Спектрофотометрия в фармакопейном анализе
Дипломная работа - Медицина, физкультура, здравоохранение
Другие дипломы по предмету Медицина, физкультура, здравоохранение
?у спектру является ценным дополнением к химическим и физико-химическим методам фармакопейного анализа. Далее мы рассматриваем некоторые случаи поглощения в ультрафиолетовой области, используемые рядом фармакопей для определения подлинности органических лекарственных веществ.
Указание длин волн при максимумах поглощения является лишь ориентировочной характеристикой, так как не дает возможности судить о виде спектра.
,002% раствор препарата в 0,01Н растворе соляной кислоты в области от 220 до 350 нм имеет максимум поглощения около 251 нм (Имизин, ГФХ).
В данном случае, очевидно, следует или целиком промерить указанную область, что при отсутствии регистрирующего прибора требует значительного времени, или сделать ряд измерений в области, близкой к 251 нм, например 10 нм, и установить максимум.
Чаще приводят максимумы и минимумы при определенных длинах волн и соответствующие величины поглощения.
Ультрафиолетовый спектр раствора в 0,1Н соляной кислоте имеет два максимума - при 241 нм и при 291 нм, поглощение 0,001% раствора при толщине слоя 1 см при 241 нм, около 0,50 и при 291 нм, около 0,67. (Антазолина гидрохлорид, Международная фармакопея, Второе издание).
Иногда величину поглощения выражают в виде удельного показателя поглощения, Е (1%, 1 см).
Удельный показатель поглощения, Е (1 %, 1 см), при длине волны 278 нм 290-305 (0,002% водный раствор) (Левомицетин, ГФХ).
Если кривая поглощения изменяется в зависимости от pH раствора, указывают значение pH, при котором проводится измерение.
Ультрафиолетовый спектр раствора в фосфатном буфере, pH 7,5, имеет максимум только при 252 нм, поглощение 0,0005 раствора при толщине слоя 1 см около 0,4 (Сульфафуразол, Международная фармакопея, Второе издание).
Раствор в 0,01 н. едком натре имеет максимум при 326 нм, Е (1%, 1 см) - около 65, и минимум при 294 нм, Е (1%, 1 см) - около 35.
Раствор в смеси 10 объемов 0,1Н соляной кислоты и 40 объемов 95% спирта, доведенных водой до 100 мл, имеет максимум при 300 нм, Е (1%, 1 см) - около 50, и минимум при 275 нм, Е (1 %, 1 см) - около 40 (Левотироксин-натрий, Скандинавская фармакопея).
Некоторые фармакопеи вместо абсолютных величин поглощения принимают отношение адсорбции при максимуме к абсорбции при минимуме, что дает возможность до некоторой степени судить о наличии поглощающих примесей.
,001 % раствор препарата в 0,1Н растворе едкого натра имеет максимумы поглощения при 256, 283 и 365 нм. Отношение D при 256 нм к D при 365 нм составляет 2,8-3,0 (Фолиевая кислота, ГФХ).
Для феноксиметилпеннцииллина по той же фармакопее проводят измерение следующим образом.
Около 0,1 г препарата (точная навеска) растворяют в 4 мл 5% раствора гидрокарбоната натрня, разводят водой до 500 мл и определяют оптическую плотность (D) при длине волны 268 нм и при длине волны 274 нм в кювете с толщиной слоя 1 см. Контрольным раствором служат 4 мл 5% раствора гидрокарбоната иатрия, разведенные водой до 500 мл.
Отношение D при длине волны 268 нм к D при длине волны 274 им должно быть не менее 1,21 и не более 1,24.
В случае стандарта идентификация веществ сводится к сравнению двух спектров поглощения, полученных при одних и тех же условиях.
Ультрафиолетовый спектр 0,0005% раствора в спирте имеет максимумы и минимумы яри тех же длинах волн, что н раствор стандарта, одинаковой концентрации и одновременно измеренный; соответствующие величины поглощения, рассчитанные на сухое вещество, при максимуме поглощения около 281 нм не отличаются более чем на 3% (Эгинилэстрадиол, Фармакопея США XVII).
Последний метод обеспечивает наиболее достоверные результаты и должен быть рекомендован для фармакопейных испытаний на подлинность.
.2 Испытание на чистоту спектометрией в ультрафиолетовом спектре
Метод спектрофотометрии в ультрафиолетовой области успешно используется как для идентификации и количественного определения, так и в испытаниях на чистоту.
Применение ультрафиолетовой спектрофотометрии для проверки доброкачественности фармакопейных препаратов является наиболее ценным в случаях, когда примеси или продукты разложения поглощают в области, отличной от исследуемого вещества. Таким образом определяют содержание адреналона, имеющего максимум при 310 им, в адреналине, максимум поглощения при 278 нм.
Указываемые в фармакопейных статьях величины поглощения, определяющие предельное содержание примеси как не более..., устанавливаются эмпирическим путем.
-оксифенилтриметиламмоний бромид, сопутствующий йеостигмину бромиду, имеет максимум при 294 нм.
Поглощение 0,05% раствора в 0,1М карбонате натрия при 294 нм не более 0,03 - предел содержания 3 мг на 1 г (Неостнгмнн бромид, Скандинавская фармакопея).
Аналогично определяется содержание гитоксина в дигитоксине по Международной фармакопее Второго издания.
Растворяют около 5 мг препарата (точная навеска) в 1 мл метилового спирта и доводят глицерином или концентрированной соляной кислотой до объема 25 мл. Поглощение этого раствора после часа стояния при 352 нм около 0,28 (не более 5%).
Предел содержания поглощающих примесей может быть установлен по величине отношений абсорбций при различных максимумах. При анализе циаиокобаламина по Государственной фармакопее X издания определяют оптическую плотность (D) раствора, приготовленного для количественного определения в кювете с толщиной слоя 1 см при длинах волн 278, 361 и 548 нм.
Отношение D при 361 нм к D при 548 нм должно быть от 3,0 до 3,4.
Отношение D при 361 нм к D при 278 нм должно быть от 1,7 до 1,88.
Изучение ультрафиолетовых спектров является ценным при ис