Geum.ru

Работа студентов материалы 58-й научной студенческой конференции

Вид материалаДокументы

Содержание


Применение пцр для определения пола
Сезонные изменения активности
Влияние световых режимов и гормонов
Подобный материал:
1   ...   46   47   48   49   50   51   52   53   ...   67

Секция молекулярной биологии, биологической
и органической химии

^ ПРИМЕНЕНИЕ ПЦР ДЛЯ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ПОЛА
ВОРОБЬИНЫХ ПТИЦ

Токарева Н. — студ. 4 курса
Научный руководитель — докт. биол. наук, проф. Немова Н. Н.


В экологических исследованиях, посвященных изучению демографической структуры популяций и механизмов адаптации птиц к изменяющимся условиям среды, как правило, необходимо точное определение пола взрослых особей и птенцов. Однако у видов с незначительным или отсутствующим половым диморфизмом, а также у большинства неоперившихся птенцов идентификация пола вызывает значительные затруднения (Соколов, Высоцкий, 2001). Для решения этой проблемы в последние годы успешно используется метод полимеразной цепной реакции (ПЦР), который имеет ряд преимуществ перед другими методами определения пола (например, проточной цитометрией): точность, необходимость для анализа малого количества биологического материала, быстрота получения результатов, экономичность.

Учитывая вышесказанное, определение пола птиц отряда Воробьиные рода Phylloscopus проводили с помощью амплификации гена хромохеликазы ДНК (CHD). ДНК выделяли из перьев птенцов 11 гнезд трех видов Phylloscopus, согласно протоколу (Mikhailova, Johannesson, 1998). ПЦР проводили по стандартной методике с геноспецифичными праймерами, фланкирующими ген CHD (Соколов, Высоцкий, 2001). Продукты амплификации разделяли в агарозном геле, окрашивали бромистым этидием и визуализировали в проходящем УФ свете.

На электрофореграмме ДНК самцов обнаруживается только одна полоса, самок — две. В геноме птиц существует две копии CHD гена: одна расположена на Z-хромосоме, другая — на W-хромосоме, причем длина внутреннего интрона различается у двух копий этого гена.

Установлено, что из исследованных 52 птенцов 14 являлись самками, 36 — самцами, у двух птенцов пол определить не удалось. Таким образом, используемый метод ПЦР для идентификации пола птиц показал, что в выводках Phylloscopus trochilus преобладают самцы, в выводках Phylloscopus sibilatrix и Phylloscopus collybita количество самок и самцов примерно одинаково. Полученные результаты имеют предварительный характер и дальнейшие исследования позволят получить дополнительную информацию о соотношении полов в выводках и механизмах адаптации этих видов птиц к изменяющимся условиям среды.

^ СЕЗОННЫЕ ИЗМЕНЕНИЯ АКТИВНОСТИ
АНТИОКСИДАНТНЫХ ФЕРМЕНТОВ
В ОРГАНАХ НОРОК РАЗНЫХ ОКРАСОВ

Горлякова Н. — студ. 4 курса
Научный руководитель — канд. биол. наук, доц. Осташкова В. В.


Одной из особенностей норок, как и большинства пушных животных, является сезонность их жизненного цикла, четкая приуроченность периодов размножения к определенному времени года и связанная с этим динамика изменений в ряде физиологических систем. В практике звероводства были выведены норки различных окрасов (генотипов). Основным признаком для отбора служил цвет меха животных. В некоторых случаях, в связи со сцепленным наследованием цвета меха и других признаков, были получены окрасы норок, отличающиеся как повышенной, так и пониженной устойчивостью к различным заболеваниям, с измененными репродуктивными свойствами и т. д. Влияние факторов генотипа и сезона на активность антиоксидантных ферментов (АОФ) ранее не изучалось.

Целью настоящей работы было изучение влияния сезона на активность АОФ в органах норок разных окрасов. Эксперимент проводился по следующей схеме: производились осенние и весенние забои норок (ЗАО «Пряжинское»), причем осенью брались стандартный, серебристо-голубой и сапфировый окрасы, а весной — стандартный, серебристо-голубой и деми-буфф окрасы; были взяты образцы тканей печени, почек, сердца, селезенки, легких и скелетной мышцы.

В результате проведенного эксперимента было установлено, что фактор сезона оказывал достоверно большее влияние на исследованные показатели, чем фактор окраса. Сезонные изменения были отмечены во всех органах, кроме легкого, заключались в основном в весеннем повышении активности каталазы и были наиболее выражены у серебристо-голубых норок. Осенью самые высокие значения активности СОД отмечались в печени, а весной — в почках. В осенний период наибольшее число различий в изученных показателях наблюдалось между сапфировым и серебристо-голубым окрасами. Весной различия в активности АОФ между норками разных окрасов были незначительны.

^ ВЛИЯНИЕ СВЕТОВЫХ РЕЖИМОВ И ГОРМОНОВ
ЭПИФИЗА НА АКТИВНОСТЬ АНТИОКСИДАНТНЫХ
ФЕРМЕНТОВ В ОРГАНАХ КРЫС РАЗНОГО ВОЗРАСТА

Федорова А. — студ. 5 курса
Научный руководитель — докт. биол. наук, проф. Илюха В. А.


На позвоночных животных свет влияет через закономерные изменения длины дня и ночи. Реакция животных на изменение световых режимов обусловлена работой эпифиза, основным гормоном эпифиза является мелатонин (МТ). Помимо важных физиологических функций, для МТ выявлены антиоксидантные свойства как in vivo, так и in vitro. До настоящего времени влияние МТ на антиоксидантные ферменты (АОФ) при различных световых режимах не изучалось.

Целью настоящей работы было изучение действия МТ и эпиталона при различных световых режимах на ферментное звено антиоксидантной системы (АОС) в органах крыс разного возраста. Эксперименты были поставлены на крысах линии ЛИО (Санкт-Петербургский институт онкологии), которые после месячного возраста в случайном порядке были разделены на четыре группы в зависимости от светового периода: естественное освещение, чередующееся освещение (12 свет, 12 часов темнота), постоянное освещение, постоянная темнота. Животные первых трех групп с возраста 4 месяцев были разделены на три подгруппы: первая получала с водой МТ, вторая — синтетический аналог эпиталомина (эпиталон), стимулирующий синтез МТ. В 6, 12, 18 и 24-месячном возрасте животных декапитировали для взятия образцов тканей печени, почек, сердца, селезенки, легких и скелетной мышцы.

В результате проведенного эксперимента было установлено, что максимальное количество изменений под действием изучаемых факторов, таких как световые режимы, вводимые препараты и возраст животных, отмечено для печени и почек крыс всех возрастов, причем в большей степени изменениям подвержена активность каталазы. Наиболее чувствительными к экспериментальным воздействиям оказались животные в возрасте 12 и 18 месяцев. В ходе исследования отмечена зависимость действия вводимых препаратов от световых режимов. Наибольшее влияние МТ и эпиталон оказывали на активности АОФ в группе, содержавшейся при постоянном освещении. Постоянная темнота и вводимые препараты, как правило, однонаправленно влияли на изучаемые показатели.

Работа выполнена при финансовой поддержке РФФИ (грант № 04-04-49168).