Российская академия наук
| Вид материала | Тезисы |
- Основание Петербургской академии наук, 49.85kb.
- Спонсоры конференции: Фармацевтическая фирма «Санофи-Авентис», 74.5kb.
- Ш. Н. Хазиев (Институт государства и права ран) Российская академия наук и судебная, 297.05kb.
- Научный журнал «Вопросы филологии» Оргкомитет: Сопредседатели, 53.54kb.
- Научный журнал "Вопросы филологии" Оргкомитет: Сопредседатели, 47.73kb.
- Котов Сергей Викторович доктор медицинских наук, профессор Савин Алексей Алексеевич, 547.92kb.
- Н. д кондратьева Международный фонд Н. д кондратьева и Российская академия естественных, 13.13kb.
- Российская академия наук отделение общественных наук ран, 74.85kb.
- Высочество Князь Монако Альберт II и другие. Сдоклад, 38.69kb.
- Ипээ ран www sevin ru, 22.27kb.
ФЛАВОНОИДЫ И ФЕНИЛПРОПАНОИДЫ – ПЕРСПЕКТИВНЫЕ АНТИОКСИДАНТЫ ЛЕКАРСТВЕННЫХ РАСТЕНИЙ
Куркин В.А., Авдеева Е.В., Правдивцева О.Е., Куркина А.В.,
Кулагин О.Л., Царева А.А., Рыжов В.М., Егорова А.В.,
Анисимова М.М.
Самарский государственный медицинский университет, г. Самара, 443099, ул. Чапаевская, 89; тел. (846) 260-33-59; vakur@samaramail.ru
Флавоноиды и фенилпропаноиды лекарственных растений, в значительной мере определяющие многообразие класса фенольных соединений, являются уникальным источником антиоксидантных, гепатопротекторных, иммуномодулирующих, адаптогенных и нейротропных лекарственных средств. На основе изучения физико-химических, спектральных и фармакологических свойств целого ряда растительных веществ обоснована необходимость введения в фармакогнозию фенилпропаноидов как самостоятельного класса биологически активных соединений (БАС), что нашло отражение в учебнике «Фармакогнозия» (Куркин В.А., 2004; 2007). Фенилпропаноиды являются биогенетическим предшественником флавоноидов – одного из самых бурно развивающихся классов БАС, особенно как источника биоантиоксидантов.
На модели токсического гепатита, вызванного интоксикацией четыреххлористым углеродом в ткани печени крыс, проведено исследование антиоксидантной активности ряда фитопрепаратов, содержащих флавоноиды и фенилпропаноиды, а также некоторых индивидуальных соединений. В сравнительном плане изучены лекарственные средства на основе корневищ левзеи сафлоровидной - Rhaponticum carthamoides (Willd.) Iljin, корневищ родиолы розовой - Rhodiola rosea L., плодов расторопши пятнистой - Silybum marianum (L.) Gaertn., а также индивидуальные соединения - розавин, силибин (фенилпропаноиды), кверцетин, дигидрокверцетин (таксифолин) и рутин (флавоноиды). Влияние на уровень малонового диальдегида, как конечного продукта перекисного окисления липидов (ПОЛ), среди индивидуальных веществ в наибольшей мере оказывает рутин (снижается на 25% по сравнению с контрольной группой). Далее антиоксидантная активность уменьшается в ряду: дигидрокверцетин, силибин, розавин, кверцетин. Для всех исследуемых фитопрепаратов выявлена антиоксидантная активность, однако наибольшей способностью тормозить процесс ПОЛ обладает экстракт родиолы розовой сухой (снижается на 30,5% по сравнению с контрольной группой). Активность супероксиддисмутазы увеличивается в наибольшей степени под влиянием кверцетина и экстракта родиолы розовой сухого. Активность глутатионпероксидазы возрастает в наибольшей мере под влиянием кверцетина, далее активность уменьшается в ряду: силибин, розавин, дигидрокверцетин. Активность фермента каталазы возрастает более чем в три раза под влиянием экстракта родиолы розовой и более чем в два раза при действии кверцетина. В настоящее время в качестве перспективных источников биоантиоксидантов исследуются пижма обыкновенная (Tanacetum vulgare L.), полынь эстрагон (Artemisia dracunculus L.), черника обыкновенная (Vaccinium myrtillus L.), репешок аптечный (Agrimonia eupatoria L.), бессмертник песчаный - Helichrysum arenarium (L.) Moench., гречиха посевная (Fagopyrum saggitatum Gilib.), мелисса лекарственная (Melissa officinalis L.). Разработаны новые подходы к стандартизации сырья вышеперечисленных растений, а также способы получения изосалипурпозида (бессмертник песчаный) и рутина (гречиха посевная). Обосновано использование в методиках анализа стандартных образцов рутина (трава гречихи посевной, трава зверобоя, трава полыни эстрагон), силибина (плоды расторопши пятнистой), изосалипурпозида (цветки бессмертника песчаного), цинарозида (цветки пижмы, трава репешка аптечного), цианидина (плоды черники обыкновенной), розавина (корневища родиолы розовой) и розмариновой кислоты (трава мелиссы лекарственной).
