Г. Р. Хасанова общая характеристика работы

Вид материала

Автореферат диссертации

Содержание Распределение детей с гастродуоденальной патологией Pr. mirabilis Таблица 6 Показатели антибактериальных Ig M к кишечной микрофлоре в сыворотке крови детей

Подобный материал:

• Содержание лекций  Модели местного самоуправления в России  Местное самоуправление:, 786.51kb.
• Общая характеристика работы актуальность работы, 336.09kb.
• Общая характеристика работы актуальность работы, 236.99kb.
• Общая характеристика работы актуальность работы, 227.87kb.
• Общая характеристика работы актуальность работы, 227.87kb.
• Задачи физического воспитания детей дошкольного возраста. Общая характеристика средств, 34.6kb.
• Реферат по курсу: экология на тему: Общая характеристика экосистем, как, 726.64kb.
• Научная работа студентов, 2153.55kb.
• Научная работа студентов, 2114.42kb.
• Общая характеристика работы актуальность работы, 487.01kb.

Наиболее высокая протеолитическая активность отмечалась у детей с эрозивным и язвенным поражением гастродуоденальной области (p=0 при сравнении с контролем), что подтверждается обнаружением достоверных различий общей Ig-расщепляющей активности (p<0,05 и p<0,005) и активности тиоловых ферментов между указанными группами и детьми с поверхностным гастродуоденитом (p<0,05 и p<0,01).

Доказано наличие взаимосвязи между показателями общей Ig-расщепляющей активности, а также активности тиоловых протеиназ и выраженностью воспалительных изменений слизистой оболочки желудка и двенадцатиперстной кишки по данным эзофагогастродуоденоскопии (r=0,409 и r=0,383, р<0,01), что, возможно, объясняется не только дисбиотическими изменениями в кишечнике, но также отрицательным влиянием Ig-расщепляющих ферментов на резистентность слизистых к повреждающим агентам, в том числе и H.pylori, и их непосредственным разрушающим действием на эпителиальные клетки.

Ведущее место среди этиологических факторов развития гастродуоденальной патологии у детей занимает H.pylori (Баранов А.А., Щербаков П.Л., 2007, Mourad-Baars P.et al., 2010). С одной стороны, персистенция Н.pylori способствует развитию выраженных изменений микробиоценоза желудка и кишечника, а с другой стороны, реализация его патогенного действия на слизистую гастродуоденальной зоны во многом определяется состоянием иммунитета, особенно местного, к снижению которого могут привести микробные Ig-расщепляющие ферменты. Установлено, что у детей с хронической ГДП, ассоциированной с H.pylori- инфекцией, определяются достоверно высокие показатели активности тиоловых Ig-расщепляющих ферментов (8,8 (6,79-9,47) мгIg/час/г кала) в отличие от больных без хеликобактериоза (6,21 (3,07-9,03) мгIg/час/г кала), p<0,05, что отражает более глубокие изменения микробиоценоза кишечника у этих больных. Полученные данные подтверждаются выявленными корреляционными связями между наличием диагностических титров антиНРIgG и уровнем общей Ig-расщепляющей активности (r=0,6; р=0,012) и активности тиоловых ферментов (r=0,42; р=0,001).

При нарушении целостности слизистых ЖКТ, развитии воспалительных и деструктивных процессов, приводящих к снижению их барьерной функции, создаются условия для транслокации бактерий и их антигенов, в том числе эндотоксина грамотрицательной микрофлоры, в несвойственные им биотопы и кровоток. Источниками поступления эндотоксина в общий кровоток у больных с хронической ГДП могут являться как сапрофитная, условно-патогенная микрофлора кишечника, так и микроорганизмы из очага воспаления.

В исследовании впервые представлены результаты изучения роли эндотоксиновой агрессии – патологического процесса, обусловленного избытком эндотоксина в системном кровотоке и недостаточностью антиэндотоксинового иммунитета (Яковлев М.Ю., 2003) – в патогенезе хронической гастродуоденальной патологии у детей.

Установлено, что уровень системной эндотоксинемии у обследованных больных, независимо от формы поражения слизистой гастродуоденальной зоны, превышал показатели условно-здоровых детей (0,7 (0,38-1,69) EU/ml, р<0,05) и составил при поверхностном ХГД 1,5 (0,9-2,29) EU/ml (р=0,026), гипертрофическом – 1,8 (0,98-4,83) EU/ml (р=0,01), эрозивном ХГД – 1,8 (0,9-3,6) EU/ml (р=0,014) и при ЯБДПК – 2,4 (1,32-5,93) EU/ml (р=0,002). Наиболее высокое содержание эндотоксина в сыворотке крови отмечалось у детей с язвенной болезнью двенадцатиперстной кишки. Кроме того, ЯБДПК характеризовалась достоверно высокими показателями сывороточного эндотоксина по сравнению с таковыми при поверхностной форме ХГД (p=0,034).

