Российская академия наук

Вид материалаТезисы

Содержание


Повреждения днк in vivo под воздействием
Экдистероидсодержаще растение
Влияние антиоксиданта тиофана на рост и развитие карпа в раннем онтогенезе
Cotinus coggygria
Антиоксидантная активность гепатопротективного и желчегонного препарата «царубол»
Влияние производного витамина е на
Свободнорадикальные процессы в мозге сусликов при зимней спячке и пробуждении
Фейзуллаев Б.А.
Оценка антиоксидантной емкости гуминовых и гуминоподобных веществ
Материалы и методы
Результаты и обсуждение.
Подобный материал:
1   ...   14   15   16   17   18   19   20   21   ...   47

ПОВРЕЖДЕНИЯ ДНК IN VIVO ПОД ВОЗДЕЙСТВИЕМ

ДОЛГОЖИВУЩИХ РАДИКАЛОВ БЕЛКА И ИХ НЕЙТРАЛИЗАЦИЯ ПРИРОДНЫМИ БИОАНТИОКСИДАНТАМИ


Карп О.Э., Гудков С.В., Брусков В.И.


Институт теоретической и экспериментальной биофизики РАН, г. Пущино, 142290, Московская область, г.Пущино, ул. Институтская, 3, (4967)739497, olgakarp1@rambler.ru)


Окислительный стресс, возникающий в клетках живого организма под воздействием ионизирующего излучения, приводит к образованию долгоживущих радикалов белка (ДЖРБ) с временем полужизни, достигающим 20 и более часов. Показано, что ДЖБР являются источниками образования активных форм кислорода, продолжительного протекания окислительного стресса и посредниками в переносе окислительных повреждений на другие молекулы, включая ДНК. В данной работе показана способность ДЖРБ, индуцироваанных рентгеновским излучением, вызывать повреждения в ДНК in vivo в организме крыс и мышей. С помощью метода микроядерный тест определяли количество полихроматофильных эритроцитов, содержащих микроядра в костном мозге животных. Исследовано влияние облученного в дозе 100 Гр крысиного сывороточного альбумина при внутривенном введении его самцам крыс. Введение облученного белка (1 мкг/г) приводит к увеличению количества полихроматофильных эритроцитов, содержащих микроядра, в 2,5 раза по сравнению с контролем. При скармливании в течение суток мышам обезжиренного и обезвоженного творога, облученного в дозе 100 Гр, в красном костном мозге происходит увеличение числа полихроматофильных эритроцитов с микроядрами, эквивалентное их количеству, образующемуся при тотальном облучении животных в дозе близкой к 0,2 Гр. Этот факт свидетельствует о способности долгоживущих радикалов белка сохранять свой окислительный потенциал и при переваривании пищи. При одновременном скармливании белка и приеме с питьевой водой в течение суток в качестве природных антиоксидантов 5 мМ растворов инозина, L-триптофана, L-метионина и витамина С не наблюдалось увеличения величины цитогенетических повреждений ДНК относительно интактных животных. Таким образом, установлено, что облученные белки способны приводить к повреждению структуры ДНК in vivo и показана возможность нейтрализации генотоксических повреждений ДНК с помощью некоторых природных биоантиоксидантов.

Работа поддержана грантами Российского фонда фундаментальных исследований (10-04-00949-а; 10-04-00800-а) и Президента Российской Федерации для поддержки молодых российских ученых (МК-108.2010.4).


ЭКДИСТЕРОИДСОДЕРЖАЩЕ РАСТЕНИЕ STEMMAKANTHA

SERRATULOIDES И ЕГО АДАПТАЦИЯ К УСЛОВИЯМ

ПРОИЗРАСТАНИЯ


Касимова Д.И., Хайбуллина Ф.З.