ХАРАКТЕР ИЗМЕНЕНИЙ СВОБОДНОРАДИКАЛЬНОГО
ОКИСЛЕНИЯ В СПЕРМОПЛАЗМЕ БОЛЬНЫХ ХРОНИЧЕСКИМ ПРОСТАТИТОМ ПРИ РАЗЛИЧНЫХ ВАРИАНТАХ ЛЕЧЕНИЯ.
Кутлуев М.М., Фархутдинов Р.Р., Громенко Д.С.
Центральная научно-исследовательская лаборатория ГОУ ВПО Башкирского государственного медицинского университета, г. Уфа 450104, ул. Уфимское шоссе, д.18/3, кв. 113, Marrat@rambler.ru
Введение. Лечение и диагностика хронического простатита во многих случаях представляет собой трудную задачу [1]. В настоящее время еще нет единого подхода к лечению данного заболевания [2]. Избыточная продукция активных форм кислорода фагоцитами и активация перикисного окисления липидов, снижает антибактериальный потенциал, и нарушают микрогемодинамику в предстательной железе[3].
Целью настоящей работы было изучение процессов свободного радикального окисления в спермоплазме больных хроническим простатитом.
Материалы и методы. Основу работы составили исследование спермоплазмы 60 мужчин с хроническим простатитом. Выделены 3 группы наблюдения. I - пациентов с симптомами хронического простатита без лечения. II - получали антибактериальный препарат - ципрофлоксацин в дозе 500 мг * 2 раза в день в течение 2 недель. III - наряду с антибиотикотерапией получали альфатокоферол.
Результаты. Изучение процессов генерации АФК спермы при различных вариантах лечения было выполнено у всех пациентов исследуемых групп по методике исследования состояния АФК в сперме на аппарате «Хемилюминомер – 003» [4].
Таблица 1
Уровень люминолзависимой хемилюминесценции (ЛЗХЛ) спермы пациентов
| Показатели ЛЗХЛ | Группы пациентов | ||
| I группа (n=20) | II группа (n=20) | III группа (n=20) | |
| Светосумма, отн. ед. | 2,5+0,77* | 2,3+0,02* | 2,1+0,57* |
| Спонтанная светимость, отн. ед. | 0,8+0,21* | 0,7+0,12* | 0,6+0,1* |
| Максимальная светимость, отн. ед. | 0,8+0,17* | 0,7+0,23* | 0,6+0,13* |
Здесь и далее* - р<0,05 по отношению к показателям здоровых пациентов.
Таблица 2
Изменение суммарной антиокислительной активности (АОА) спермоплазмы (n=60)
| | Группы обследованных | ||
| I группа | II группа | III группа | |
| % изменения суммарной АОА | -46,1+4,98* | -34,0+6,7* | -23,3+5,92* |
Заключение. В случае воспаления в простате происходит падение уровня суммарной антиокислительной активности спермоплазмы. Хемилюминесцентные методы исследования позволяют выявить различия, что дает возможность изучения процессов патогенеза простатита и провести патогенетически оправданную терапию.
