Д. Ф. Августинович Изменение серотонергической активности мозга в процессе развития тревожной депрессии, индуцированной социальными конфронтациями (диск)
| Вид материала | Документы |
- Литвиненко Софья Владимировна, Институт научной информации и мониторинга рао e-mail:, 501.83kb.
- Киев Гоголь «петербургский», 179.43kb.
- Реализация комплексной программы гимназии осуществляется по нескольким направлениям:, 92.38kb.
- Изменение ферментативной активности нативного и иммобилизованного солода под влиянием, 360.17kb.
- Становление младших школьников как субъектов учебной деятельности в процессе конструктивных, 104.18kb.
- Классические законы г. Менделя, 24318.4kb.
- Методические аспекты использования приемов развития познавательного интереса и творческой, 454.77kb.
- Д. И. Дубровский Широкий комплекс вопросов об отношении психики к деятельное головного, 361.54kb.
- Библиотека центра «Академия Успеха», 2852.54kb.
- Статья отнесена к разделу, 65.12kb.
СИНТЕЗ ПЛАЗМОМЕМБРАННОГО АТФ В ПРОЦЕССЕ ПЕРЕДАЧИ СИГНАЛОВ НЕКОТОРЫМИ ФАКТОРАМИ РОСТА И ЦИТОКИНАМИ ЧЕРЕЗ ПЛАЗМАТИЧЕСКИЕ МЕМБРАНЫ КЛЕТОК-МИШЕНЕЙ ИЗ РАЗЛИЧНЫХ ОПУХОЛЕЙ ЧЕЛОВЕКА
Институт хирургии им. А.В.Вишневского РАМН, Москва
В опухолевых клетках наблюдаются нарушения протекающих в норме процессов регуляции роста. Наиболее характерным при этом является аутокринный тип регуляции, когда клетки для поддержания своего роста переходят на самообеспечение, постоянно транслируя собственно-секретируемые ростовые факторы. Нами ранее показано, что в ответ на действие 20 полипептидных гормонов, факторов роста, митогенов и цитокинов на плазматических мембранах 25 типов животных клеток-мишеней в аэробных условиях синтезируется АТФ из неорганического фосфата и АДФ при участии цианиднечувствительной протонофорной NADF-связанной редокс-цепи и ионов Na+. Исследован механизм синтеза АТФ в обогащенных плазматическими мембранами частицах, изолированных из тканей злокачественных опухолей различной локализации (желудок, кишечник, легкое, поджелудочная железа, забрюшинные внеорганные образования) и изучена роль этого АТФ в процессе передачи туморогенного сигнала. Исследовано влияние нескольких факторов роста, рецепторы которых содержат тирозинкиназы: EGF,FGF, TNF-a, IL-2, NGF, AFP и инсулин. Установлено, что уровень плазмомембранного синтеза сигнального АТФ значительно превышает таковой в нормальных тканях. Увеличение накопления в инкубационной среде сигнального АТФ при использовании ингибиторов активности рецепторных тирозинкиназ факторов роста- тирфостина 25, ФСБА и кварцетина дает нам основание утверждать, что имеется сопряжение синтеза сигналтрансдуцирующего АТФ на плазматической мембране клетки и его утилизации в процессе передачи сигналов факторами роста. Исследования по применению целого ряда ингибиторов тирозиновых киназ перспективны в плане разработки новых фармпрепаратов, направленных на прерывание передачи туморогенного сигнала и на управление сигналами к дифференцировке клеток.