Башкирский государственный университет, г. Уфа, ул. Заки Валиди, 32, 450074, sulfirar@mail.ru


Stemmakantha serratuloides - стеммаканта серпуховидная – многолетнее растение, произрастающее на юге Западной Сибири, севере Средней Азии на солончаках и солонцеватых лугах. Является редким видом, включен в список Красных книг ряда районов (Сибирь, Алтай, Курган и др.). В «Красную книгу Республики Башкортостан» (2001) включен с категорией редкости 2 – уязвимый вид. В пределах республики встречается в юго-восточном районе Башкирского Зауралья на солонцах и солонцеватых лугах с хлоридно-сульфатным и сульфатным типом засоления. Cтеммаканта содержит экдистероиды, обладающие анаболической, адаптогенной, тонизирующей, антиоксидантной активностью. . Если Stemmakantha cartamoides – маралий корень как экдистероидсодержащее растение хорощо изучен и на основе выделенного из корневища 20-гидроксиэдизона (20 Е) был создан тонизирующий препарат «экдистен», то для стеммаканты серпуховидной также содержащей эти соединения, роль их пока неясна. Известно, что по сравнению с маральим корнем Stemmakantha serratuloides (рапонтикум серпуховидный) характеризуется более высоким содержанием экдистероидов, в то же время вид крайне редок и практически не изучен, сведения имеющиеся в литературе, скудны. Нами изучалась биология семян и начальные этапы онтогенеза Stemmakantha serratuloides. В семенах 2006г. – 2007 г. сбора в Хайбуллинском районе Республики Башкортостан определяли степень набухания, жизнеспособность, энергию прорастания и влияние на нее скарификации, стратификации, регуляторов роста, а также окислительные процессы в растениях первой вегетации по содержанию МДА (малонового диальдегида). Разнокачественные семена стеммаканты (по цвету семенной оболочки и по степени зрелости - черные, коричневые, желтые) различались степенью поглощения воды: 1,4% от сухой массы для черных, 53% для коричневых и 65% для желтых. Жизнеспособными в основном были семена с черной и коричневой окраской семенной кожуры. Поступлению воды в семена и ускорению прорастания до 50% способствовали их скарификация, продолжительная стратификация до 75-125 дней при температуру 4 С, а также обработка СК (салициловой кислотой 10 мг/л). По интенсивности протекания перикисного окисления липидов в различных органах можно оценивать неспецифические адаптационные возможности организма. Малоновый диальдегид (МДА) является своего рода «маркером» ускорения перекисного окисления. В наших опытах выявлены различия в его содержании у растений St. serratuloides, отличающихся по возрасту и условиям выращивания. Наибольшим содержанием МДА отличались семядоли проростков из стратифицированных семян, оставшихся расти в песке, а наименьшее выявлено в первом листе молодых растений из стратификацированных семян, но пересаженных в почву. У растений, произрастающих на их родной солонцовой почве, выявлено низкое содержание МДА в самом молодом листе, что, вероятно связано с адаптированностью к этой почве.


ВЛИЯНИЕ АНТИОКСИДАНТА ТИОФАНА НА РОСТ И РАЗВИТИЕ КАРПА В РАННЕМ ОНТОГЕНЕЗЕ


Кеберлайн О. В.


Новосибирский государственный педагогический институт,

г. Новосибирск (ул. Вилюйская 28, 630126, т. 244-14-32, Keberlayn@mail.ru)


Создание оптимальных условий для роста и развития рыб в условиях искусственного разведения не гарантирует высокий уровень сохранности молоди после её выпуска в естественные водоемы. Разработка технологий управления процессами роста и развитием рыб на ранних этапах онтогенеза определяет актуальность настоящего исследования.

Целью настоящего исследования явилось изучение показателей роста и развития эмбрионов и предличинок карпа в зависимости от различных способов обесклеивания оплодотворенной икры.

Исследования проводили на базе промышленного племенного рыбоводного хозяйства ООО «Маяк» Павловского района Алтайского края. Материалом для исследования служили оплодотворенная икра, эмбрионы и предличинки алтайского зеркального карпа. Оплодотворенную икру, полученную от одной пары производителей, делили на три аппарата Вейса (опытные группы). В 1-м аппарате обесклеивание производили по традиционной технологии – молоком (контрольная группа); во 2-м – масляным раствором антиоксиданта (1-я опытная) тиофана; в 3-м использовали растворитель тиофана – растительное масло (2-я опытная). На светооптическом уровне во всех исследуемых группах производили сравнительный анализ процессов бластулогенеза, гаструляции, роста и развития эмбрионов. После инкубации определяли показатели выхода предличинки из икры и ее выживаемость.