Литература.
1. Лоран О.Б., Велиев Е.И., Живов А.В.// Урология. – 2009. - №1.- с. 70-75.
2. Сивков А.В., Ощепков В.Н., Егоров А.А.// Пленум правления Российского общества урологов: Материалы. -М., 2004. -С. 216-230.
3. Тарасов Н.И., Серегин С.П., Рыбаков Ю.И. Хронический простатит. Патогенез, новые пути повышения эффективности лечения. – Снежинск: РФЯЦ-ВНИИТФ. – 1999.
4. Громенко Д.С. Особенности патогенеза идиопатической патозооспермии при мужской инфертильности: Дис. докт. мед. наук. - Уфа, 2007.
использование комплекса предшественников и
модулятора биосинтеза убихинона для коррекции побочных эффектов при введении адриамицина
1Кучменко Е.Б., 1Петухов Д.Н., 2Бурлака А.П., 1Донченко Г.В.
1Институт биохимии им. А.В. Палладина НАН Украины, г. Киев, Украина, ул. Леонтовича, 9, Киев, Украина; +38 067 3099952, kuchmeb@yahoo.com;
2Институт экспериментальной патологии, онкологии и радиобиологии им. Р.Е. Кавецкого НАН Украины, Киев, Украина.
Адриамицин является широко используемым в онкологической практике антибиотиком. Противоопухолевый эффект адриамицина прямо коррелирует с проявлением токсичности по отношению к сердцу, печени, почкам и т.д. Одним из механизмов токсичности адриамицина является нарушение про- и антиоксидантного баланса и развитие окислительного стресса. Использование адриамицина сопровождается изменениями содержания убихинона, что может приводить к нарушениям биоэнергетического обмена. Биосинтез убихинона является многостадийным процессом и может часто нарушаться как в здоровом организме, так и при различных заболеваниях. Недостатком применения экзогенных препаратов убихинона является угнетение его синтеза в организме.
Целью работы является исследование действия комплекса предшественников и модулятора биосинтеза убихинона – α-токоферолацетата, параоксибензойной кислоты и метионина – на активность ферментов цепи транспорта электронов в митохондриях, интенсивность свободнорадикальных процессов окисления, активность ферментов антиоксидантной защиты и матриксных металлопротеиназ в тканях сердца и печени крыс при введении адриамицина.
Адриамицин вводили внутрибрюшинно в дозе 2,2 мг/кг массы тела ежедневно на протяжении 8 суток. Биологически активные соединения животные получали перорально на протяжении 8 суток параллельно с введением адриамицина.
NADH-убихинон-оксидоредуктазная активность в митохондриях сердца достоверно не изменяется, а в митохондриях печени уменьшается. Сукцинат-убихинон-оксидоредуктазная активность уменьшается в митохондриях сердца и печени. Процент дефицита убихинона для обеих указанных ферментных систем возрастает. При введении изучаемого комплекса показатели активности убихинон-зависимых ферментных систем приближаются к контрольным величинам; процент дефицита убихинона для этих систем уменьшается. Цитохромоксидазная активность в митохондриях сердца и печени уменьшалась при введении адриамицина; введение исследуемого комплекса приводит к нормализации цитохромоксидазной активности.
Показано, что в тканях печени и сердца достоверно возрастает скорость генерации супероксидного анион-радикала и оксида азота, активность матриксных металлопротеиназ (ММП-2 и ММП-9) возрастает в 2-3 раза по сравнению с контролем. Наблюдается аккумуляция продуктов окисления липидов – диеновых конъюгатов, ТБК-позитивных продуктов и карбонильных продуктов окисления белков в тканях сердца и печени; наблюдаются изменения каталазной и супероксиддисмутазной активностей. При введении исследуемого комплекса происходит снижение активности матриксных металлопротеиназ и скорости генерации супероксидного анион-радикала и оксида азота; наблюдается нормализация показателей окисления липидов и белков и активностей данных ферментов антиоксидантной защиты.