В.В. Долгов, Д.Ф. Августинович., О.В. Алексеенко, Л.А. Корякина,
Н.К.Попова, М.А.Гилинский
ПРОБЛЕМА МНОЖЕСТВЕННОСТИ МОНОАМИНОКСИДАЗ: ЭФФЕКТЫ ГЕНЕТИЧЕСКОГО НОКАУТА МАО А
Институт цитологии и генетики СО РАН, Новосибирск
Институт физиологии СО РАМН, Новосибирск
Успехи молекулярной биологии в создании нокаутных животных, лишенных специфического гена и соответствующего белка, открыли широкие перспективы для изучения компенсаторных механизмов наследственных нарушений медиаторных систем мозга. На трансгенных мышах линии Tg8 с генетическим нокаутом моноаминоксидазы типа А (МАОА) (Cases et al.,1995), являющейся основным ферментом катаболизма серотонина и одним из основных ферментов катаболизма дофамина, были определены в отделах мозга уровень серотонина, дофамина и продуктов их окислительного дезаминирования - 5-гидроксииндолуксусной кислоты (5-ГИУК) и 3,4 дигидроксифенилуксусной кислоты (ДОФУК). У мышей, лишенных МАОА, установлено резкое снижение по сравнению с мышами исходной линии C3H/HeJ уровня ДОФУК в стриатуме, гипоталамусе, среднем мозге и гиппокампе при отсутствии существенных изменений в концентрации дофамина. Компенсация нарушенного окислительного дезаминирования дофамина при генетическом нокауте МАОА, по-видимому, происходит путем увеличения активности второго пути метаболизма дофамина - О-метилирования, катализируемого КОМТ. В то же время, изменения уровня серотонина и ГИУК были отмечены в большинстве изученных структур, а показатель катаболизма серотонина ( 5-ГИУК/ серотонин) снизился вдвое во всех структурах мозга. Сохранение, тем не менее, окислительного дезаминирования серотонина при отсутствии основного фермента его катаболизма вновь поднимает вопрос о множественности МАО (Горкин, 1963).
Предположено, что при генетическом нокауте МАО А индуцируются “молчащие” гены, вызывающие посттранскрипционную трансформацию второй основной формы МАО - МАО Б, что ведет к появлению новых форм МАО с более широкой субстратной специфичностью, чем “классическая” МАО Б, для которой у нормальных мышей серотонин субстратом не является.
Е.И.Дроздова, А.С.Пивоваров
КОНТРОЛЬ Na,K-НАСОСОМ ПОСТТЕТАНИЧЕСКОГО ВОЗРАСТАНИЯ ХОЛИНОЧУВСТВИТЕЛЬНОСТИ НЕЙРОНОВ ВИНОГРАДНОЙ УЛИТКИ
Московский государственный университет им. М.В.Ломоносова
В ряде поведенческих работ показано участие Na,K-насоса в обучении (Gibbs, Barnett, 1976; Mizumori et al., 1987; Xia et al., 1997). В представленной работе исследовали роль Na,K-насоса в посттетанической потенциации холиночувствительности командных нейронов оборонительного поведения виноградной улитки - клеточной модели, имитирующей возрастание эффективности синаптической передачи при обучении.
Исследования проводили на полуинтактном препарате “ЦНС-висцеральный мешок” виноградной улитки Helix lucorum. Ионофоретически подводимый ацетилхолин вызывал в нейроне входящий ток, который регистрировали методом двухэлектродной фиксации потенциала на мембране. Ацетилхолин апплицировали на сому нейронов ЛПа3 и ППа3 с интервалом 10 минут до и после электрического раздражения nervus intestinalis серией прямоугольных импульсов (5,5-10,5 мА; 0,1-0,3 с; 1-5 имп/с; 1-2 мин). Тетаническое электрическое раздражение афферентного входа вызывало возрастание (в среднем, на 17,7±0,1%, p<0,05) в течение 1 часа холиночувствительности нейронов ЛПа3 и ППа3. Максимальный потенциирующий посттетанический эффект (на 32,9%) наблюдали через 30 мин после окончания тетанического раздражения. После внеклеточного приложения ингибитора Na,K-насоса уабаина (50-110 mМ, экспозиция 30 мин) не выявлено посттетанического возрастания холиночувствительности. Поскольку ингибитор Na,K-насоса уабаин препятствует развитию посттетанической потенциации холиночувствительности нейронов, предполагаем участие Na,K-насоса в посттетаническом возрастании холиночувствительности командных нейронов оборонительного поведения виноградной улитки.
Работа поддержана Российским фондом фундаментальных исследований (грант 99-04-48036).
