Курсовая работа по фармацевтической химии тема: «Методы анализа лекарственных средств производных арилалкиламинов»

Вид материала

Курсовая

Содержание 2.4. Биологический метод Описание метода Испытание 0,1% раствора адреналина Глава 3. ФАРМАКОПЕЙНЫЕ ПРЕПАРАТЫ 3.1. Solutio Adrenalini hydrochloride 0,1 3.2. Noradrenalini hydrotartas.Норадреналина гидротартрат Температура плавления Удельный показатель поглощения Сульфатная зола 3.3. Solutio Noradrenolini hydrotartratis 0,2% pro injektionibus.Раствор норадреналина гидротартрата 0,2% для инъекций 3.4. Ephedrine hydrochloridumЭфедрина гидрохлорид Температура плавления Соли аммония Органические примеси 3.5. Solutio Eppedrini hydrochloridi 5% pro injektionibusРаствор эфедрина гидрохлорида 5% для инъекций ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ Глава 1. КАЧЕСТВЕННЫЙ АНАЛИЗ 1.1. АНАЛИЗ АДРЕНАЛИНА Реакция азосочетания Реакция с фосфорномолибденовой кислотой Реакция окисления. Тонкослойная хроматография (ТСХ) 1.2. Анализ норадреналина ... Полное содержание

Подобный материал:

• Курсовая работа по технологии лекарств тема: «Законодательные основы нормирования производства, 628.18kb.
• Тематический план срс модуля 2 по фармацевтической химии для студентов 3 курсу фармацевтического, 35.44kb.
• Методические указания по проведению лекций и семинарско-практических занятий дисциплина, 919.56kb.
• Реферат тема: «Стандартизация и сертификация лекарственных средств», 215.3kb.
• «Дни фармацевтической промышленности. Инновационные решения для производства и обеспечения, 144.39kb.
• Научно-практическая конференция для специалистов фармацевтической отрасли в рамках, 50.59kb.
• Полномочия, 47.68kb.
• Кафедра фармацевтической и токсикологической химии медицинского факультета Фармацевтическая, 361.13kb.
• Готовления препаратов из лекарственных средств и вспомогательных веществ путем придания, 256.6kb.
• Тематический план лекций по фармацевтической химии, 76.43kb.

2.4. БИОЛОГИЧЕСКИЙ МЕТОД

Определение активности адреналина основано на его способности вызывать повышенное артериальное давление у кроликов.

Стандартный препарат. Стандартным препаратом при испытании адреналина является синтетический кристаллический адреналин, сохраняемый в запаянных ампулах оранжевого стекла в защищенном от света месте. Вскрытые ампулы должны храниться в вакуум-эксикаторе над пятиокисью фосфора.

Описание метода. Для опытов берут здоровых кроликов обоего пола, весом 2,5 – 3 кг. Опыт проводят под уретановым (1г на 1 кг веса животного) или эфирным наркозом.

У кроликов на одной стороне отпрепаровывают яремную вену, а на противоположной стороне шеи - сонную артерию. Артерию соединяют с ртутным манометром при помощи каучуковой трубки, наполненной противосвертывающим раствором. Введение препаратов производят в яремную вену через вставленную в нее канюлю или при помощи очень тонкой иглы. За 15 минут до начала испытания кролику вводят внутривенно 1 мл 0,5% раствора атропина сульфата. Введение отдельных доз раствора адреналина производят с постоянной скоростью (1 мл в 5 сек). Каждое новое введение производят через 5 мин, считая с момента возвращения к норме кривой кровяного давления после предыдущего введения. Общий объем вводимой дозы не должен превышать 1 мл. Измерение высоты подъема производят от истинной абсциссы.

Целью опыта является определение доз, вызывающих подъем кровяного давления на одну и ту же высоту при введении испытуемого и стандартного растворов.

Испытание 0,1% раствора адреналина. Препарат разводят 0,9% раствором хлорида натрия в соотношении 1 :50 для получения раствора 1 : 50000.

Стандартный препарат растворяют в 0,1 н растворе соляной кислоты в отношении 1 : 100. Полученный раствор доводят до концентрации 1 : 1000. Путем дальнейшего разведения этого раствора в 50 раз 0,9% раствором хлорида натрия достигают нужной для опыта концентрации 1 : 50000.

