Г. Р. Хасанова общая характеристика работы

Вид материалаАвтореферат диссертации
Статистическая обработка
Результаты исследования и их обсуждение
Частота эубиоза и нарушений микробиоценоза толстой кишки
Частота выделения у детей с гастродуоденальной патологией условно-патогенных микроорганизмов в монокультуре и ассоциациях
Частота выделения условно-патогенных микроорганизмов у детей
Гр + бактерии
Clostridium spp.
Гр - бактерии
Kl. oxytoca
Citrobacter freundii
Активность Ig-расщепляющих ферментов у детей с различными формами
Подобный материал:
1   2   3   4   5   6   7   8

Статистическая обработка


Для статистической обработки результатов использованы: программа BIOSTATISTICA (Glantz S. A., McGraw Hill), табличный редактор Microsoft Excel 2003, программа анализа данных AtteStat (И. Гайдышев).

Нормальность распределения признака в вариационном ряду оценивалась с помощью критерия Колмогорова-Смирнова. Данные, подчиняющиеся закону нормального распределения, представляли в виде среднего значения и стандартного отклонения. Данные, не подчиняющиеся закону нормального распределения, представляли в виде медианы и 25%-ой и 75%-ой перцентилей. Статистическая обработка полученных результатов проводилась с использованием параметрических (критерий Стьюдента, парный критерий Стьюдента) и непараметрических критериев (критерии Манна-Уитни, Крускала-Уоллиса, Данна, Уилкоксона, хи-квадрат). Для оценки связи между признаками применяли коэффициент ранговой корреляции Спирмена. При сравнении однородных величин различия считались достоверными при p<0,05.

Для оценки диагностической значимости тестов проводился Receiver Operating Characteristic (ROC) – анализ c построением ROC-кривой и расчетом площади под кривой (AUC) ROC, характеризующей информативность метода, чувствительности (Se), специфичности (Sp), прогностической ценности положительного (PPV) и отрицательного результатов (NPV).

Для построения математических моделей использовался метод множественной логистической регрессии.

В диссертации применяли методы математической обработки полученных результатов с использованием компьютерной программы «Расчет Ig-протеолитической активности». Программа написана на языке программирования Visual Basic в среде табличного процессора Microsoft Excel 97.

Результаты исследования и их обсуждение

Комплексный подход к изучению микроэкологического состояния желудочно-кишечного тракта (ЖКТ) у детей с хронической гастродуоденальной патологией с учетом клинико-морфофункциональных особенностей, позволил определить характер и роль микроэкологических нарушений в развитии и течении заболеваний желудка и двенадцатиперстной кишки (ДПК).

В соответствии с поставленными задачами изучен качественный и количественный состав микрофлоры толстой кишки у 86 детей с гастродуоденальной патологией.

Установлено, что состав кишечного микробиоценоза у детей с ГДП редко соответствует общепринятым нормативам (26,7%). Нормальный состав кишечной микрофлоры соответственно критериям Отраслевого Стандарта «Протокол ведения больных. Дисбактериоз кишечника» констатирован у детей с поверхностным ХГД – в 5 (17,2%), гипертрофическим ХГД – 10 (43,5%), эрозивным ХГД – 6 (31,6%) и язвенной болезнью двенадцатиперстной кишки (ЯБДПК) – в 2 (13,3%) случаях. У большинства детей (65,2%) состав кишечной микрофлоры соответствовал критериям нарушений кишечного микробиоценоза I-II степени, а в некоторых случаях, у 7 больных (8,1%) - III степени дисбактериоза кишечника (табл. 1).

Таблица 1

Частота эубиоза и нарушений микробиоценоза толстой кишки

у детей с гастродуоденальной патологией

Степень

дисбактериоза

Хронический гастродуоденит

ЯБДПК







Поверх-ностный

Гипертрофический

Эрозивный

Все




n=29

n=23

n=19

n=15

n=86

Рχ2




n

%

n

%

n

%

n

%

n

%




0

5

17,2

10

43,5

6

31,6

2

13,3

23

26,7

0,21

1

10

34,5

5

21,7

5

26,3

7

46,7

27

31,5

0,73

2

10

34,5

7

30,4

7

36,8

5

33,3

29

33,7

0,99

3

4

13,8

1

4,3

1

5,3

1

6,7

7

8,1

0,62


Отклонения от общепринятой нормы у детей с ГДП проявлялись в основном изолированным умеренным дефицитом облигатных бактерий (36%), преимущественно бифидобактерий и лактозопозитивных E.coli, а также одновременным дефицитом индигенной микрофлоры и повышенным ростом 1-2 видов условно-патогенной микрофлоры (20,9%).

Условно-патогенные микроорганизмы (УПМ) в диагностически значимых количествах, чаще в монокультуре (22,1%), выделены у детей с хроническими гастродуоденитами в 30,4-36,8% случаев, при ЯБДПК – у 26,7% детей (табл. 2).