Н.Н. Дыгало, Т.С. Калинина, Н.Ю. Сурнина, Г.Т. Шишкина
Анализ ПоведенЧеских эффектов рецептора нейромедиатора путем антисенс-нокдауна экспрессии его гена
Институт цитологии и генетики СО РАН, Новосибирск
Идентификация и клонирование генов, кодирующих рецепторы нейротрансмиттеров, открыли новые высокоспецифичные подходы для исследования функции этих рецепторов. Один из них - антисенс технология, состоящая в угнетении экспрессии гена-мишени на уровне его мРНК комплиментарным к участку этой мРНК антисмысловым олигонуклеотидом (антисенсом). Эффективность антисенса зависит от его последовательности, выбор которой до сих пор остается, по-существу, эмпирическим. Поэтому непременным является контроль за экспрессией гена-мишени по уровню его мРНК и белка. Кроме того, необходимо также установление специфичности действия антисенса сравнением с влиянием олигонуклеотида случайной последовательности и определением зависимости эффекта от дозы. В наших опытах введенный в область синего пятна ствола головного мозга взрослых крыс антисенс к мРНК альфа2А-адренорецептора (альфа2А-АР) специфически снижал уровень этого транскрипта, а также дозозависимо угнетал экспрессию рецепторного белка в этом отделе мозга. Альфа2А-АР являются ауторецепторами норадренергических нейронов, и снижение их экспрессии приводило к изменениям уровня норадреналина в мозге. Нейрохимические сдвиги сопровождались отклонениями в поведении животных в приподнятом крестообразном лабиринте: повышением количества входов в открытые рукава и временем нахождения в них, что свидетельствует об анксиогенной функции альфа2А-АР ствола головного мозга.
Работа поддержана грантами РФФИ N 98-04-49651 и N 99-04-50022.
В.Е. Дьяконова
ИЗОЛИРОВАННЫЙ СЕРОТОНИНОВЫЙ НЕЙРОН:
ИМПУЛЬСАЦИЯ ЗАВИСИТ ОТ СИНТЕЗА ТРАНСМИТТЕРА
Институт биологии развития им.Н.К.Кольцова РАН, Москва
Электрическая активность полностью изолированных (сома и проксимальный участок отростка) серотонинергических нейронов (ПедА-кластер) моллюска Lymnaea stagnalis изменялась при воздействиях на последнюю стадию синтеза серотонина. Непосредственный предшественник серотонина, 5-гидрокситриптофан (5-НТР, 0.025-0.1 мМ), оказывал сильное возбуждающее действие как на активные, так и на молчащие серотониновые нейроны, тогда как ингибитор синтеза серотонина м-гидроксибензилгидразин (МВН, 0.025-1 мМ) подавлял электрическую активность. Возбуждающее действие 5-НТР не наблюдалось при ингибировании превращения 5-НТР в серотонин или при замене 5-НТР на предшественник дофамина, диоксифенилаланин (L-DOPA, 0.1 мМ). 5-НТР не возбуждал несеротонинергические нейроны. Блокатор везикулярного захвата монаминов резерпин (0.05 мМ) достоверно снижал возбуждающее действие 5-НТР. Результаты указывают на то, что в изолированном серотонинергическом нейроне моллюска имеется механизм, обеспечивающий зависимость уровня импульсации от уровня синтеза нейротрансмиттера. Вероятно, 5-НТР, повышая синтез серотонина, вызывает увеличение везикулярного выброса последнего в области серотониновых рецепторов, что приводит к возбуждению нейрона и дальнейшему увеличению выброса. Судя по тому, что предшественник деполяризует и заводит также неактивные, молчащие изолированные нейроны, и эти эффекты также снимаются резерпином, активация везикулярной секреции серотонина повышением его синтеза, по-видимому, может осуществляться независимо от того, генерируются или нет потенциалы действия. Гранты РФФИ 99-04-48411 и IR-97-0798.
Т.Л. Дьяконова
СЕРОТОНИН И ОКСИД АЗОТА ПОВЫШАЮТ И СИНХРОНИЗИРУЮТ АКТИВНОСТЬ СЕРОТОНИНОВЫХ НЕЙРОНОВ
Институт биологии развития им. Н.К.Кольцова РАН, Москва.
Исследовалось действие серотонина и доноров оксида азота (NO) на серотониновые нейроны мозга виноградной улитки Helix lucorum. Серотониновые нейроны прижизненно метили токсическим аналогом серотонина 5,7-дигидрокситриптамином (5,7-ДОТ). Были получены следующие результаты.
1. На всех исследованных серотониновых нейронах (более 60) серотонин (0,02-0,05 мМ) вызывал дерполяризацию, повышал уровень импульсной активности и активировал синхронный возбуждающий синаптический приток, в том числе ВПСП пачечного типа, которые обуславливали синхронную пачечную активность во всех нейронах. 5,7-ДОТ (0,1-0,5 мМ) подавлял действие серотонина. Эффект 5,7-ДОТ развивался быстро, был обратим и сходен с действием антагонистов серотониновых рецепторов.
