Geum.ru

Программа фундаментальных исследований Президиума ран

Вид материалаПрограмма

Содержание


Caйт-специфическая деградация основного белка миелина аутоантителами при нейродегенеративных заболеваниях человека и у модельных
Экспрессия рецепторов к дофамину при нейродегенеративных заболеваниях – гиперпролактинемии и болезни паркинсона
Институт биологии гена РАН, Москва Институт молекулярной биологии им. В.А. Энгельгардта РАН, Москва
Подобный материал:
1   2   3   4   5   6   7   8   9   ...   72
^

CAЙТ-СПЕЦИФИЧЕСКАЯ ДЕГРАДАЦИЯ ОСНОВНОГО БЕЛКА МИЕЛИНА АУТОАНТИТЕЛАМИ ПРИ НЕЙРОДЕГЕНЕРАТИВНЫХ ЗАБОЛЕВАНИЯХ ЧЕЛОВЕКА И У МОДЕЛЬНЫХ ЖИВОТНЫХ




А.Г.Габибов1), Н.А.Пономаренко1), О.М.Дурова1) A.А.Белогуров1), А.В.Решетняк1), Г.Б.Телегин3), В.К.Мисиков2), В.Д.Кнорре1), А.И.Алехин4), Н.Г.Гончаров4)

1) Институт биоорганической химии им. М.М. Шемякина и Ю.А. Овчинникова РАН, Москва 2) Московский областной научно-исследовательский клинический институт им. М.Ф. Владимирского, Москва, 3)Филиал института биоорганической химии им. М.М. Шемякина и Ю.А. Овчинникова РАН, Пущино, 4)ЦКБ РАН, Москва


Развитие нейродегенеративных процессов зачастую сопровождается присутствием выраженной аутоиммунной компоненты. В последние годы, несмотря на неопровержимые данные о приоритете Т-клеточного ответа в развитии такого известного патологического процесса, как рассеянный склероз, появились данные о роли В-клеточной компоненты. Аутоантитела к нейроантигенам и их фрагментам, таким как МВР, МОG и другие являются характеристическим прогностическим критерием развития процесса. Факторы, приводящие к массовой демиелинизации нервных волокон при рассеянном склерозе (РС), неизвестны. Одна из наиболее обоснованных теорий патогенеза отводит основную роль в разрушении миелина воспалительному процессу, связанному с аутоиммунными реакциями. Роль «первичного звена», тригерного механизма запуска процесса остается невыясненной. Электронная микроскопия высокого разрешения продемонстрировала значительное скопление аутоантител к основному белку миелина в районах демиелинизации у больных рассеянным склерозом и на моделях животных, характеризующихся развитием экспериментального аллергического энцефаломиелита (ЕАЕ), патологии близкой к РС. Несколько лет назад в ходе работы над данной программой нами было выдвинуто предположение о роли аутоантител в каталитической деградации нейрональных антигенов. В этой связи участие аутоантител к основному белку миелина, обладающих специфической протеолитической активностью по отношению к антигену может играть роль в патогенезе заболевания. В прошлые годы нашим коллективом было однозначно показано наличие подобной активности в сыворотках больных рассеянным склерозом у мышей линии SJL, развивающих ЕАЕ. Нами показана корреляция антител-опосредованной каталитической активности со стадией инвалидизации (EDSS). Исследовалась специфичность деградации МВР как аутоантигена в ходе взаимодействия с аутоантителами. В текущем году количество больных с нейрональными заболеваниями, исследованных нами на наличие каталитической активности аутоанетител существенно расширилось. Нами была составлена когорта больных с РС (85), инсультом (12), миелопатией (15), болезнью Паркинсона (2) и здоровых доноров (35). С помощью сконструированных рекомбинантных субстратов удалось выработать количественные параметры наблюдаемой in vitro реакции деградации МВР. В текущем годы мы сконцентрировали также свое внимание на исследованиях модельных животных, развивающих ЕАЕ. Эффективные модели РС необходимы для разработки новых подходов к терапии этого заболевания, в частности с применением новых физиологически активных соединений пептидной природы. Анализ иммунного ответа в группе животных показал, что наиболее адекватный ответ на эпитопы МВР, сравнимый с пациентами с РС развивают мыши DA. Нами получен набор петидов, фрагментов МВР и разработаны схемы тестирования их в качестве потенциальных лекарственных средств.
^

ЭКСПРЕССИЯ РЕЦЕПТОРОВ К ДОФАМИНУ ПРИ НЕЙРОДЕГЕНЕРАТИВНЫХ ЗАБОЛЕВАНИЯХ – ГИПЕРПРОЛАКТИНЕМИИ И БОЛЕЗНИ ПАРКИНСОНА



С.Г. Георгиева1,2), А.Н. Краснов1), Ю.В. Николенко1), Н.А. Максимычев1)

^
1)Институт биологии гена РАН, Москва
2) Институт молекулярной биологии им. В.А. Энгельгардта РАН, Москва



В основе патогенеза ряда тяжелейших социально значимых нейродегенеративных заболеваний, таких как гиперпролактинемия и болезнь Паркинсона, лежит спонтанная дегенерация дофаминергических нейронов, локализованных в различных отделах мозга и участвующих в регуляции различных физиологических функций. Первые 20-30 лет болезнь развивается без проявления клинических симптомов, что делает крайне трудным ее выявление. В то же время выявление заболевания на преклинической стадии является крайне важным. Предполагается, что отсутствие клинических симптомов в первые десятилетия развития заболевания объясняется включением механизмов пластичности мозга, обеспечивающих компенсацию функциональной недостаточности дегенерирующих ДА-ергических нейронов. Одним из компенсаторных механизмов при дегенерации ДА-ергических нейронов может быть изменение уровня экспрессии рецепторов к ДА.

Целью выполняемого проекта является проведение сравнительного анализа экспрессии рецепторов к ДА в периферических клетках-мишенях у больных и на модельных системах. Оценить изменение уровня экспрессии рецепторов к ДА в лимфоцитах у пациентов в ранней клинической стадии болезни Паркинсона при дегенерации ДА-ергических нейронов нигростриатной системы. На первом этапе проекта была создана оптимальная тест система для определения уровня транскрипции генов рецепторов к ДА в лимфоцитах с использованием ПЦП в режиме реального времени. Были подобраны условия выделение РНК из венозной крови, подобраны оптимальные условия ПЦР – реакции. Далее был определен нормальный уровень транскрипции генов рецепторов к ДА в лимфоцитах у группы контрольных (здоровых) лиц. Был определен уровень мРНК рецепторов к ДА в лимфоцитах у больных. Сделан предварительный вывод о корреляции между изменением уровня экспрессии рецепторов к ДА и возникновением заболевания. В дальнейшем предполагается провести исследования на более большом количестве пациентов и здоровых лиц (сравнить экспрессию у разных возрастных групп и в зависимости от пола).