Десятая Всероссийская медико-биологическая конференция молодых исследователей

Вид материала

Документы

Содержание Генетические взаимосвязи ротавирусов Эндокринный статус местных и приезжих жителей европейского севера, работающих Изучение влияния мексидола на процесс ремоделирования магистральных сосудов Интерлейкины как новый сывороточный биомаркер для ранней диагностики рака простаты Изучение механизмов развития Метод культивирования клеток в системе двух жидких фаз и выделение компонентов интактного внеклеточного матрикса Факторы, влияющие на выживаемость больных острыми нелимфобластными лейкозами 2Городская клиническая больница № 31. Санкт-Петербург, Россия Материалы и методы. Новый проективный тест возвратных глаголов Характер участия активационных систем мозга у детей дошкольного возраста и шимпанзе при достижении цели, приближающейся с различ

Подобный материал:

• Девятая Всероссийская медико-биологическая конференция молодых исследователей, 5332.7kb.
• Всероссийская игра-конкурс по информатике «Инфознайка 2009» Победитель (480 баллов),, 12.74kb.
• Открытая Всероссийская научная-исследовательская конференция молодых исследователей, 332.34kb.
• Информационное письмо, 44.99kb.
• Научно-практическая конференция молодых исследователей, 94.75kb.
• 12-я Всероссийская научно-практическая конференция молодых ученых, аспирантов и студентов, 68.08kb.
• Xii всероссийская конференция молодых исследователей «шаг в будущее» муниципальное, 206.03kb.
• Конференции: Научная конференция профессорско-преподавательского состава, аспирантов, 2627.01kb.
• Секретариат программы «Шаг в будущее» Почтовый адрес, 1818.72kb.
• ) состоится V всероссийская конференция студентов, аспирантов и молодых учёных «искусственный, 29.67kb.

ГЕНЕТИЧЕСКИЕ ВЗАИМОСВЯЗИ РОТАВИРУСОВ

ЧЕЛОВЕКА И ЖИВОТНЫХ

Н.В. Пономарева, м.н.с.

Нижегородский государственный университет

им. Н. И. Лобачевского

Нижегородский научно-исследовательский институт эпидемиологии и микробиологии им. И.Н. Блохиной. Нижний Новгород, Россия


Ротавирусы группы А (РВ-А), относящиеся к семейству Reoviridae, род Rotavirus, являются основным этиологическим агентом острого гастроэнтерита у детей. Часто обнаруживаются варианты ротавируса, генетически связанные с ротавирусами животных. Проведено секвенирование гена NSP4 15-ти изолятов ротавируса человека различных антигенных типов (G1P[8]-1, G1P[8]-2, G1P[6], G2P[4], G3P[8]-2, G3P[6], G3P[9] и G4P[8]) и одного изолята ротавируса теленка. Определенные нуклеотидные последовательности депонированы в базе данных GenBank/EMBL/DDBJ. Филогенетический анализ последовательности гена NSP4 исследуемых штаммов ротавируса выявил присутствие трех NSP4-генотипов (А, В и С), которые распределились, согласно референтным штаммам, на три геногруппы (Wa, DS-1 и Au-1). В анализируемой выборке обнаружен необычный вариант ротавируса человека с «широким» ЭФ-типом РНК, который имел G3P[9] специфичность и кластеризовался с референтным штаммом Au-1 генотипа NSP4-C, близкородственным ротавирусу кошек. Уровень гомологии последовательностей гена NSP4 составил 97,5%. Это позволяет предположить, что ротавирус G3P[9]-NSP4-C является реассортантом между ротавирусами кошек и человека, возникшим в результате трансмиссии генов. Проведен сравнительный анализ последовательности гена NSP4 российских изолятов ротавируса с последовательностями подобных штаммов, изолированных на разных территориях земного шара. Установлено, что геновариант ротавируса G3P[9]-NSP4-C кластеризуется со штаммом ротавируса человека G3P[9] специфичности, выделенным в Таиланде. Уровень гомологии составил 91,3%. Эти данные могут свидетельствовать о заносе необычных реассортантных вариантов ротавируса на территорию России из стран Юго-Восточной Азии. Оказалось, что другие российские штаммы ротавируса человека G3 специфичности, имеющие P[9] и P[6] генотипы имели генотип NSP4-А и кластеризовались со штаммом ротавируса теленка, выделенным в Н.Новгороде в 2004 году и ротавирусом КРС, выделенным в Италии. Уровень гомологии со штаммом ротавируса теленка составил 89,8 и 92,6 %, соответственно. Уровень гомологии с итальянским штаммом составил 90,4 и 90,8%, соответственно. Данные результаты представляют большой научный интерес, связанный с привнесением генов ротавирусов животных в популяцию ротавирусов человека, а также свидетельствуют о необходимости учета этого явления при разработке ротавирусных вакцин.