Результаты исследования показали, что интенсивность процессов бластулогенеза у эмбрионов 1-й опытной группы в период наблюдения 40 мин, 2,2 и 6 часов существенно превышала соответствующие показатели образцов контрольной и 2-й опытной групп. Выявленная тенденция также проявилась на стадиях гаструляции и органогенеза. Выживаемость эмбрионов в икре обесклеенной с использованием тиофана на 12,5% превышала соответствующие показатели икры обесклеенной молоком. Витальное исследование наиболее доступных для изучения анатомических частей эмбриона, таких как глаз, на сроке 35 часов, показало, что площадь глазного бокала у эмбрионов 1-й опытной группы была больше соответствующих показателей контрольной группы. Выживаемость эмбрионов группе с использованием антиоксиданта тиофана контрольные значения на 11,5 %. Различия интенсивности развития рыб в разных аппаратах, отчетливо проявились и в период выхода предличинки из икры. Выклев единичных личинок из икры обработанной антиоксидантом тиофаном наступил на 3 часа раньше, чем в контрольной, а массовый выклев превышал на 12,15 %. При этом % уродств в группе был ниже, чем в контроле и 2-йопытной группе.

Достоверных различий между показателями контрольной и 2-й опытной групп выявлено не было. Таким образом, использование антиоксиданта тиофана при искусственном рыборазведении оказывает положительное влияние на показатели роста и развития эмбрионов, а также предличинок карпа, увеличивает выживаемость эмбрионов в икре и уменьшает сроки выклева.


ПОЛИФЕНОЛЫ COTINUS COGGYGRIA И ALNUS BARBATA

С ВЫСОКОЙ АНТИОКСИДАНТНОЙ АКТИВНОСТЬЮ


Кемертелидзе Э. П., Схиртладзе А. В., Малания М. А.,

Шалашвили К. Г.


Институт фармакохимии им. И. Г. Кутателадзе, 0159 Тбилиси, ул. П. Сараджишвили 36, +995 517686; +995 335023

E-mail: ether_kemertelidze@yahoo.com


Для обеспечения прочной сырьевой базой производство медицинского танина растение Cotinus coggygria Scop. – Скумпия введена в культуру и в Восточной Грузии (шираки) создана ее плантация. Растение разведено в шпалерном типе 2х0.5 м с площадью питания, с полной механизацией трудоемких процессов. Активная энергия роста скумпии в условиях Восточной Грузии, дает возможность за один вегетационный период получить два урожая листьев. Установлена значительная экономическая эффективность культивированной скумпии в промышленном масштабе для производства медицинского танина, по сравнению с дико-произрастающим.

Листья культивируемой скумпии высококачественное лекарственное сырье; в них накапливаются 25-30% полифенолов, НРLС анализом в которых обнаружены 22 веществ фенольной природы. Выделены и охарактеризованы: галловая кислота, монометил-, диметил-, триметилгаллат, тетра- и пентагалоилглюкоза, мирицетин-3-0--D-галактопиранозид, мирицетин-3-0--L-рамнопиранозид. Кроме того доказано наличие высокомолекулярных танидов: гекса-, гепта- и октагаллоилглюкозы.

Широкораспространенное в Грузии растение Alnus barbata L. – ольха бородавчатая обильно цветет и плодоносит. Соплодье – шишки ольхи содержат до 15% конденсированных и гидролизуемых танидов, состоящих из 6 компонентов, главной частью которых являются галловая кислота и пентагалоилглюкоза. Спирто-водный экстракт незрелых шишек ольхи бородавчатой проявляет ясновыраженную антибактериальную, цитостатическую активность, и антидиареинное действие.

Относительная антиоксидантная активность (АОА) экстракта листьев скумпии составляет 165%, а шишек ольхи 185%, при АОА известных антиоксидантов ЭДТА – 90% и -токоферола – 97%. Количество малондиальдегида в сыворотке крови человека при фоновой концентрации 8.8 мк мол/л и иницированной двухвалентным ионом железа 11.11 мк мол/л в случае скумпии, и 20.5 мк мол/л ольхи, под влиянием экстракта листьев скумпии снижается до 5.1 мк мол/л, а экстракта ольхи до 1.14 мк мол/л.


АНТИОКСИДАНТНАЯ АКТИВНОСТЬ ГЕПАТОПРОТЕКТИВНОГО И ЖЕЛЧЕГОННОГО ПРЕПАРАТА «ЦАРУБОЛ»


Кемертелидзе Э. П., Гогилашвили Л.М., Сакварелидзе Н. С.


