Тезисы докладов
| Вид материала | Тезисы |
- Тезисы докладов, 3726.96kb.
- Тезисы докладов, 1225.64kb.
- Правила оформления тезисов докладов Тезисы докладов предоставляются в электронном виде, 22.59kb.
- «Симпозиум по ядерной химии высоких энергий», 1692.86kb.
- Требования к тезисам докладов, 16.83kb.
- Тезисы докладов научно-практической, 6653.64kb.
- Тезисы докладов 1 Межвузовская научно -практическая конференция студентов и молодых, 100.64kb.
- Тезисы докладов и заявки на участие, 104.97kb.
- Тезисы докладов, принятые Оргкомитетом для опубликования в Материалах форума, 788.61kb.
- Тезисы докладов, принятые Оргкомитетом для опубликования в Материалах форума, 1066kb.
Сборник представляет интерес для ученых и специалистов, занимающихся проблемами теории и практики медицины.
Общие проблемы этиологии и патогенеза
ИССЛЕДОВАНИЕ ПУСКОВЫХ МЕХАНИЗМОВ РАДИАЦИОННО-ИНДУЦИРОВАННОЙ ХРОМОСОМНОЙ НЕСТАБИЛЬНОСТИ ДЛЯ ЦЕЛЕЙ ПРОГНОЗИРОВАНИЯ КАНЦЕРОГЕННЫХ РИСКОВ И ИСХОДОВ ТЕРАПИИ ЗЛОКАЧЕСТВЕННЫХ НОВООБРАЗОВАНИЙ
С.Г.Андреев1), А.В.Алещенко1), И.В.Сальников1), Ю.А.Эйдельман1), А.В.Севанькаев2), И.К.Хвостунов2), В.С.Пятенко2), О.Н.Коровчук 2)
1) Институт биохимической физики им. Н.М.Эмануэля РАН, Москва
2) Медицинский радиологический научный центр Минздравсоцразвития, Обнинск
В 2011 году были продолжены работы по исследованию механизмов комбинированного действия радиации и нерадиа-ционных факторов, модифицирующих хромосомную нестабиль-ность (ХН). Ранее было обнаружено усиление ХН в клетках CHO-K1 при увеличении времени между пересевами после облучения. Т.к. при таких условиях эксперимента достигается высокая степень конфлуентности, необходимо оценить роль ограничений пролиферации (ингибирования синтеза ДНК и/или возрастания доли покоящихся клеток) в проявлении ХН.
Была проведена серия экспериментов с варьированием условий культивирования: ограничение пролиферации достигалось за счет увеличения (*) размера колоний; (**) времени пребывания в конфлуентности. Клетки высевались перед облучением в дозе 3 Гр с низкой плотностью (~100 выживших клеток на флакон), выдерживались без пересева в течение 10 суток, после чего определялся уровень дицентриков. Частота дицентриков совпала с ранее измеренной при стандартной схеме культивирования (пересев каждые 2 суток). Затем клетки пересевались; на 11-е сутки частота дицентриков возрастала в 2 раза. Таким образом, нахождение клеток в покое за счет ограничений роста в пределах колонии не изменяет ХН по сравнению со стандартной схемой, в которой практически все клетки делящиеся. В то же время кратковременная стимуляция пролиферации (при пересеве) облученных клеток существенно усиливает ХН. Наиболее вероятная интерпретация заключается в делении ранее покоившихся клеток с аберрациями, однако роль байстендер-взаимодействий также не может быть исключена.
Для исследования роли ограничения пролиферации за счет кон-флуентности была проведена серия экспериментов по альтернатив-ной схеме: клетки высевались при высокой плотности (106 на фла-кон), как и при стандартном варианте, и 10 суток выдерживались без пересева, при этом ~6 суток находились в состоянии конфлуентности. Далее клетки культивировались с пересевом через 3 суток, и аберрации измерялись через сутки после каждого пересева. Обнаружено, что частота дицентриков более чем в 4 раза превышает таковую при стандартной схеме на всех временах после облучения. В этой схеме эксперимента, в отличие от предыдущей, усиление ХН вызвано не стимуляцией, а подавлением проли-ферации. Таким образом, обнаружены сложные взаимоотношения между стимуляцией и ингибированием деления клеток и уровнем ХН. Этот парадоксальный результат нуждается в дальнейшем исследовании.
Ранее нами было показано, что кратковременное ингибирование эксцизионной репарации однонитевых разрывов ДНК в первом клеточном цикле приводит к усилению радиационно-индуцированной ХН на временах до 10 суток. В данной работе исследовался вопрос, какую роль в формировании ХН играет репарация двунитевых разрывов ДНК. Использовали кратко-временное ингибирование (2 ч) ключевого фермента негомо-логичной репарации, каталитической субъединицы ДНК-протеин-киназы, селективным ингибитором NU7026 (в концентрации 10 µМ). Показано существенное возрастание частоты дицентриков (до 2 раз) и хроматидных аберраций (до 20 раз) после облучения в дозе 3 Гр в присутствии NU7026. Этот эффект имеет место на ранних временах (до 3 суток) и не наблюдается при действии NU7026 в отсутствие облучения. Таким образом, 2-часовое ингибирование ДНК-ПКкс вызывает на временах до трех суток всплеск нестабильности, которая затем спадает и в последующих клеточных поколениях не отличается от чисто радиационно-индуцированной.