Доказано, что метод определения эндотоксина в сыворотке крови обладает наибольшей прогностической способностью в диагностике ЯБДПК (AUC=77%), Sp метода составила– 90%, Se - 54%, PPV – 88%, PNV – 60%. Относительный риск заболевания при наличии уровня эндотоксина в сыворотке крови более 2,1 EU/ml равен 2,19 (95% доверительный интервал 1,36-3,52; p<0,05).

Полученные результаты, вероятнее всего, объясняются более выраженным воспалительным процессом в очаге поражения и глубокими нарушениями микроэкологии гастродуоденальной области, ранее подтвержденными микробиологическими исследованиями биоптатов слизистой желудка и двенадцатиперстной кишки, что позволило ряду исследователей сравнить язвенный дефект с инфицированной раной (Чернин В.В. и соавт., 2004).

Известно, что в норме эндотоксин может обнаруживаться в крови здоровых людей в концентрации до 1,0 EU/ml (Яковлев М.Ю., 2003). При поступлении в общий кровоток физиологических доз эндотоксина имеет место физиологическая системная эндотоксинемия, значение которой заключается в поддержании иммунитета и тонуса других систем организма.

Установлено, что физиологическую эндотоксинемию имели 19,2% детей с ЯБДПК, 28,6% с поверхностным гастродуоденитом, 23,3% с гипертрофическим и 37% с эрозивным гастродуоденитом. При этом у детей с ЯБДПК достоверно чаще регистрировался уровень эндотоксина выше 6 EU/ml, р=0,04 (табл. 5).

Таблица 5

Распределение детей с гастродуоденальной патологией

в зависимости от уровня эндотоксина

Уровень эндотоксина, EU/мл	Хронический гастродуоденит						ЯБДПК		Рχ2
	Поверхностный		Гипертрофический		Эрозивный
	n=56		n=30		n=51		n=26
	n	%	n	%	n	%	n	%
до 1	16	28,6	7	23,3	19	37,3	5	19,2	0,49
От 1 до 3	29	51,8	12	40,0	18	35,3	9	34,6	0,53
От 3 до 6	10	17,9	9	30,0	8	15,7	6	23,1	0,53
более 6	1	1,8	2	6,7	6	11,8	6	23,1	0,02

H.pylori, как представитель грамотрицательной микрофлоры, также является источником эндотоксина. Имеются данные о том, что эндотоксин H.p., являясь фактором вирулентности, обнаруживается у большинства болезнетворных штаммов и, возможно, принимает участие в развитии аутоиммунных реакций (Arabski M. et al., 2008, Skoglund A. et al., 2009, Moran A.P., 2010).

У детей с 3-х-кратным и более повышением уреазной активности (более 6 мм) по результатам дыхательного теста установлены достоверно высокие показатели эндотоксинемии (1,8 (1,05-2,7) EU/ml) относительно контроля (0,7 (0,38-1,69) EU/ml) и группы с умеренной уреазной активностью (1,2 (0,6-1,8) EU/ml), р<0,05.

Полученные данные могут свидетельствовать о вкладе H.pylori в эндотоксинемию и повышении проницаемости эпителиальных барьеров слизистой желудка и ДПК для эндотоксина, источником которого является грамотрицательная условно-патогенная микрофлора из очага воспаления, отдельные представители которой (Enterobacter aerogenes, Proteus mirabilis, по данным Чернина В.В. и др.(2004)) способны выделять уреазу, идентичную продуцируемой H.pylori.

Реализация биологических эффектов эндотоксина зависит не только от его концентрации, но и от системы антиэндотоксиновой защиты. Установлено, что, несмотря на наличие у детей с хронической гастродуоденальной патологией высокой системной эндотоксинемии, уровни антиэндотоксиновых IgA, IgM и IgG не превышали физиологические показатели (p>0,05). Возможно, при хронизации заболевания отсутствует адекватная реакция иммунной системы на повышение уровня эндотоксинемии, что свидетельствует об истощении компенсаторных возможностей организма. Эти данные подтверждаются выявлением достоверно низких уровней антиэндотоксиновых Ig A (0,02 (0,01-0,05) мкг/мл) у больных с концентрацией эндотоксина более 1 EU/ml по сравнению с детьми, имеющими физиологическую эндотоксинемию (0,03 (0,01-0,14) мкг/мл), p=0,012.

Установлено, что одновременное определение эндотоксина и IgA к ГЛП в сыворотке крови может использоваться для скрининг-диагностики язвенной болезни двенадцатиперстной кишки: 1/(1+exp(-((Эндотоксин)*0,855+ (Ig A ГЛП)*5,577-1,799)). Информативность (AUC) данного метода составила 84%, Se – 73%, Sp – 75% при пороговом значении 0,51.