Институт фармакохимии им. И. Г. Кутателадзе, 0159 Тбилиси, ул. П. Сараджишвили 36, +995 517686; +995 37 27 45;

E-mail: ether_kemertelidze@yahoo.com


Из плодов широкораспространенного на Кавказе кустарникового растения Paliurus spina-chriti Mill. – держи-дерева приготовлен натуральный препарат и его готовая форма в виде капсул под названием «Tsarubol» - «Царубол». Субстанция царубола содержит вес комплекс исходного сырья, в частности: 3% флавоноидов производных кверцетина, кемпферола, изокверцетрина, 13-15 % танидов, 60 мг % проантоцианидов, 7-8 % неитральных липидов, 4-5 % фосфолипидов, состоящих из: лизофосфатидилхолина, фосфатидной кислоты, фосфатидилинозита, фосфатидилхолина, фосфатидилэтанолатина. Кроме того в нем обнаружены аминокислоты: аргинин, аспарагиновая кислота, треолин, аланин, изолеицин, леицин и фенилаланин с общим количеством 100 мг%. Царубол оказался высокоэффективным гепатопротекторным и желчегонным средством. Он нормализует действие желчевыделительной и, в особенности желчеобразовательной функции, подавляет процессы перекисного окисления липидов в печеночных клетках и понижает уровень трансаминази в крови, обеспечивая тем самым защитный эффект и сохранения биосинтетической активности печени. По холеретическому действию и гепатопротекторным эффектом царубол превосходит силибор. Царубол с успехом прошел клиническую апробацию и применяется в медицинской практике для лечения и профилактики гепатохолецистита различного генеза.

Одним из обусловливающих механизмов гепатозашитного и холеретического действия царубола по-видимому является его высокая антиоксидантная активность (АОА). Относительная АОА царубола состовляет 189%, при АОА известных антиоксидантов ЭДТА – 90% и -токоферола – 97%. Количество малондиальдегида в сыворотке крови человека, при фоновой концентрации 8.12 мк мол/л и иницированной двухвалентным ионом железа 11.96 мк мол/л, под влиянием царубола снижается до 4.7 мк мол/л.

Антиоксидантная активность оценивалась определением промежуточного липидно-перекисного процесса – малондиальдегида (МДА) в опытах in vitro. Липидно-перекисное иницирование происходило под влианием двухвалентных ионов железа. МДА определялся тестом тиобабитуровой кислоты спектрофотометрическим методом.


ВЛИЯНИЕ ПРОИЗВОДНОГО ВИТАМИНА Е НА

ПОКАЗАТЕЛИ НЕФРОТОКСИЧНОСТИ ИНДУЦИРОВАННОЙ ЦИСПЛАТИНОМ У МЫШЕЙ ЛИНИИ С57BL/6


Клименко Е.П.1, Донченко Г.В.1, Тодор И.Н.2, Бурлака Ю.Б.1,

Кузьменко А.И.1


1Институт биохимии им. О. В. Палладина НАН Украины, Киев, 01601, Украина, Киев ул. Леонтовича, 9, тел.:+ 38(044) 2345974, secretar@biochem.kiev.ua, epklimenko@gmail.com

2Институт экспериментальной патологии, онкологии и радиобиологи им. Р.Е. Кавецкого НАН Украины, Киев


Среди многообразия противоопухолевых препаратов цисплатин является одним из наиболее эффективных и широко используемых в онкологической практике, однако наряду с его высокой противоопухолевой активностью, он цитотоксически действует и на нормальные ткани. Основным лимитирующим фактором использования цисплатина является нефротоксичность, которая имеет кумулятивный характер, поэтому поиск новых фармакологических средств для уменьшения токсических проявлений его действия, чрезвычайно актуален.

Целью данной работы было исследовать влияние производного витамина Е на биохимические показатели нефротоксичности, индуцированной цисплатином, у мышей линии С57ВL/6.

Исследования были проведены на мышах линии С57ВL/6 (массой 20-25 г). В качестве экспериментальной модели использовали карциному легкого Льюис (модель метастазирующей опухоли). Подопытные животные были разделены на 6 групп.

1 группа – контроль, интактные животные, которые не получали никаких препаратов. Мышам со 2 по 6 группу – перевивали карциному легкого Льюис. Животные 3 группы получали внутрибрюшинные инъекции цисплатина в дозе 2,2 мг/кг (общее количество инъекций – 6). Мышам 4 группы per os вводили оливковое масло. Животным 5 группы вводили per os аналог витамина Е (5 мг/кг) растворенный в оливковом масле.