Полученные результаты свидетельствуют о протективном эффекте изучаемого комплекса по отношению к митохондриям сердца и печени и могут служить основой для экспериментального обоснования новых подходов к коррекции токсических эффектов адриамицина путем стимуляции биосинтеза убихинона.
КАРБОНИЛ-ЗАВИСИМАЯ МОДИФИКАЦИЯ ЛИПОПРОТЕИДОВ: ПАТОФИЗИОЛОГИЧЕСКИЕ ПОСЛЕДСТВИЯ
Ланкин В.З., Тихазе А.К., Коновалова Г.Г., Кумскова Е.М.,
Шумаев К.Б., Аксенов Д.В., Власик Т.Н., Ефремов Е.Е.,
Недосугова Л.В.
Российский кардиологический научно-производственный комплекс,
Москва 121552, 3-я Черепковская ул.,15А; (495) 414-65-11; lankin@cardio.ru
Известно, что атерогенность липопротеидов низкой плотности (ЛНП) плазмы крови (захват частиц ЛНП макрофагами стенки сосудов) возрастает в процессе их свободнорадикального окисления. Нами установлено, что культивируемые макрофаги человека преимущественно захватывают не окисленные С-15 животной липоксигеназой ЛНП, а МДА-модифицированные ЛНП (МДА-ЛНП). Содержание биомаркеров окислительного стресса - окисленных ЛНП значительно возрастает в плазме крови больных атеросклерозом и, в еще большей степени, больных сахарным диабетом типа 2 (СД-2). При исследовании репрезентативных выборок населения Москвы и Таллина показано, что атерогенность ЛНП (высокое содержание холестерина в них) коррелирует с их окислительной модификацией. Обнаружено, что культивируемые макрофаги более эффективно захватывают ЛНП, модифицированные дикарбонилами, накапливающимися при сахарном диабете (глиоксаль- и метилглиоксаль-модифицированные ЛНП – MG-ЛНП), чем ЛНП, модифицированные альдегидами, накапливающимися при атеросклерозе (МДА-ЛНП). Атерогенные свойства глиоксаль- и MG-ЛНП возрастают также вследствие их большей, чем у МДА-ЛНП способности к спонтанной агрегации. Обнаружено, что добавление глюкозы в среду инкубации при Cu2+–инициированном свободнорадикальном окислении ЛНП приводит к снижению продолжительности индукционного периода и увеличению максимальной скорости окисления, что вероятно, связано с генерированием О2- в процессе автоокисления глюкозы. В соответствии с этим, снижение гипергликемии в процессе сахароснижающей терапии больных СД-2 сопровождается значительным снижением уровня окисленных ЛНП в плазме крови, причем активность эритроцитарных СОД и GSH-Px одновременно существенно возрастает, тогда как у этой категории больных активность антиоксидантных ферментов в эритроцитах обычно снижена. Это объяснимо тем, что активность СОД и GSH-Px ингибируется в присутствии дикарбонилов (установлено с использованием гомогенных препаратов ферментов и красных кровяных клеток), причем глиоксаль и MG являются более эффективными ингибиторами, чем МДА. Установлено, что в процессе взаимодействия концевых аминогрупп белков с альдегидной группой MG (но не МДА) происходит генерирование О2- (подтверждено по восстановлению синего нитротетразолия и люцигенин-зависимой хемилюминесценции в присутствии и отсутствии СОД), что согласуется с полученными нами данными о большем увеличении окисляемости ЛНП в присутствии MG по сравнению с МДА. При этом терапия больных СД-2 при помощи метформина (способствующего не только снижению уровня глюкозы, но и эффективной утилизации MG) сопровождается значительно большим снижением уровня окисленных ЛНП в плазме крови, чем терапия препаратами, обладающими только сахароснижающим действием. Представленные данные обосновывают необходимость включения альдегид-связывающих препаратов (в частности, производных гидразинов) и фенольных антиоксидантов, способных ингибировать окисление ЛНП in vivo (подобных пробуколу, ВНТ etc) в комплексную терапию больных СД-2. Поскольку полученные нами моноклональные антитела к МДА-ЛНП и MG-ЛНП, как установлено, селективно связываются с соответствующими ЛНП, мы полагаем, что они могут быть использованы при разработке иммунохимических тест- систем для селективной экспресс-диагностики атеросклероза и СД-2.
