Тезисы докладов
| Вид материала | Тезисы |
- Тезисы докладов, 3726.96kb.
- Тезисы докладов, 1225.64kb.
- Правила оформления тезисов докладов Тезисы докладов предоставляются в электронном виде, 22.59kb.
- «Симпозиум по ядерной химии высоких энергий», 1692.86kb.
- Требования к тезисам докладов, 16.83kb.
- Тезисы докладов научно-практической, 6653.64kb.
- Тезисы докладов 1 Межвузовская научно -практическая конференция студентов и молодых, 100.64kb.
- Тезисы докладов и заявки на участие, 104.97kb.
- Тезисы докладов, принятые Оргкомитетом для опубликования в Материалах форума, 788.61kb.
- Тезисы докладов, принятые Оргкомитетом для опубликования в Материалах форума, 1066kb.
ИЗУЧЕНИЕ СОСТАВА БИОЛОГИЧЕСКИ АКТИВНЫХ ФРАКЦИЙ ЭКСТРАКТА ИЗ ПЕЧЕНИ НЕОНАТАЛЬНОГО ПОРОСЕНКА
И.В.Урываева 1), Р.И.Атауллаханов 2), А.В.Алесенко3), Э.И.Гальперин 4), Т.Г.Дюжева4), Т.М.Мельникова 5), Л.В.Платонова4), О.В.Рыжкова3) , Г.В.Делоне1)
1) Институт биологии развития РАН; 2) Институт иммунологии МЗ;
3) Институт биохимической физики им. Н.М. Эмануэля РАН,
4) Первый Московский медицинский университет
им. И.М.Сеченова; 5)Институт органической химии РАН
Цель проекта: создать для лечения повреждений и заболеваний печени лекарственный препарат, состоящий из набора естественных индукторов регенерации печени, образующихся в органе в период регенерации.
Задачей этапа 2011 года являлось получение сведений об индивидуальных соединениях, обладающих биологической актив-ностью, приготовленных из водных экстрактов печени нео-натального поросенка.
Результаты. Методом гельфильтрации на колонке TSK-50S экстракта печени неонатального поросенка получены в препаративных количествах три фракции (1, 2а, 4) с регене-рирующим эффектом на модели токсического повреждения печени мышей. В текущий период детально изучена количественно доминирующая фракция 1, а также фракция 2а. Исследовали четыре образца фракции 1 (№ 17, 18, 19, 20).
Содержание липидов в каждом образце колебалось от 10 до 20 % (образцы фракции 1: 11 % – образец № 19, 18 % - № 17, 20 % - № 18 и 20, а также 10 % – фракция 2а). В исходном экстракте и во всех образцах фракции 1 и 2а при анализе фосфолипидов были обнаружены фосфатидилхолин, сфингомиелин, фосфатидил-этаноламин, фосфатидилинозитол и фосфатидилсерин, то есть практически полный спектр фосфолипидов, характерных для печени млекопитающих. Все исследуемые образцы имели идентичный фосфолипидный состав. Различия были только в содержании общих липидов в пробе, но эти вариации были незначительны для образцов 17-20, однако в экстракте печени содержание общих липидов было выше в 3 раза по сравнению с этими образцами фракции 1, а проба 2а содержала минимальное количество липидов (10 %). Среди нейтральных липидов были обнаружены моно- и диглицериды, триглицериды и жирные кислоты, а также холестерин. Отмечено довольно высокое содержание жирных кислот и триглицеридов. Экстракт содержал больше нейтральных липидов, чем фракция 1 (образцы 17-20), а фракция 2а содержала минимальное количество нейтральных липидов, также как и фосфолипидов.
Изучен белковый и нуклеиновокислотный (НК) состав фракции 1. УФ спектрофотометрия показала наличие пиков поглощения при 210 и 260 нм, что свидетельствует о наличии пептидов и НК. Однако агарозный гель-электрофорез и снижение оптической плотности в растворе при 260 нм после переосаждения спиртом показали отсутствие высокомолекулярных НК. Нуклеиновые кислоты представлены низкомолекулярными полинуклеотидами (не более 10 осн.) или же отдельными нуклеотидами. При переосаждении спиртом наблюдался довольно большой осадок, что может свидетельствовать о присутствии в пробе большого количества полисахаридов.