ЭНДОКРИННЫЙ СТАТУС МЕСТНЫХ И ПРИЕЗЖИХ ЖИТЕЛЕЙ ЕВРОПЕЙСКОГО СЕВЕРА, РАБОТАЮЩИХ

ВО ВРЕДНЫХ УСЛОВИЯХ

ЦЕЛЛЮЛОЗНО-БУМАЖНОГО КОМБИНАТА

В.А. Попкова, асп.

Институт физиологии природных адаптаций УрО РАН.

Архангельск, Россия


В условиях Севера организм человека постоянно взаимодействует с комплексом эколого-специфических стрессирующих факторов, который формируется из климато-географических особенностей региона и социально-производственной структуры северных территорий. Изначально измененный эндокринный фон у человека на Севере, при воздействии неблагоприятных производственных факторов будет подвергаться дополнительным модификациям [Маянский, 1979].

Обследовано 69 мужчин-сотрудников комбината в возрасте 22 – 60 лет, как местных, так и приезжих работников и произведено сравнение содержаниях гормонов с уровнем их у мужчин, постоянно проживающих на Севере и не занятых во вредном производстве.

Содержание кортизола в сыворотке крови у работников ЦБК (как местных, так и приезжих) повышено по сравнению с неработающими во вредных условиях комбината мужчинами, проживающими на Севере (p<0,001). Содержание же тиронинсвязывающего глобулина (ТСГ) (p<0,05-0,001) и трийодтиронина (Т3) (p<0,05-0,001) понижено у работников комбината. Содержание Т4 (как и кортизола) у сотрудников ЦБК выше, чем у неработающих на СЦБК мужчин (p<0,001). Кроме того, у приезжих работников ЦБК содержание тироксина (Т4) выше по сравнению с работниками – местными жителями (p<0,05). Уровень содержания эстрадиола у приезжих работников комбината ниже, чем у жителей Севера, неработающих на ЦБК (p< 0,05). Содержание прогестерона как у местных, так и приезжих сотрудников комбината более чем в 2 раза ниже уровня прогестерона в сыворотке крови у жителей Севера, неработающих на СЦБК (p<0,001). Концентрация тестостерона повышена у мужчин, работающих на комбинате (у местных и приезжих) по сравнению с содержанием этого гормона у мужчин, живущих на Севере и незанятых на работе во вредных условиях ЦБК (p<0,05-0,001). Содержание инсулина у приезжих работников ЦБК превышает пределы референтных норм и уровень инсулина высок (у местных и приезжих) по сравнению с местными мужчинами, неработающими на комбинате. (p<0,001). Соматотропный гормон (СТГ) у сотрудников СЦБК во много раз превышает содержание этого же гормона у неработающих на комбинате мужчин (p<0,001).

Таким образом, эндокринная система сотрудников ЦБК подвергается более сильным воздействиям по сравнению с жителями Севера, не занятыми на работе на СЦБК и особенно это влияние выражено у приезжих работников ЦБК.


ИЗУЧЕНИЕ ВЛИЯНИЯ МЕКСИДОЛА НА ПРОЦЕСС РЕМОДЕЛИРОВАНИЯ МАГИСТРАЛЬНЫХ СОСУДОВ

Н.Н. Проданец,, н.с.

Нижегородская государственная медицинская академия.