2. Доноры NO нитропруссид (0,1-1 мМ), нитрозоцистеин (0,05-0,1 мМ) и нитрит натрия (1-2 мМ) оказывали такое же действие на все серотониновые нейроны, как и серотонин: повышали их активность и синхронизировали ее за счет активации синхронных синаптических входов.
3. Действие серотонина было NO-зависимым, оно значительно подавлялось монометиларгинином (NMMA, 1 мМ) - блокатором эндогенного синтеза NO, и усиливалось в присутствии доноров NO. NMMA снижал также фоновую активность серотониновых нейронов. Последнее свидетельствует об участии NO в регуляции тонической активности этих клеток.
4. Эффекты доноров NO не зависели от эндогенного синтеза NO (не подавлялись действием NMMA), однако активация ими синхронных пачечных входов подавлялась 5,7-ДОТ, т.е. была, по-видимому, серотонин-зависимой.
Эти результаты показывают, что серотонинергическая система улитки может самоактивироваться по механизму положительной обратной связи через повышение уровня серотонина, такой механизм ранее был показан и другими авторами для отдельных серотониновых нейронов других видов моллюсков. NO имитирует и усиливает возбуждающее и синхронизирующее действие серотонина. Обсуждаются механизмы взаимодействия серотонина и NO.
Гранты РФФИ 99-04-48411 и IR-97-0798.
О.В. Егорова, К.В. Анохин
РОЛЬ СТЕРОИДНЫХ ГОРМОНОВ В СОЗРЕВАНИИ ВИДОСПЕЦИФИЧЕСКОГО ПОВЕДЕНИЯ СЛЕДОВАНИЯ У ЦЫПЛЯТ
Институт нормальной физиологии им. П.К.Анохина РАМН, Москва
Новорожденные цыплята одинаково успешно обучаются следовать и за объектом, имитирующим зрительные признаки натуральной матери (чучелом курицы), и за достаточно "искусственным" объектом (например красным вращающимся кубом) - свойство лежащее в основе феномена импринтинга. Однако после определенных видов сенсорной стимуляции, не несущей какой-либо специфической информации о зрительных характеристиках курицы, у цыплят развивается выраженное поведенческое предпочтение чучела курицы (Bolhuis et al., 1985). Подобные виды воздействий, потенциирующих развитие видоспецифического узнавания, были обозначены термином “прайминг” (Bolhuis et al., 1985). В настоящей работе проверялась гипотеза, что эффекты прайминга на развитие механизмов сенсорного восприятия могут опосредоваться повышением уровня стероидных гормонов в организме цыпленка.
Цыплят в возрасте 1 суток, не имеющих зрительного опыта, подвергали двум видам праймирующего воздействия: звуковой стимуляции в темноте в течение 4 сессий по 45 мин. или помещению в темноте в свободно вращающееся беличье колесо (2 сессии по 45 мин.). Через 24 часа после окончания стимуляции предпочтение цыплят тестировали с модели выбора межу одновременно предъявляемыми чучелом курицы (“естественный” объект) и красным кубом (“искусственный” объект). Оба вида праймирующего воздействия вызывали достоверное увеличение предпочтения чучела курицы. Введение перед началом прайминга антагониста андрогеновых рецепторов флугамида (125 мг/кг), предотвращало вызванное праймингом предпочтение цыплят к чучелу курицы. Инъекция цыплятам в возрасте 1 суток тестостерона (125 мкг/кг) или кортикостерона (325 мкг/кг) вызывала такое же развитие предпочтения чучела курицы, как и поведенческая стимуляция. Результаты этих экспериментов позволяют заключить, что праймирующие эффекты воздействий внешней среды на развитие видоспецифического узнавания могут опосредоваться и воспроизводиться действием стероидных гормонов в организме цыпленка.
