Действие экстракта гриба Fusarium на биохимические показатели прорастания семян
Дипломная работа - Сельское хозяйство
Другие дипломы по предмету Сельское хозяйство
?льтура хорошо растет и образует колонии с пушистым войлокообразным мицелием. На сусло-агаре, на 7-е сутки мицелий приобретает светло-кремовый цвет. Края колонии равные. Штамм имеет несептированный мицелий. Макроконидии веретенообразные, серповидные, реже конечные. Строма в культуре риса желтая. Оптимальные условия для роста и биосинтеза убихинона t -280C, pH среды 5,0
Физиолого-биохимические признаки. В качестве источника углерода штамм использует глюкозу, сахарозу, мальтозу, этиловый и изопентиловый спирты, слабо растет на метаноле.
Источниками азотного питания служат сульфат аммония, нитрат аммония, хлорид аммония. Усваивает кукурузный экстракт, слабее дрожжевой автолизат и пептон.
Для биосинтеза убихинона на синтетической среде необходимо наличие этилового и изопентилового спиртов или глюкозы. Штамм активно развивается на вторичном сырье солодовом отваре, отваре виноградных выжимок, пивном сусле, молочной сыворотке. Обычно используемая дорогостоящая синтетическая среда Чапека не содержит органических форм азота и поэтому не обеспечивает биосинтеза достаточного для микробиологической промышленности количества убихинона Q-10 [45].
Предлагаемая среда разбавленная молочная сыворотка (1:1) содержит необходимые органические соединения (белковые вещества, аминокислоты, углеводы, молочную кислоту, жир, витамины), что позволяет увеличить выход биомассы и убихинона, определенного методом Крэйна в 1,34 и 3,5 раза, ускорить и упростить технологический процесс. При этом снижается себестоимость целевого продукта, за счет удешевления среды в 10 раз, обеспечивается безотходная, экологическая приемлемая технология переработки молочных продуктов.
Культивирование нового штамма F. sambucinum 139 на молочной сыворотке, разведенной водой 1 1 позволяет получить до 44,0 г/л биомассы и до 462,0 мкг/гсб убихинона Q-10, что выше по сравнению с прототипом F. sambucinum, культивируемого в подобных условиях, соответственно в 2,3 раза и в 1,8 раз.
1.7.3 Гриб Fusarium sambucinum штамм BKMF 3051 D
Штамм предназначен для медицинской и пищевой промышленности и может быть использован для получения биологически активных веществ, таких как фосфолипиды, ферменты, простагландины и витамины [2].
Получаемые данным способом биологически активные вещества могут быть использованы в косметической промышленности для приготовления косметических средств (кремы, шампуни и т.д.) [17].
В медицине указанные биологически активные вещества могут быть использованы в качестве субстанции для приготовления лекарственных средств, которые применяются при лечении язвы желудочно-кишечного тракта и ран различной этиологии [5].
В ветеринарии простагландины используют для синхронизации охоты у сельскохозяйственных животных, для ликвидации яловости и для пересадки социтов с целью создания высокопородистого скота.
Известен способ получения фосфолипидов микробиологическим методом путем культивирования дрожжей на жидкой питательной среде.
Однако этот способ не позволяет одновременно получить другие биологически активные вещества, такие как простагландины, ферменты и витамины.
Известен способ получения простагландинов методом инкубирования арахидоновой кислоты с гомогенатом пузырьковых желез баранов.
Недостатком указанного способа является ограниченность сырьевой базы фермента, и способ не является промышленным.
Также известен способ получения простагландинов из кораллов Карибского моря Plexawra Homomalla, но выделяют этим способом только производные простагландина А2, которые не получили широкого применения в медицине и ветеринарии, и поэтому необходима переработка их в ПГЕ2 и F2?.
Известен способ получения коллагеназы микробиологическим методом. В качестве продуцента используют Clostridium histolyticum, единственным недостатком которого является продукция летального ?-токсина и гемолизина, что требует тщательной и дорогой очистки продукта или использования нетоксичных специально выведенных штаммов.
Известен способ получения липидов, обладающих хемотаксическим действием, состоящий в культивировании гриба Fusarium sambucinum штамма BKMF-842 на питательной среде, содержащей источники углерода, азота и фосфора, при аэрации воздухом, составляющей 0,8-1,2 л/л/мин, с последующим отделением биомассы и выделением целевого продукта.
Недостатком указанного способа является то, что культуральная жидкость, содержащая биологически активные вещества, не используется, что значительно снижает выход целевого продукта.
Здесь выход целевых продуктов достигается тем, что в качестве продуцента используют гриб Fusarium sambucinum штамм BKMF 3051 D, который выращивают на питательной среде следующего состава, г/л: меласса 20-30; сахароза 20-25; аммоний азотнокислый 3-4; калий фосфорнокислый однозамещенный 2-5, при температуре 26оС с перемешиванием мешалкой со скоростью 210 об/мин, аэрацией 1 л/л/мин в течение 32-72 ч. По окончании роста гриба биомассу отделяют от культуральной жидкости, которую стабилизируют добавлением 7% по объему этилового спирта и получают продукт следующего состава, мг/л: фермент с коллагеназной активностью 100-300; фосфолипиды 8-12; простагландин Е2 и его эфиры 2-5; простагландин F2? и его эфиры 1-6 [12].
Биомассу инкубируют в среде с этанолом четыре раза последовательно, извлекая биологически активные вещества органическими растворителями. Биологически активные вещества, извлеченные из биомассы, растворяют в этиловом спирте или масле (парфюмерном, подсолнечном и т.д.) до следующей концентрации биологически активных в