Нижний Новгород, Россия


В качестве основных причин, приводящих к формированию структурных изменений сосудистой стенки, являются ишемическо-реперфузионные повреждения эндотелия и связанные с этим процессы ремоделирования. Ремоделирование сосудистой стенки включает трансформацию структуры с миграцией, пролиферацией и трансформацией ГМК, макрофагов, фибробластов, разрастанием элементов соединительной ткани. Результатом изменений является утолщение стенки, увеличение механической “жесткости” и выраженному нарушению функций сосудов, а также инициация или ускорение механизмов атеросклероза

В связи с этим целью данного исследования явилось изучение влияния мексидола на изменения структуры магистральных сосудов в раннем постреперфузионном периоде после тотальной ишемии с использованием световой и электронной микроскопии. Эксперименты выполнены на белых нелинейных крысах-самцах массой 200-250г возраста 7-8 месяцев. Тотальную ишемию моделировали путем 10-минутной остановки сердца путем пережатия сердечно-сосудистого пучка по методу В.Г. Корпачева. Электронно-микроскопические и гистологические исследования показали, что в раннем посреперфузионном периоде (60 минут) в контрольной серии наблюдаются участки нарушения целостности эндотелиального монослоя и замещения его тромбоцитами, вакуолизация эндотелия, набухание подэндотелиального слоя и основного слоя медии, вакуолизация миоцитов. В сериях с введением мексидола в раннем постреперфузионном периоде отмечается сохранение эндотелиальной выстилки, незначительное набухание митохондрий с сохранением их структуры. В медии обнаруживается повышение активности гладких миоцитов (гиперплазия митохондрий, расширение цистерн гранулярного ретикулума, увеличение количества субсарколеммальных везикул). Таким образом, мексидол уменьшает возникающие в сосудистой стенке постреперфузионные перестройки на раннем этапе, что снижает степень патологического ремоделирования сосудов в отдаленном постреперфузионном периоде.


ИНТЕРЛЕЙКИНЫ КАК НОВЫЙ СЫВОРОТОЧНЫЙ БИОМАРКЕР ДЛЯ РАННЕЙ ДИАГНОСТИКИ РАКА ПРОСТАТЫ

А.Е. Прялухин, асп.

Санкт-Петербургская государственная медицинская академия

им. И.И.Мечникова, Кафедра урологии. Санкт-Петербург, Россия


Целью исследования была попытка выявить, что имеется разница в уровне сывороточных интерлейкинов между больными, у которых при первичной биопсии был обнаружен рак предстательной железы (РПЖ) и больными, у которых этот диагноз не подтвердился.

Материалы и методы: были изучены образцы сыворотки у 28 пациентов, средний возраст которых составил 668 лет (среднее  стандартное отклонение) среди этих пациентов РПЖ был обнаружен у 12, 16 пациентов не имели рака. Всем пациентам была выполнена 12 точечная биопсия простаты под контролем трансректального ультразвукового исследования и последующее гистологическое исследование образцов. Концентрация интерлейкинов в сыворотках обследуемых мужчин определялась соответствующими наборами с использованием твердофазного иммуноферментного метода с применением пероксидазы хрена в качестве индикаторного фермента. Сыворотки пациентов сохранялись до исследования, будучи мгновенно замороженными до -80С. Взятие крови проводилось из локтевой вены за день до биопсии Нами были выбраны для определения следующие интерлейкины – интерлейкин-2 (ИЛ-2), интерлейкин-10 (ИЛ-10), гамма-интерферон (гамма-ИФ), альфа-интерферон (альфа-ИФ), фактор некроза опухолей-альфа (ФНО-альфа).

Результаты: Нами отмечено практически двукратное возрастание среднего уровня ИЛ-2 и альфа-ИФ у больных с РПЖ, более чем 10 кратное снижение среднего уровня ИЛ-10 и трехкратное снижение ФНО-альфа у больных с РПЖ по сравнению со второй группой, также у больных с диагностированным РПЖ имелось тринадцатикратное снижение гамма-ИФ, которое единственное имело статистически значимый характер (р≤0.05).

Заключение: Полученные данные позволяют говорить об изменении интерлейкинового статуса в сыворотки крови у больных с РПЖ, что возможно позволит использовать их как маркеры данного заболевания, в комплексе со стандартным обследованием. Гамма-ИФ статистически значимо отличается у больных, у которых РП был выявлен при первичной биопсии.


ИЗУЧЕНИЕ МЕХАНИЗМОВ РАЗВИТИЯ

АЛКАЛОЗА И АЦИДОЗА НА КРЫСАХ

А.Н. Пужалин, м.н.с., А.В. Мамистова, студ., Т.И. Пономарева, асп., Е.А. Туховская, асп.