Таблица 2

Частота выделения у детей с гастродуоденальной патологией условно-патогенных микроорганизмов в монокультуре и ассоциациях

Микроорганизмы

Хронический гастродуоденит

ЯБДПК

Все

Поверх-ностный

Гипертрофический

Эрозивный

n=29

n=23

n=19

n=15

n=86

n

%

n

%

n

%

n

%

n

%

Ассоциации УПМ

3

10,3

2

8,7

1

5,3

2

13,3

8

9,3

Монокультура УПМ

6

20,7

5

21,7

6

31,6

2

13,3

19

22,1

Всего

9

31

7

30,4

7

36,8

4

26,7

27

31,4


Обращает на себя внимание видовое разнообразие факультативной микрофлоры у детей с ГДП. Причем для деструктивных форм наиболее характерным было выделение грамотрицательной условно-патогенной микрофлоры (20-26,3%), рост которой часто наблюдается при дисбиозах, вызванных применением антибиотиков в составе эрадикационных схем. При поверхностном и гипертрофическом гастродуодените по частоте встречаемости доминировал S. aureus (13-13,4%), а при эрозивном и язвенном поражении гастродуоденальной зоны – Klebsiella spp. (13,3-15,8%). Грибы рода Candida выделялись только у больных эрозивным гастродуоденитом и ЯБДПК (табл. 3).

Таблица 3

Частота выделения условно-патогенных микроорганизмов у детей

с гастродуоденальной патологией

Микроорганизмы

Хронический гастродуоденит

ЯБДПК

Все

Рχ2

Поверх-ностный

Гипертрофический

Эрозивный

n=29

n=23

n=19

n=15

n=86

n

%

n

%

n

%

n

%




n

Гр + бактерии

5

17,2

4

17,4

3

15,8

1

6,7

13

15,1

0,83

S.aureus

4

13,8

3

13

1

5,3

1

6,7

9

10,5

0,76

S.epidermidis

1

3,4

0

0,0

0

0,0

0

0,0

1

1,2

0,58

Clostridium spp.

1

3,4

2

8,7

2

10,5

0

0,0

5

5,8

0,53

Гр - бактерии

4

13,7

5

21,7

5

26,3

3

20

17

19,8

0,81

E.coli Hly+

0

0

1

4,3

0

0,0

1

6,7

2

2,3

0,43

Klebsiella spp.

3

10,3

1

4,3

3

15,8

2

13,3

9

10,5

0,69

Kl.pneumoniae

1

3,4

1

4,3

2

10,5

2

13,3

6

7

0,58

Kl. oxytoca

2

6,9

0

0,0

1

5,3

0

0,0

3

3,5

0,48

Citrobacter freundii

0

0

0

0,0

2

10,5

0

0,0

2

2,3

0,07

Ps.aeruginosa

1

3,4

2

8,7

0

0

0

0,0

3

3,5

0,40

M.morganii

0

0

0,0

0

0

0

1

6,7

1

1,2

0,19

Candida spp.

0

0

0,0

0

2

10,5

1

6,7

3

3,5

0,18


Необходимо отметить, что бактериологическое исследование кала отражает микробный состав полостной флоры лишь дистальных отделов кишечника и не оценивает качественные характеристики кишечной микробиоты, которые могут оказать значимое влияние на течение гастроэнтерологических заболеваний. Таким образом, данное исследование не может в полной мере удовлетворить специалистов как метод, позволяющий оценить роль изменений кишечной микрофлоры в формировании и прогрессировании ГДП.

В связи с представленными фактами, для оценки микробиоценоза кишечника проведено исследование активности Ig-расщепляющих ферментов в копрофильтратах больных. Способность продуцировать Ig-расщепляющие ферменты считается фактором патогенности и может служить качественной характеристикой кишечной микробиоты. Высокий популяционный уровень бактерий - продуцентов IgA-протеиназ приводит к местному снижению действия защитных факторов иммунного ответа и развитию вторичного иммунодефицитного состояния, что способствует хронизации воспалительного инфекционного процесса (Агапова О.В., Бондаренко В.М., 2002).

У детей с ГДП, независимо от формы поражения, установлены статистически значимо высокие показатели Ig-расщепляющей активности копрофильтратов относительно группы контроля.

Следует отметить, что в отличие от активности сериновых и металлозависимых ферментов у больных, которая не отличалась от показателей условно-здоровых детей, значения тиоловых протеиназ, указывающих на преобладание грамотрицательной кишечной микрофлоры и простейших, были достоверно выше контрольных значений (p<0,05) (табл. 4).

Таблица 4

Активность Ig-расщепляющих ферментов у детей с различными формами

гастродуоденальной патологии (мгIg/час/г. кала)

Активность ферментов

Хронический гастродуоденит

ЯБДПК

Контроль

р

Поверхностный

Гипертрофический

Эрозивный

группа 1

группа 2

группа 3

группа 4

группа к

n=43

n=32

n=29

n=32

n=14

общая

9,9

9,88

12,64

13,2

7,3

p1-3=0,029




(9,43-12,68)

(9,18-13,73)

(11,24-14,14)

(12,25-14,15)

(5,53-9,43)

p1-4=0,002

р

p1-k=0,001

p2-k=0,001

p3-k=0

p4-k=0







металло-зависимых

0,27

0

0

0,39

0

р1-2-3-4=0,13




(0-1,68)

(0-0,5)

(0-0,62)

(0-1,39)

(0-1,53)




сериновых

0,2

0,07

0,25

0,24

0

р1-2-3-4=0,7




(0-1,65)

(0-1,22)

(0-2,15)

(0-1,43)

(0-3,98)




тиоловых

9,3

9,59

11,65

12,09

5,44

p1-3=0,035




(6,65-11,59)

(8,26-11,5)

(7,06-13,04)

(9,03-13,62)

(2,93-7,53)

p1-4=0,007

р

p1-k=0,001

p2-k=0

p3-k=0,002

p4-k=0