М.В. Елшанская, А.И. Соболевский, Б.И. Ходоров
КОЛичественное описание блокады NMDA каналов тетраалкиламмониевыми соединениями
Институт общей патологии и патофизиологии РАМН, Москва
Блокада NMDA-каналов изолированных пирамидных нейронов гиппокампа крысы тетраалкиламмониевыми соединениями (ТАА) была исследована методом пэтч-кламп в конфигурации “целая клетка”. Токи через NMDA-каналы вызывали быстрой аппликацией 100 мкМ аспартата (Аsp) в без-Mg2+ среде, содержащей 3мкМ глицин. Блокада ТАА NMDA каналов усиливалась с увеличением концентрации ТАА и гиперполяризацией клеточной мембраны. Показано, что значительное влияние на соотношение величины полублокирующей концентрации IC50, характеризующей видимую эффективность подавления NMDA тока блокатором, и величины равновесной константы диссоциации КD оказывает взаимодействие блокатора с воротным механизмом NMDA канала. Для наибольших по размеру ТАА, таких как тетрапентиламмония (TPeA) и тетрабутиламмония (ТВА), препятствующих закрыванию и десенситизации канала, отношение IC50/KD оказалось гораздо больше, чем для меньших по размеру ТАА, тетраэтиламмония (TЕA) и тетрапропиламмония (ТРА), существенно не влияющих на воротные процессы. Крутизна зависимости стационарного блока от концентрации блокатора, nHill, уменьшалась с увеличением размера блокатора и для самого большого по размеру ТАА, тетрапентиламмония, была значительно меньше 1 (0.65). Для объяснения зависимости nHill от размера блокатора была предложена модель “экранирования”, предполагающая существование неблокирующего участка связывания блокатора, взаимодействие одной молекулы блокатора с которым препятствует достижению другой молекулой блокатора блокирующего места. Кинетическое моделирование позволило предположить, что эффект экранирования может обусловливать (помимо влияния на nHill) дополнительное увеличение значения полублокирующей концентрации IC50 по отношению к значению KD, являющимся истинной мерой эффективности связывания блокатора с каналом. Сопоставление оцененных с помощью кинетического моделирования величин КD показало, что разница в энергии связывания ТАА с NMDA каналом зависит как от взаимодействия с электрическим полем мембраны, так и от гидрофобности блокатора, но не от его размера. Энергия гидрофобного взаимодействия, приходящаяся на 1 моль алкильных групп -СН2- ,составила 486 ± 46 кал/моль.
Работа поддержана РФФИ, гранты № 99-04-48770 и № 99-04-49200.
П.А.Ерохов
ДЕЙСТВИЕ МИАНСЕРИНА НА АКТИВНОСТЬ Na,K-ATPазы МОЗГА КРЫС
Институт биологии развития им. Н.К.Кольцова РАН, Москва
Исследовано влияние миансерина на активность Na,K-ATPазы синаптических мембран мозга крыс. Миансерин - агонист альфа2-адренорецепторов и 5НТ-рецепторов и антагонист альфа1-адренорецепторов. Мы хотели выяснить, передается ли воздействие миансерина с рецепторов на Na,K-ATPазу.
При действии миансерина на синаптические мембраны мозга крыс было обнаружено, что активность Na,K-ATPазы снижается, а активность неспецифических мембранных ATPаз остается без изменений. Кинетический анализ показал, что эффект имеет сложный характер и не описывается стандартными уравнениями для системы лиганд-рецептор. Наблюдается по крайней мере два центра связывания, вызывающих ингибирование Na,K-ATPазы.
При концентрации миансерина 1мМ наступает почти полное ингибирование Na,K-ATPазы, а при 50 мкМ ингибирование составляет около 10% активности фермента. Для выяснения того, через какие рецепторы происходит такое воздействие, мы использовали агонисты адренорецепторов изадрин и клонидин и агонист 5НТ-рецепторов серотонин на фоне миансерина (0,25 мМ), вызывавшего ингибирование Na,K-ATPазы приблизительно на 50%. Не было обнаружено никакого влияния этих препаратов на ингибирование фермента. Предполагается, что эффект миансерина на Na,K-ATPазу не связано с его действием на указанные рецепторы, а сложная кинетическая кривая позволяет предположить, что миансерин ингибирует Na,K-ATPазу за счет взаимодействия с несколькими разнородными центрами на мембране и, возможно, на самом ферменте.