Филиал Института биоорганической химии

им. академиков Ю.А.Овчинникова и М.М.Шемякина, лаборатория биологических испытаний. Пущино.

Самарский государственный университет. Самара, Россия


Одной из основных задач современной фармакологии является изучение механизмов гомеостаза. Понимание процессов развития алкалоза и ацидоза в организме является важным при диагностике таких заболеваний таких систем как эндокринная, желудочно-кишечная, сердечно-сосудистая.

Целью данной работы являлось изучение влияния трёх химических агентов (гидрокарбонат натрия, аммония хлорид и натрия хлорид) на гомеостатические показатели у лабораторных животных.

Экспериментальные животные (крысы, Sprague Dawley, m=290-310 г) были разделены на четыре экспериментальные группы в зависимости от вводимых веществ: 1) интактная (дистиллированная вода, n=6), 2) группа алкалоз (раствор гидрокарбоната натрия, 23,52 г/л, n=6); 3) группа ацидоз (раствор аммония хлорида, 14,98 г/л, n=6); 4) контроль (раствор натрия хлорида 16,38 г/л, n=6). Все вещества давали через поилки в течение 14 дней, при этом животные были лишены доступа к обычной воде, корм животные получали ad libitum. В ходе исследования регистрировали физиологические (вес тела, потребление растворов, потребление корма, клинические признаки состояния здоровья, диурез) и биохимические (анализ мочи и крови в конце исследования).

Результаты исследования показали, что адаптационные механизмы животных позволяют поддерживать организм в течение первых 72-96 часов с момента попадания агрессивных агентов в организм. При этом, как и предполагалось, pH в группах менялась через 4-5 дней в зависимости от индивидуальных особенностей каждой особи: в группах с гидрокарбонатом натрия наблюдалось достоверное увеличение значений с 7,2 до 8-9, в группе с аммонием хлоридом – снижение до 6-6,5. В контрольной группе – показатель достоверно не менялся, но при этом увеличился разброс значений 7-7,5. Диурез также менялся: в группе с алкалозом и ацидозом – выраженная полиурия, а в контрольной группе – увеличение потребления раствора. Данные по биохимии крови также подтвердили изменение рН в организме.

Таким образом, использование гидрокарбоната натрия и аммония хлорид возможно для моделирования патологических состояний на крысах CD связанных с нарушением кислотности среды.


МЕТОД КУЛЬТИВИРОВАНИЯ КЛЕТОК В СИСТЕМЕ ДВУХ ЖИДКИХ ФАЗ И ВЫДЕЛЕНИЕ КОМПОНЕНТОВ ИНТАКТНОГО ВНЕКЛЕТОЧНОГО МАТРИКСА

К.А. Пухов, студ., Н.В. Абрамова, ст. лаб.-исслед.

Институт цитологии РАН, Отдел клеточных культур.

Санкт-Петербург, Россия


Внеклеточный матрикс (ВКМ) синтезируется преимущественно фибробластами – клетками, продуцирующими белки соединительной ткани. При этом различия в составе ВКМ, синтезируемого фибробластами различного происхождения, пока точно не определены. Такие данные необходимы для дальнейшего развития заместительной терапии, для использования наиболее подходящих для заживления данной ткани трансплантатов.

Пока не существует способа получения интактного ВКМ, синтезированного клетками в культуре. При использовании ферментов для снятия клеток с субстрата синтезированный клетками ВКМ неизбежно повреждается, что вносит ошибки в даль­нейшую работу с таким матриксом. В настоящей работе предпринята попытка отделения ВКМ от клеток без применения ферментов, что позволяет получить его макси­мально неповрежденным. ВКМ может быть выделен в количествах, достаточных для идентификации компонентов методом электрофореза. Для получения интактного ВКМ разработан метод культивирования фибробластов на гра­нице двух жидких фаз. Основа метода состоит в исполь­зовании в качестве субстрата для клеток перфторированных алканов и третичных аминов (перфторанов). Прове­дено сравнение различных перфторанов по пригодности для культивирования клеток. После культивирования клеток в течение 1—2 сут на поверхности перфторана отделение интактного ВКМ проводили при ультрацентрифугировании в полифазной системе, это позволяет выделить компоненты ВКМ с минимальными повреждениями. Такой результат достигается путем создания допол­нительной, промежуточной между перфтораном и средой, фазы со средними значениями плотности. В работе были использованы первичные и трансформированные фибробласты человека. Перед центрифугированием клетки, вносимые в систему, окрашивали антителами против коллагена I и ламинина, проверяя синтез этих элементов ВКМ. После центрифугирования состав полученного ВКМ определяли методом электрофореза и Вестерн-блота с окраской антителами к основным белкам ВКМ. Было проведено сравнение ВКМ, полученного при снятии клеток с применением ферментов, и полученного вышеуказанным способом. Полученные результаты показывают, что при наличии достаточно малых количеств клеток можно изучать компоненты ВКМ, получая их неповрежденными. В перспективе разработанный нами метод позволит использовать минорные компоненты ВКМ в тканевых клеточных трансплантатах для достижения полного соответствия замещаемой ткани. Работа выполнена при финансовой поддержке Рос­сийского фонда фундаментальных исследований (проект ОФИ-А 05-04-08017).