Мыши 6 группы получали аналог витамина Е и цисплатин в вышеуказанных концентрациях и способах введения.

Функциональное состояние почек оценивали по основным биохимическим показателям – содержанию креатинина и мочевины в сыворотке крови мышей линии С57BL/6 с карциномой Льюис. Цисплатин введеный в дозе 2,2 мг/кг, достоверно повышает содержание вышеуказанных показателей, по сравнению с контролем (р<0,05), что свидетельствует о том, что в данной дозе цитостатик индуцирует нефротоксичность у подопытных животных. Аналог витамина Е, введенный в дозе 5 мг/кг, не влияет на уровень креатинина и мочевины по сравнению с контролем. При комбинированном введении аналога витамина Е и цисплатина вышеуказанные показатели, статистически достоверно снижаются по сравнению с показателями в группе животных, которым вводили один цисплатин.

Таким образом, нами было показано, что производное витамина Е в дозе 5 мг/кг снижает нефротоксичность, индуцированную цисплатином, однако полной коррекции он не дает. Дальнейшие исследования должны быть направлены на изучение механизмов нефропротекторного действия аналога витамина Е.


СВОБОДНОРАДИКАЛЬНЫЕ ПРОЦЕССЫ В МОЗГЕ СУСЛИКОВ ПРИ ЗИМНЕЙ СПЯЧКЕ И ПРОБУЖДЕНИИ


Кличханов Н.К., Исмаилова Ж.Г., Астаева М.Д., Магомедов К.Г., Шихамирова З.М., Дибиргаджиева П.Ш., Раджабова З.Г.,

Фейзуллаев Б.А.


Дагестанский государственный университет, г. Махачкала, ул. Гаджиева, 43а, тел.: 8(8722)675915, e-mail: klich-khan@mail.ru


Зимняя спячка (гибернация) – это закрепленная в ходе эволюции уникальная способность к минимизации жизненных функций организма, позволяющая ряду видов млекопитающих в течение многих месяцев переживать холод, бескормицу, сокращение светлого периода суток. Спячка у грызунов протекает в виде последовательных циклов, баутов, прерываемых кратковременными пробуждениями. Во время спонтанного пробуждения за короткий период (примерно 2,5 ч) биохимические и физиологические параметры возвращаются к эутермному уровню без явных повреждений. Резкие изменения физиологической активности и уровня метаболизма при входе и выходе из спячки могут стимулировать образование активных форм кислорода (АФК). Однако не вполне ясно как зимоспяшие животные защищают клетки своих тканей от последствий окислительного стресса при этом. Нами исследована интенсивность свободнорадикальных процессов в мозге сусликов при глубокой спячке и в ходе пробуждения. В суспензии синаптосом, выделенных из коры головного мозга, исследовали содержание малонового диальдегида (МДА) – маркера перекисного окисления липидов (ПОЛ), а в мембранах синаптосом – содержание карбонильных и тиоловых групп – маркеров окислительного модификации белков (ОМБ). Кроме того, в суспензии синаптосом исследовали содержание восстановленного глутатиона, активность супероксиддисмутазы (СОД) и каталазы.

В состоянии глубокой спячки (температура тела 2°С) как интенсивность ПОЛ, так и ОМБ в синаптосомах существенно снижена, что свидетельствует о подавлении процессов генерации активных форм кислорода в мозге. На начальных этапах согревания сусликов, когда температура тела животного достигает 10, 20°С содержание МДА в суспензии синаптосом снижается. Однако по достижении температуры тела 25°С содержание МДА в синаптосомах достоверно возрастает и остается повышенным до полного согревания животного. Такая же динамика накопления МДА обнаружена и в инкубируемых in vitro в среде Фентона пробах синаптосом.

Содержание карбонильных групп в белках мембран синаптосом увеличивается в ходе согревания сусликов, достигая максимума при температуре тела 25°С. Дальнейшее согревание животного существенно снижает степень карбонилирования белков. Подобным же образом изменяется и содержание тиоловых групп в мембранных белках. Таким образом, в ходе согревания сусликов существенная интенсификация процессов ПОЛ и ОМБ в синаптосомах происходит при температуре тела 25°С. Дальнейшее согревание по-разному влияет на свободнорадикальные процессы в белках и липидах синаптосом. Интенсивность свободнорадикальных процессов в липидах остается повышенной, а в белках снижается.