Работа выполнена при поддержке РФФИ (грант N99-04-49141)
И.С. Захаров, П.М. Балабан , Н.И. Браваренко
НЕЙРОМОДУЛЯЦИЯ СИНАПТИЧЕСКОЙ ПЛАСТИЧНОСТИ У ВИНОГРАДНОЙ УЛИТКИ
Институт высшей нервной деятельности и нейрофизиологии РАН, Москва
В педальных ганглиях виноградной улитки идентифицированы серотонинсодержащие нейроны, модулирующие синаптические входы нейронов, участвующих в оборонительном поведении. Стимуляция этих нейронов приводила к фасилитации спайкового ответа командных нейронов на болевые стимулы, которая определяется как увеличением возбудимости этих клеток, так и ростом амплитуды ВПСП (сходно с эффектом аппликации серотонина в омывающий раствор). Наиболее отчетливые подкрепляющие свойства обнаружены у одного гигантского нейрона(Пд4), отростки которого достигают нейропиля париетальных ганглиев. Использование в качестве подкрепления внутриклеточной активации этого нейрона (Пд4) в сочетании с тестовым стимулом привело к достоверному увеличению ответов интернейронов на тестовый стимул по сравнению с величиной ответов при несочетанном нанесении тех же стимулов. Активность другого нейрона педального серотонинергического кластера (Пд2) участвует преимущественно в модуляции реакции втягивания щупалец и головы животного, а также активирует значительную часть всего серотонинергического кластера. Синергичная активация всей группы серотонинергических нейронов, наблюдающаяся в ответ на используемый в поведенческих экспериментах подкрепляющий стимул, обусловлена системой связей между ними, в том числе и электрических.
Таким образом, "подкрепляющий" для данной формы поведения нейрон имеет возможность активироваться в ответ на любой опасный для животного стимул за счет вовлечения многих элементов группы.
Работа поддержана РФФИ (гранты 98-04-48948 и 99-04-48756).
Е.И.Захарова1, М.М.Свинов2
ХОЛИНЕРГИЧЕСКИЕ СИСТЕМЫ НЕОКОРТЕКСА КРЫС В ОСТРЫЙ ПЕРИОД ГИПОКСИЧЕСКИХ ВОЗДЕЙСТВИЙ
1Институт высшей нервной деятельности и нейрофизиологии РАН, Москва
2Институт фармакологии РАМН, Москва
В субфракциях “легких” (C) и “тяжелых” (D) синаптосом неокортекса крыс с разной устойчивостью к гипоксии исследовали функциональное состояние, соответственно, синапсов холинергических проекций из крупноклеточных базальных ядер (КБЯ) и синапсов холинергических внутрикорковых нейронов в период острой гипобарической гипоксии (“подъем” на высоту 11000 м со скоростью 180 м/сек) и через 3 часа неполной хронической ишемии мозга (окклюзия сонных артерий). Холинергическую функцию оценивали по активности мембраносвязанных (м) и водорастворимых (ц) форм холинацетилтрансферазы (ХАТ) и ацетилхолинэстеразы (АХЭ) и активности Na,K-АТФазы. Как при гипоксии, так и при ишемии, возрастала активность м-АХЭ и Na, K-АТФазы, а также м- или ц-ХАТ, что свидетельствует об усилении холинергических влияний в неокортексе крыс в острый период гипоксических воздействий. Активация холинергической функции через малоизученный механизм вовлечения м-ХАТ может ,по данным, литературы отражать накопление Ca++ в соответствующих холинергических структурах, что характерно для клеток, переживающих гипоксию. У низкоустойчивых к гипоксии крыс реакция м-ХАТ наблюдалась в синапсах как холинергических нейронов неокортекса, так и нейронов КБЯ, а у высокоустойчивых к гипоксии крыс – только в синапсах нейронов неокортекса.
Параллельно проводилось исследование ультраструктуры неокортекса, которое выявило набухание синапсов, а также набухание в таких синапсах митохондрий и концентрацию везикул в области активных зон. Такая ультраструктура синапсов отражает их сильную активацию, а набухание митохондрий указывает на нарушение в этих структурах обмена Ca++. Концентрация синапсов такого типа была выше в тех экспериментальных группах крыс, в которых активировалась м-ХАТ. Предполагается, что активация м-ХАТ может выступать в качестве патогенного фактора, приводящего к развитию ишемической патологии мозга.
Работа поддерживается грантом РФФИ.
В.А. Золотарев., Э.Т. Вэй1, Д.П.Дворецкий