ФАКТОРЫ, ВЛИЯЮЩИЕ НА ВЫЖИВАЕМОСТЬ БОЛЬНЫХ ОСТРЫМИ НЕЛИМФОБЛАСТНЫМИ ЛЕЙКОЗАМИ

И.Ю. Пчелин¹, студ., К.В. Кулибаба¹, кл. орд., Р.И. Вабищевич², врач,

Л.Л. Гиршова², врач, И.В. Ишматова², врач, А.В. Петров², врач

¹ Санкт-Петербургский государственный университет,

Медицинский факультет, Кафедра терапии.

²Городская клиническая больница № 31. Санкт-Петербург, Россия


Введение. В настоящее время для улучшения результатов химиотерапии онкогематологических заболеваний активно изучаются прогностические факторы у больных гемобластозами. Целью настоящего исследования является изучение влияния различных параметров на вероятность достижения полной клинико-гематологической ремиссии (ПКГР), на продолжительность безрецидивной выживаемости (БРВ) и общей выживаемости (ОВ) пациентов с острыми нелимфобластными лейкозами (ОНЛЛ).

Материалы и методы. 37 больных ОНЛЛ (13 мужчин и 24 женщины) со средним возрастом 50.4 лет были включены в данное исследование. Произведено изучение прогностической ценности более 60 клинических и лабораторных параметров с использованием непараметрического критерия Вилкоксона и метода множественной линейной регрессии (однофакторный и многофакторный анализ).

Результаты. После 1-2 курсов индукционной химиотерапии ПКГР была получена у 92.9 % больных с первичным ОНЛЛ и у 25.0 % больных с предшествующей миелодисплазией. При проведении однофакторного анализа установлено, что основными неблагоприятными прогностическими факторами для БРВ являются: возраст старше 65 лет (p=0.012), непромиелоцитарный вариант ОНЛЛ (p=0.073), бластоз крови в дебюте >5*10⁹/л (p=0.076); для ОВ - возраст старше 65 лет (p=0.042), наличие в анамнезе миелодисплазии (p=0.068), отсутствие ПКГР (p=0.008). Многофакторный анализ подтвердил независимое прогностическое значение возраста и варианта ОНЛЛ для БРВ (p<0.05); возраста и факта достижения ПКГР для ОВ (p<0.05).

Заключение. По результатам исследования, главным фактором, влияющим на вероятность достижения полной ремиссии у больных ОНЛЛ, является наличие предшествующей миелодисплазии; на показатели выживаемости этих пациентов в наибольшей степени влияют возраст, наличие предшествующей миелодисплазии, морфологический вариант ОНЛЛ, бластоз периферической крови в дебюте заболевания и факт достижения полной ремиссии.


НОВЫЙ ПРОЕКТИВНЫЙ ТЕСТ ВОЗВРАТНЫХ ГЛАГОЛОВ

К.А. Пчеловодова, учащ.

Гимназия им. К.А. Ковалевской. Великие Луки, Россия


Большинство проективных тестов высоко оцениваются психологами-практиками, однако проблемы в интерпретации, определении достоверности и стандартизации полученных данных остаются в значительной мере не решенными.