АНТИОКСИДАНТНАЯ АКТИВНОСТЬ СТРУКТУРИРОВАННОЙ ВОДЫ НА БИОЛОГИЧЕСКИ АКТИВНЫХ СОРБЕНТАХ
Лапин А.А., Зеленков В.Н.1, Потапов В.В.2, Албулов А.И.3
Институт органической и физической химии им. А.Е. Арбузова
КазНЦ РАН, г. Казань,420088, г. Казань, ул. ак. Арбузова 8. (843) 2-72-73-34, lapin@iopc.ru
1Отделение «Физико-химическая биология и инновации» РАЕН, г. Москва, 117420, г. Москва, В-420, а/я 5, zelenkov@ mail.cnt.ru
2Научно-исследовательский геотехнологический центр ДВО РАН, 683002, г. Петропаловск-Камчатский, Северо-Восточное шоссе, 30, а/я 56, nigtc@kscnet.ru
3Закрытое акционерное общество «БИОПРОГРЕСС», г. Щелково, 141142, Московская обл., г. Щелково, пос. Биокомбината. (495)221-86-65, bioprogress@mail.ru
Структурированная вода - это вода, которую в мире называют «Real Water» (настоящая вода) и «Living Water» (живая вода), а также «π вода» - совершенная вода. Такая вода необходима нам для всех процессов, протекающих в нашем организме. Она должна быть активной, чтобы передача информации и энергии зарядов происходила эффективно и быстро, что обеспечивает оптимальную приспособляемость организма.
Цель нашего исследования заключалась в оценке суммарной антиоксидантной активности структурированной воды, адсорбированной на сухих образцах пектина, хитозана, кремнезема, селикагеля и шунгита.
Суммарная антиоксидантная активность (САОА) определялась кулонометрическим методом с помощью электрогенерированных радикалов брома на серийном кулонометре “Эксперт-006-антиоксиданты” НПК “Эконикс-Эксперт” г. Москва по сертифицированной нами методике в пересчете на стандартный образец рутин. Содержание влаги (W) в образцах определяли на влагомере МХ-50 A&D Company, Limited (Япония), программное обеспечение “WinCT-Moisture” анализатора позволяло нам определять оптимальную температуру сушки. Данные представлены в таблице.
Суммарная антиоксидантная активность исследованных образцов
| Образец | W % масс. | САОА г рутина на 100 г образца | Sx | S | E % | Δ САОА % отн. |
| Яблочный пектин | 11.46 | 2133.22 | 0.005 | 10.40 | 2.37 | 15.20 |
| Хитозан фр. < 0.05 мм | 14.66 | 155254.30 | 0.01 | 1600.91 | 2.56 | 9.08 |
| Кремнезем терм. воды | 7.67 | 182.59 | 0.008 | 1.52 | 2.07 | 7.68 |
| Силикагель фр. < 0.1мм | 9.87 | 188.15 | 0.01 | 2.20 | 2.90 | 24.62 |
| Шунгит | 3.85 | 168.05 | 0.006 | 0.95 | 1.40 | 86.61 |
| Вода дистиллированная | - | 3.32 | 0.01 | - | 3.61 | - |
По данным таблицы, методом вычитания удается рассчитать САОА адсорбированной структурированной воды (на 100 см3), которая составляет 2 830 г рутина для пектина, 96 197 г рутина для хитозана, 100 г рутина для кремнезема из термальных вод Камчатки, 249 г рутина для селикагеля и 3 780 г рутина для шунгита. Такое увеличение САОА воды, адсорбированной на поверхности исследованных образцов, происходит по литературным данным (Иванов А.И., 2007) вследствие ее структурирования.