Измерение концентрации белка по Брэдфорд показало наличие белка в образцах в концентрациях: 17 – 0,35 мг/мл, 18 – 0,34 мг/мл, 19 – 0,52 мг/мл, 20 – 0,46 мг/мл. В то же время при электрофорезе в ПААГ, окрашенном кумасси, высокомолекулярных белков нет. По всей видимости, в образцах присутствуют пептиды размером не более 10 кДа.
Выводы. Активные фракции содержат липиды (до 20 %), в состав которых входят фосфолипиды и нейтральные липиды. Представлен полный спектр фосфолипидов, среди нейтральных липидов в наибольшем количестве жирные кислоты и триглицериды. Полипептидный и НК состав фракций представлен пептидами размером не более 10 кДа и полинуклеотидами (не более 10 осн.). Исследования продолжаются.
СИНТЕЗ НОВОГО ПРЕПАРАТА, АКТИВНОГО ПРОТИВ РЕЗИСТЕНТНЫХ ШТАММОВ МИКОБАКТЕРИЙ ТУБЕРКУЛЕЗА, И ЛЕКАРСТВЕННОЙ ФОРМЫ ДЛЯ НЕГО
А.Р.Хохлов1), А.И.Барабанова1), Е.В.Корчагина2), И.Н.Федорова1), О.Е.Филиппова2), В.С.Вележева1)
1) Институт элементоорганических соединений им. Несмеянова РАН, Москва; 2) Физический факультет Московского государственного университета, Москва
Туберкулез с множественной лекарственной устойчивостью в настоящее время является практически неизлечимым заболеванием по трем основным причинам: 1) отсутствие противотуберкулезных препаратов (ПТП), активных против резистентных штаммов микобактерий туберкулеза (M. tuberculosis); 2) высокая токсичность существующих ПТП и 3) отсутствие адресной доставки лекарственного вещества в места персистенции возбудителя туберкулеза (в макрофаги).
Цель настоящего исследования состояла в синтезе потенциальных ПТП на основе халконов индольного ряда и/или пиридазино[4,3-b]индолов и разработке полимерного носителя на основе блок-сополимеров хитозана и полиэтиленгликоля (ПЭГ-хитозан), обеспечивающего пролонгированное выделение и направленный транспорт ПТП в макрофаги.
В целях повышения противотуберкулезной активности была модифицирована структура хит-соединения GS-25 из ряда пиридазино[4,3-b]индолов и его 2-арилиден-3-индолинонового предшественника путем введения липофильных и гидрофильных заместителей у кольцевого атома азота и в арильном фрагменте пиридазиноиндольной и арилидениндолиноновой систем. Среди испытанных in vitro и ex vivo соединений найдено два соединения, активность которых сопоставима с активностью рифампицина – золотого стандарта противотуберкулезной активности. Высокая антимикобактериальная активность (МИК 1.37–2.53 μg/mL) и низкая токчичность в отношении человеческих клеток делает эти соединения перспективными кандидатами в ПТП.
Получены лекарственные наноформы на основе блок-сополимеров хитозана и ПЭГ с разным содержанием олигомерных боковых цепей ПЭГ 0.07, 0,13, 1.0, 2.0 и 3.0 мол. %. Блок-сополимеры самопроизвольно образуют наночастицы, ядро которых состоит в основном из хитозана, а оболочка – из цепей ПЭГ. Размеры наночастиц из ПЭГ-хитозанов определены методом динамического светорассеяния. Морфология ПЭГ-модифи-цированных наночастиц хитозана исследована методом просвечивающей электронной спектроскопии. Методом УФ-спектроскопии изучена солюбилизация гидрофобных Пир-индолов в наночастицах хитозана с разным содержанием ПЭГ и кинетика выделения Пир-индолов при физиологических условиях. Показано, что устойчивые наночастицы образуются при содержании в одной цепи хитозана не более 2 боковых групп ПЭГ, такие наночастицы эффективно абсорбируют Пир-индол.
Таким образом, в результате проведения настоящих исследований были получены новые соединения с высокой противотуберкулезной активностью, обеспечивающие лечение туберкулеза, а также стабильная в среде организма лекарственная форма на основе биосовместимого и биоразлагаемого полимера природного происхождения для обеспечения направленной доставки нанокапсулированного препарата к биологическим мишеням и его пролонгированного выделения.