Определив сначала дозу раствора стандартного препарата, способную вызвать субмаксимальный для данного животного подъем кровяного давления, подбирают дозу исследуемого раствора, способную дать то же действие. Подыскав соответствующие дозы повторным введением растворов исследуемого и стандартного препаратов адреналина, убеждаются в одинаковой силе действия найденных доз растворов.

Зная содержание стандартного препарата в найденной дозе стандартного раствора, вычисляют содержание адреналина в исходном растворе испытуемого образца.

Для каждого испытания требуются средние данные, полученные при опытах не менее чем на 3-х кроликах.

Глава 3. ФАРМАКОПЕЙНЫЕ ПРЕПАРАТЫ

3.1. Solutio Adrenalini hydrochloride 0,1%

Состав: Адреналина 1 г

Натрия хлорида 8 г

Хлоробутанолгидрата 5 г

Натрия метабисульфата 1 г

Раствора соляной кислоты 0,01 н до 1 л


Раствор фильтруют, разливают в асептических условиях в ампулы нейтрального оранжевого стекла по 1 мл (раствор для инъекций) или в герметически закрытые флаконы того же стекла емкостью 10 мл, заполняя их доверху.

Описание. Бесцветный прозрачный раствор.

Подлинность.

• 1 мо препарата смешивают с 4 мл воды и прибавляют 1 каплю раствора хлорида окисного железа; тотчас же появляется изумрудно-зеленое окрашивание, которое от прибавления 1 капли раствора аммиака переходит в вишнево-красное и затем в коричнево-красное.
  
• К 1 мл препарата прибавляют 2 мл 1% раствора йодата калия, 1 мл разведенной фосфорной кислоты и смесь нагревают в течение 1 минуты при 60°С; появляется стойкое, интенсивное красно-фиолетовое окрашивание.
  
• К 1 мл препарата прибавляют 5 мл буферного раствора (рН = 3,6) и 2 мл 0,1 н. раствора йода, оставляют на 5 мин, после чего смешивают с 3 мл 0,1 н. раствора тиосульфата натрия. Рствор сохраняет темно-красное окрашивание (отличие от НА)
  

рН 3,0 – 3,5

Тяжелые металлы 10 мл препарата не должны содержать тяжелые металлы.

Хранение. Список Б. В прохладном, защищенном от света месте.

Высшая разовая доза под кожу 1 мл

Высшая суточная доза под кожу 5 мл

Примечание. Для инъекций применяют раствор адреналина гидрохлорида 0,1% в ампулах (Solutio Adrenalini hydrochloridi 0,1% pro injektionibus)

3.2. Noradrenalini hydrotartas.
Норадреналина гидротартрат

Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок без запаха, горького вкуса. Легко изменяется под действием света и кислорода воздуха.

Растворимость. Легко растворим в воде, мало растворим в спирте, практически нерастворим в эфире и хлороформе.

Подлинность.

• 5 мл препарата растворяют в 5 мл воды, прибавляют 1 каплю раствора хлорида окисного железа; появляется изумрудно-зеленое окрашивание, которое от прибавления одной капли раствора аммиака переходит в вишнево-красное, а затем в оранжево-красное.
  
• 1 мл 0,1% раствора препарата разводят гидротартратным буферным раствором с рН = 3,56 до объема 10 мл и прибавляют 2 мл 0,1 н раствора тиосульфата натрия. Раствор должен быть бесцветным или слабо-розовым (отличие от адреналина, вызывающего интенсивное красное окрашивание). Повторяют определение с 10 мл буферного раствора с рН = 6,5; образуется красно-фиолетовое окрашивание.
  

Раствор препарата (1 : 100) дает желтый осадок при прибавлении 0,5 мл раствора едкого натра.

Температура плавления 100 - 106° (плав мутный, препарат предварительно не высушивают).

Удельное вращение от -10° до -12° в пересчете на сухое вещество (2% водный раствор).

Удельный показатель поглощения. Е^1%_{1 см} при длине волны 279 нм от 769084 (0,005% водный раствор)

Кислотность рН = 3,5 – 5,0 (1% водный раствор)

Вода 0,05 г препарата (точная навеска) титруют реактивом К.Фишера. Содержание воды должно быть 4,5 – 6,0%.