ИЗМЕНЕНИЯ АКТИВНОСТИ ФЕРМЕНТОВ АНТИОКСИДАНТНОЙ ЗАЩИТЫ МИТОХОНДРИЙ КОРНЕПЛОДА САХАРНОЙ СВЕКЛЫ (Beta vulgaris L) В ХОДЕ ОНТОГЕНЕЗА
Лаштабега Д.А., Шугаев А.Г.
Учреждение Российской академии наук Институт физиологии растений им. К.А. Тимирязева, РАН, г. Москва (127276, Москва, ул. Ботаническая, 35, тел.: (499)231-83-40,
ag_shugaev@ippras.ru)
Электрон-транспортная цепь является одним из главных источников активных форм кислорода (АФК) в клетках растений и животных. Для контроля уровня АФК в митохондриях существует эшелонированная система защиты, важнейшим компонентом которой являются антиоксидантные ферменты. Ранее нами было показано изменение метаболической активности митохондрий корнеплода в ходе онтогенеза растений. Продолжая изучение физиологических изменений в митохондриях в ходе онтогенеза мы определили активности ряда ферментов антиоксидантной защиты митохондрий: супероксиддисмутазы (MnСОД), аскорбатпероксидазы (АПО), глутатионредуктазы (ГР) и каталазы в митохопдриях растущих (возраст 75-90 дней) и зрелых корнеплодов, хранящихся при 4 ОС в течение 8-12 нед. Результаты исследований показали, что активность MnСОД составляла в период роста корнеплода около 90, а в период покоя менее 30Е/мг белка. С другой стороны, активности ключевых ферментов аскорбат—глутатионового цикла, участвующих в детоксикации Н2О2 в митохондриях покоящегося корнеплода заметно возрастали по сравнению с растущим: АПО (соответственно 370 и 200 нмолей АК/(мин мг белка), а ГР (140 и 50 нмолей НАДФН/(мин мг белка). Таким образом, переход корнеплода от периода роста к периоду покоя сопровождался разнонаправленными изменениями активности антиоксидантных ферментов митохондрий: активность СОД снижалась, тогда как активности АПО и ГР возрастали. Довольно редко встречаемым антиоксидантным ферментом митохондрий растений является каталаза, ранее было показано ее наличие только в листьях кукурузы. Нами была обнаружена довольно высокая активность каталазы (более 2Е/мг белка, которая не менялась в процессе онтогенеза) во фракции митохондрий корнеплода сахарной свеклы. Ингибиторный анализ показал, чувствительность каталазы к 1 мМ KCN составила 90-95%, тогда как к AT при 15 мМ АТ 30-35%. По литературным данным такую чувствительность проявляет изофермент каталаза 3. Для доказательства митохондриальной локализации каталазы и АПО были использованы следующие методы: 1) дополнительная очистка митохондрий в градиенте сахарозы, которая позволила значительно повысить удельную активность фермента и 2) обработка протеиназой К интактных митохондрий (активность АПО и каталазы без изменений) и митохондрий лишенных внешней мембраны – митопластов (активность АПО снижена на 95%, каталазы без изменений). Полученные результаты указывают, что АПО является мембранным белком, субстрат-связывающий центр которой локализован на внешней стороне внутренней мембраны органелл. А каталаза, локализована в матриксе митохондрий. Анализируя полученные данные, можно заключить, что ферментативная система антиоксидантной защиты митохондрий изменяется в ходе онтогенеза, реагируя на изменения напряженности энергетического обмена. В растущем корнеплоде митохондрии сильно энергизованы, поэтому высокая активность СОД, необходима для инактивации супероксида. Энергизованность митохондрий хранящегося корнеплода значительно снижена, что предполагает снижение активности антиоксидантных ферментов. Активация в этот период АПО и ГР, а также высокая активность каталазы в митохондриях покоящегося корнеплода предполагает, что эти ферменты необходимы для защиты органелл от цитозольной Н2О2.
Работа выполнена при поддержке РФФИ (гранты №07-04-01516 и №10-04-00665) Направление № 3.