Новый психологический тест возвратных глаголов, предлагаемый нами, в результате апробации его среди школьников 6-11 классов г. Великие Луки, показал свою эффективность в преодолении перечисленных проблем проективного тестирования:

1. За 10 минут испытуемый должен написать сверху вниз 10 глаголов с окончанием –юсь, то есть возвратных глаголов, имеющих суффикс –ся или –сь. При этом написанные глаголы воспроизводят глубоко личностную информацию, так как любые глаголы с окончанием –юсь, например: воодушевляюсь, обижаюсь, молюсь по сути должны читаться: я воодушевляюсь, я обижаюсь, я молюсь, но во время тестирования я не произносится и тем самым деликатно оберегается.

2. Этот тест позволяет легко отдифференцировать глаголы двигательной сферы (катаюсь, лечусь, кувыркаюсь, валяюсь и т.д.) от глаголов, отражающих эмоции, влечения, конфликты (влюбляюсь, злюсь, теряюсь, каюсь, оскорбляюсь, зарежусь и т.д.), что дает возможность произвести стандартизацию по многим психологическим параметрам.

3. Интерпретация данных теста не вызывает больших затруднений и осуществляется сначала по вертикали. Возвратные глаголы, которые пишутся первыми, чаще всего отражают наиболее значимое состояние, а последующие глаголы обнаруживают причинно-следственные связи или определенную ритмику переживаний. Слова, которые дописываются по горизонтали, существенно дополняют картину проекций индивидуума.

4. Сопоставление полученной информации с характеристиками детей классными руководителями, психологами и родителями дает возможность выстроить достоверный психологический портрет школьника.

Конкретная информация о том, как работает проективный тест возвратных глаголов и выявляет скрытую мотивацию поступков детей, излагается в докладе.


ХАРАКТЕР УЧАСТИЯ АКТИВАЦИОННЫХ СИСТЕМ МОЗГА У ДЕТЕЙ ДОШКОЛЬНОГО ВОЗРАСТА И ШИМПАНЗЕ ПРИ ДОСТИЖЕНИИ ЦЕЛИ, ПРИБЛИЖАЮЩЕЙСЯ С РАЗЛИЧНЫМИ СКОРОСТЯМИ

М.В. Радченко, асп., Т.Г. Кузнецова, с.н.с.

Институт физиологии им. И.П.Павлова РАН,

Лаборатория физиологии ВНД. Санкт-Петербург, Россия


Исследование участия активационных систем мозга в процессе целедостижения у детей дошкольного возраста и шимпанзе позволяет выяснить базисные механизмы этого процесса, которые до настоящего времени еще недостаточно изучены. В ходе работы установлено, что у детей при достижении цели, приближающейся с различными скоростями в убывающей последовательности, увеличивалось количество проявлений ориентировочного рефлекса и отрицательных эмоций, уменьшалось число проявления реакции сосредоточения и элиминировались положительные эмоциональные реакции. У шимпанзе в этих условиях имело место уменьшение проявления реакции сосредоточения, увеличение проявления отрицательных эмоциональных реакций и элиминация положительных. У детей при достижении цели, приближающейся с высокой скоростью, применяемой после менее высоких и низких, в сравнении с ее первым предъявлением, имело место увеличение реакции сосредоточения и положительных эмоций, также уменьшение числа проявления ориентировочного рефлекса и отсутствие в большинстве эпизодов эксперимента отрицательного эмоционального реагирования. У шимпанзе эти условия способствовали поддержанию достаточно высокого числа случаев проявления реакции сосредоточения (в среднем около 50.0%) и отсутствию отрицательного эмоционального реагирования.

Показателем психоэмоционального напряжения у детей и шимпанзе явилось доминирование эмоционально отрицательного реагирования, которое сочеталось с изменением тактик достижения цели. У детей постоянное нажатие на кнопку одной рукой сменялось прерывистым двумя руками, усиленным локтем и торсом. У шимпанзе прерывистые нажатия на кнопку одной рукой заменялись ударами по кнопке. Особенностями достижения цели, приближающейся с различными скоростями, у детей в сравнении с шимпанзе явились: более частое проявление ориентировочного рефлекса, что иллюстрирует большую представленность отражательно-оценочной функции эмоций. Большее число случаев проявления реакции сосредоточения, отражающих большую базисную роль мотивации достижения цели; большее проявление положительно окрашенных эмоциональных реакций и, следовательно, механизма их подкрепляющего действия; большее число используемых тактик достижения цели, обусловливающих более позднее наступление выраженного психоэмоционального напряжения.