающий бактериостатическим свойством. МПК для чувствительных штаммов МБТ составляет 0,5 - 2 мкг/мл, относительная устойчивость с МПК 2 мкг/мл и больше, средняя устойчивость ?? степени - 5 мкг/мл и больше и полная устойчивость ??? степени - 16 мкг/мл и больше (Репин, 2007).
Механизм действия этамбутола основан на блокаде синтеза миколовой кислоты и нарушении формирования бактериальной стенки вследствие ингибиции фермента арабинозинтрансферазы и синтеза арабина, необходимого для соединения миколовой кислоты с пептидогликаном бактериальной клетки.
Механизм устойчивости обусловлен спонтанной мутацией, ведущей к высокому уровню экспрессии мутантного гена, благодаря которому обеспечивается синтез арабина вопреки действию лекарственного препарата. Частота выявления мутантных генов в устойчивых штаммах МБТ составляет 50% (Степашин и др., 1999). Порог устойчивости МБТ также зависит от локализации генной мутации.
Суммарная частота ЛУ в клинических изоляторах - 15,5%, в том числе ЛУ к 2 мкг/мл - 9,2%, к 5 мкг/мл - 6,3% (Репин, 2007).
Пик концентрации препарата в крови после приема тест- дозы 25 мг/кг - 2 - 5 мкг/мл, что превышает порог ЛУ ? и ?? степени (Репин, 2007).
2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
За период 2008-2011 гг. было проведено 3979 посевов клинических изолятов мокроты, полученных от пациентов, находившихся на лечении в Минском областном противотуберкулезном диспансере с диагнозом туберкулеза легких, с целью получения культур микобактерий туберкулеза.
Перед посевом клинического материала на питательную среду с целью выделения культуры M.tuberculosis проводилась обработка материала миколитическими разжижающими веществами с целью удаления белковых масс, деконтаминация образца с целью удаления сопутствующей бактериальной флоры и центрифугирование. Содержимое центрифужной пробирки использовалось для микроскопии и посева на:
а)плотную яичную среду (Левенштейна-Йенсена);
б)агаровую среду ( Миддлбрук 7Н10);
в)систему бульонного культивирования (MGIT).
Затем проводилась инкубация, оценка и учет результатов посева диагностического материала. Для гомогенизации и деконтаминации диагностического материала использовались стандартные методы разжижения и деконтаминации: обработка материала 10% трехзамещенным фосфорнокислым натрием.
Методика обработки:
.Исследуемый материал заливали равным объемом 10% трехзамещенного фосфата натрия, плотно закрывали емкость и помещали ее на 10 минут на встряхиватель.
.Пробирку с материалом, залитым деконтаминантом, помещали на 20 часов в термостат при 37 C.
.После этого пробирки, не открывая, уравновешивали, помещали в соответствующую центрифугу и центрифугировали при 3000 g в течение 15 минут. При указанном режиме происходит осаждение 95% присутствующих в материале микобактерий.
.Надосадочную жидкость отбирали стерильной пипеткой на 5-10 мл и переносили ее в емкость с дезинфицирующим раствором, оставляя в каждой пробирке 1,2-1,5 мл осадка.
.Использованную пипетку опускали в емкость с дезинфицирующим раствором.
.К осадку стерильно добавляли несколько капель 6% соляной кислоты до получения нейтрального значения рН, определяемого индикаторной бумажной полоской.
.Пробирку с осадком помещали в штатив в порядке регистрационных номе