Таким образом, полученные результаты позволяют говорить о важной роли эндотоксина и гуморального звена антиэндотоксинового иммунитета в развитии и течении гастродуоденальной патологии и возможности их использования в дифференциально-диагностическом алгоритме заболеваний желудка и двенадцатиперстной кишки.

Этиология эндотоксиновой агрессии может быть представлена всем спектром грамотрицательных бактерий желудочно-кишечного тракта. В ходе анализа показателей гуморального звена антибактериального иммунитета (IgA, IgM, IgG) к отдельным представителям индигенной и условно-патогенной микрофлоры (E.coli, Pr.mirabilis, Ps.aeruginosa, Klebsiella pneumoniaе, S.aureus, Candida albicans, Bacteroides fragilis, Bifidobacterium spp., Streptococcus spp.) обнаружены высокие уровни антител у детей с хроническими гастродуоденальными заболеваниями относительно контроля, особенно IgM, что указывает на повышение проницаемости слизистого барьера на момент обследования.

У детей с язвенной болезнью двенадцатиперстной кишки выявлены превышение концентрации IgM к максимальному количеству бактериальных антигенов относительно группы условно-здоровых детей (p<0,05) и наиболее высокие уровни антител к УПМ по сравнению с детьми с хроническими гастродуоденитами, p<0,05 (табл. 6).

При всех формах гастродуоденальной патологии отмечались достоверно высокие уровни IgA к Pr. mirabilis и Candida albicans относительно группы контроля (р<0,05).

Сравнительный анализ содержания IgG к антигенам кишечной микрофлоры выявил при поверхностном гастродуодените высокие концентрации антител к S.aureus, Candida albicans, Bacteroides fragilis, гипертрофическом - E.coli, S.aureus, Candida albicans, Bacteroides fragilis и Bifidobacterium spp. эрозивном гастродуодените - к E.coli, Candida albicans, S.aureus, Bacteroides fragilis и Bifidobacterium spp. и при ЯБДПК - к E.coli, Candida albicans и Bifidobacterium spp (табл. 7).


Таблица 6

Показатели антибактериальных Ig M к кишечной микрофлоре в сыворотке крови детей

с гастродуоденальной патологией (мкг/мл)

Диагноз	№	IgM к представителям кишечной микрофлоры
		E.coli	Ps.aeruginosa	Pr.mirabilis	Bifidobacterium spp.	Bacteroides fragilis	Klebsiella pneumoniae	Candida albicans	S.aureus
Поверхностный гастродуоденит n=76	1	10,2	16,0	12,0	5,8	4,9	14,5	6,8	11,9
		(3,39-28,88)	(7,48-51,43)	(7,04-30,93)	(2,28-9,84)	(2,32-11,17)	(5,94-43,69)	(3-22,67)	(3,87-28,64)
Гипертрофический гастродуоденит n=48	2	10,4	16,1	10,5	4,2	6,6	13,4	8,1	6,3
		(2,41-27,69)	(6,32-37,58)	(5,33-40,1)	(1,96-7,83)	(2,5-11,58)	(6-40,83)	(3,19-20,51)	(3,25-30,46)
Эрозивный гастродуоденит n=55	3	12,9	21,5	17,2	4,6	5,5	22,4	14,5	15,8
		(6,21-34,21)	(9,29-47,8)	(7,18-35,37)	(2,37-11)	(2,93-14,5)	(7,01-70,38)	(4,96-35,44)	(4,28-28,85)
ЯБДПК		23,1	41,8	38,9	5,3	7,2	26,8	20,6	24,9
n=31	4	(11,6-88,14)	(18,98-85,56)	(15,2-75,95)	(2,61-17,19)	(3,57-26,08)	(6,87-62,8)	(13,37-37,42)	(10,89-57,32)
Контроль		7,8	12,1	7,2	3,5	3,6	10,6	4,1	5,4
n=20	к	(5,68-18,98)	(9,13-26,08)	(3,44-19,66)	(1,94-4,92)	(2,48-5,63)	(5,48-21,73)	(1,7-6,2)	(2,45-11,78)
p1-k		0,899	0,552	0,093	0,045	0,122	0,237	0,009	0,022
p2-k		0,701	0,711	0,177	0,219	0,024	0,344	0,021	0,244
p3-k		0,155	0,131	0,034	0,054	0,069	0,063	0	0,004
p4-k		0,009	0,005	0,002	0,031	0,005	0,088	0	0
p1-4		0,001	0,004	0,008	0,341	0,06	0,287	0,001	0,012
p2-4		0,001	0,002	0,01	0,237	0,227	0,178	0,001	0,003
p3-4		0,407	0,056	0,041	0,026	0,389	0,138	0,838	0,25