Нами обнаружено, что при согревании сусликов до 25°С происходит значительное снижение содержания глутатиона, активности СОД и каталазы в синаптосомах. Дальнейшее согревание животного вплоть до полного пробуждения приводит к активации компонентов антиоксидантной защиты синаптосом. Полученные данные свидетельствуют о том, что на определенном этапе пробуждения (25°С) в мозге развивается окислительный стресс, но за счет последующей активации системы антиоксидантной защиты удается избежать повреждения липидных и белковых компонентов синаптосом.


ОЦЕНКА АНТИОКСИДАНТНОЙ ЕМКОСТИ ГУМИНОВЫХ И ГУМИНОПОДОБНЫХ ВЕЩЕСТВ


Кляйн О.И.1, Николаев И.В.1, Куликова Н.А.1,2, Степанова Е.В.1,

Королева О.В.1


1Институт биохимии им.А.Н.Баха РАН, г. Москва, 119071, Ленинский пр., д.33, к.2, тел. +7(495)9544477, klein_olga@list.ru

2факультет почвоведения МГУ им. М.В. Ломоносова, г. Москва 19991, Ленинские горы, д.1, стр.12, тел. +7(495)9394456,

knat@darvodgeo.ru)


Введение. Гуминовые вещества (ГВ) являются примерами природных физиологически активных биополимеров нерегулярного строения, характеризующихся высокой полифункциональностью в экосистемах. Полифункциональность ГВ является основой для широкого использования гуминовых препаратов в качестве регуляторов роста и компонентов кормов, пищевых продуктов и косметических средств. Так как одним из предполагаемых механизмов действия ГВ является их антиоксидантная активность, то целью настоящей работы являлась количественная оценка антиоксидантной емкости (АОЕ) гуминовых и гуминоподобных веществ (ГПВ) и поиск возможных структурных предикторов, определяющих антиоксидантную активность ГВ и ГПВ.

Материалы и методы. Объектами исследования являлись стандартные образцы, выпускаемые международным обществом по изучению ГВ (International Humic Substances Society, США) и представляющих собой различные фракции ГВ поверхностных вод, включая нефракционированное органическое вещество (SRDOM), гуминовые (SRНA) и фульвокислоты (SRFA), а также гуминовые кислоты угля СHAALD (Aldrich, США) и гуминоподобные вещества ГПВ (ГПВ-45 и ГПВ-70), полученные на 45 и 70 сутки твердофазного культивирования базидиомицета Cerrena maxima 0275 на овсяной соломе [1]. Препараты ГВ и ГПВ были охарактеризованы методами элементного анализа, гель-проникающей хроматографии, спектроскопии ЯМР 13С и потенциометрического титрования. АОЕ гуминовых препаратов определяли по отношению к катион радикалу АБТС (диаммониевая соль 2,2'-азино-ди-(3-этилбензтиазолинсульфоновой кислоты)) в 100 мМ калий фосфатном буфере, pH 6,8 [2], и по отношению к пероксильному радикалу методом ORAC [3] в 75 мМ натрий фосфатном буфере, pH 7,4. АОЕ выражали в мкмоль эквивалентов тролокса (ТЭ) на мг.

Результаты и обсуждение. АОЕ исследованных ГВ и ГПВ варьировалась в пределах 0,507-1,103 и 0,356-1,230 мкмоль ТЭ/мг по отношению к катион-радикалу АБТС и пероксильному радикалу соответственно, что в среднем в 2,9 раза ниже по сравнению с α-токоферолом – одним из наиболее активных природных антиоксидантов. Проведенный корреляционный анализ полученных значений АОЕ со структурными дескрипторами ГВ и ГПВ показал наличие значимой (p < 0,05) корреляции АОЕ с содержанием карбоксильных и фенольных групп в ГВ и ГПВ, что позволяет предположить участие этих функциональных единиц в реализации антиоксидантных свойств ГВ.

Благодарности. Работа подготовлена при финансовой поддержке ГК П211 в рамках федеральной целевой программы «Научные и научно-педагогические кадры инновационной России» на 2009-2013 годы.