Сульфатная зола из 0,2 г препарата должна быть невесомой.

Хранение. Список Б. В запаянных ампулах или в хорошо укупоренной таре, предохраняющей от действия света.

3.3. Solutio Noradrenolini hydrotartratis 0,2% pro injektionibus.
Раствор норадреналина гидротартрата 0,2% для инъекций

Состав: Норадреналина гидротартрата 1 г

Натрия метабисульфита 1 г

Натрия хлорида 8 г

Воды для инъекций до 1 л


Раствор фильтруют, разливают в ампулы нейтрального оранжевого стекла по 1 мл и стерилизуют текучим паром при 100 в течение 15 мин.

Описание. Бесцветная прозрачная жидкость

Подлинность. Препарат дает первую и вторую реакцию подлинности, указанные для «Noradrenalini hydrotartas».

рН = 3,0 – 4,5

Хранение. Список Б. В прохладном защищенном от света месте.

3.4. Ephedrine hydrochloridum
Эфедрина гидрохлорид

Описание. Бесцветные игольчатые кристаллы или белый кристаллический порошок без запаха, горького вкуса.

Растворимость. Легко растворим в воде, растворим в 95% спирте, практически нерастворим в эфире.

Подлинность

• 0,01 г препарата растворяют в 1 мл воды, прибавляют 0,1 мл раствора сульфата меди и 1 мл раствора едкого натра; появляется синее окрашивание. При взбалтывании этого раствора с 1 мл эфира, эфирный слой окрашивается в фиолетово-красный цвет, водный слой сохраняет синее окрашивание.
  
• 0,05 г препарата растворяют в 1 мл воды, прабавляют кристаллик феррицианида калия и нагревают до кипения; появляется запах бензальдегида.
  
• 0,01 г препарата дает с 0,5 мл разведенной азотной кислоты и 0,5 мл раствора нитрата серебра, образуется белый творожистый осадок, растворимый в растворе аммиака.
  

Температура плавления 216 - 220

Удельное вращение от -33 до 36 (5% водный раствор).

Кислотность 0,2 г препарата растворяют в 5 мл свежепрокипяченной и охлажденной воды, прибавляют 1 каплю раствора метилового красного; появившееся красное окрашивание должно переходить в желтое от прибавления не более 0,15 мл 0,05Н раствора едкого натра.

Соли аммония 0,3 г препарата помещают в пробирку, приливают 2 мл воды и 1 мл раствора натра. В верхнюю часть пробирки вкладывают тонким слоем небольшое количество ваты. Сверху пробирки помещают смоченную водой красную лакмусовую бумагу. Пробирку помещают на пять минут в водяную баню с t = 0,5. Не должен выделяться аммиак, который определяют по запаху и посинению красной лакмусовой бумаги.

Сульфаты. Раствор 0,2 г препарата в 10 мл Н₂О должен выдерживать испытания на сульфаты (не более 0,05% в препарате).

Органические примеси. Раствор 0,15 г препарата в 5 мл концентрированной серной кислоты должен быть бесцветным.

Хранение. Список Б. Вхорошо укупоренной таре, предохраняющей от действия света.

Высшая разовая доза внутрь и под кожу 0,05 г.

Высшая суточная доза внутрь и под кожу 0,15 г.

3.5. Solutio Eppedrini hydrochloridi 5% pro injektionibus
Раствор эфедрина гидрохлорида 5% для инъекций

Состав: Эфедрина гидрохлорида 50 г

Воды для инъекций до 1 л


Раствор фильтруют, разливают в ампулы нейтрального стекла по 1 мл и стерилизуют текучим паром при 100 в течение 30 мин.

Описание. Прозрачная бесцветная жидкость.

Подлинность. 1 мл препарата разводят водой до 5 мл. Полученный раствор дает реакции подлинности, указанные для «Ephedrini hydrochloridum».

рН = 4,5 – 7,0

Хранение. Список Б. В защищенном от света месте.

Высшая разовая доза внутрь и под кожу 0,05 г

Высшая суточная доза внутрь и под кожу 0,15 г.

ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ

Глава 1. КАЧЕСТВЕННЫЙ АНАЛИЗ

1.1. АНАЛИЗ АДРЕНАЛИНА

1. Реакция с хлоридом окисного железа
   

Адреналина гидрохлорид при добавлении FeCl₃ окрашивается в изумрудно-зеленый цвет, переходящий от прибавления одной капли раствора аммиака в вишнево-красный, а затем в оранжево-красный.

2. Реакция азосочетания
   

Адреналин, как соединение, содержащее фенольную группу, обладает способностью сочетаться с солями диазония. В качестве диазореактивов применяют обычно диазотированную сульфаниловую кислоту. При взаимодействии диазобензосульфокислоты с фенолами в щелочной среде образуются азокрасители; сочетание протекает в пара- или орто- положении к гидроксильной группе.

Выполнение реакции : 1 мл 0,1% адреналина гидрохлорида растворяем в воде, прибавляем 5 – 6 капель диазореактива и через 3 – 5 мин – 2 – 3 капли раствора едкого натра; при этом возникает темно-красное окрашивание.

3. Реакция с фосфорномолибденовой кислотой
   

Фосфорномолибденовая кислота в кислом или нейтральном растворе не окисляет слабые восстановители. В щелочной среде окислительная способность фосфорномолибденовой кислоты значительно повышается, в результате чего происходит окисление многих соединений, в молекуле которых содержится фенольный гидроксил; фосфоромолибдат при этом восстанавливается до так называемой молибденовой сини, как следствие этого появляется синее или зеленое окрашивание.

Выполнение реакции: 1 мл 0,1% адреналина гидрохлорида растворяем в 1 мл воды и прибавляем 5 – 6 капель 10% раствора фосфорномолибденовой кислоты; адреналина гидрохлорид 0,1% приобретает зеленое окрашивание; после прибавления раствора аммиака появляется интенсивное темно-фиолетовое окрашивание.

4. Реакция окисления.
   

Препараты, содержащие в молекуле фенольный гидроксил окисляются раствором йодата калия в кислой среде, образуя окрашенные комплексы.

Выполнение реакции: к 1 мл 0,1% адреналина гидрохлорида прибавляют 1 мл воды, по 5 капель раствора фосфорной кислоты и 1% раствора йодата калия и нагреваем на водяной бане.

5. Тонкослойная хроматография (ТСХ)
   

На стеклянную пластинку наносим силикагель, гранулы которого предварительно измельчаем на шаровой мельнице, просеиваем через сито с размером отверстий 0,1 мм, обрабатываем концентрированной соляной кислотой, отмываем до нейтральной реакции дистиллированной водой и сушим на воздухе. Затем на тонкий слой силикагеля наносим каплю адреналина гидрохлорида 0,1%, помещаем в камеру с 70% этиловым спиртом, закрываем крышкой. Затем рассчитываем значение величины R_f, который должен быть равен 0,13, что свидетельствует о подлинности препарата.

6. Спектр поглощения.
   

0,005% раствор в 0,01 н растворе соляной кислоты, адреналина гидротартрата имеет максимум поглащения при длине волны 279 нм.

1.2. АНАЛИЗ НОРАДРЕНАЛИНА

1. Реакция с нингидрином.
   

0,005 г препарата растворяют в 1 мл воды, прибавляем 1 к4аплю 0,1 н раствора едкого натра, несколько капель 0,25% раствора нингидрина и кипятим смесь 1-2 мин; появляется желтое окрашивание.

2. Реакция с сульфитам меди в щелочной среде.
   

0,01 г препарата растворяем в 1 мл воды, прибавляем 0,1 мл раствора сульфата меди и 1 мл раствора едкого натра; появляется синевато-зеленое окрашивание.

3. Тонкослойная хроматография (ТСХ).
   

Как и в случае адреналина в качестве сорбента используем тонкий слой силикагеля в виде порошка, либо в виде водной суспензии; в качестве растворителя также используем 70% этиловый спирт. Коэффициент подвижности R_f равен 0,12.

4. Спектр поглощения.
   

Определяем на спектрометрах. Анализируемый раствор помещается в специальную кювету (ультрафиолетовая спектроскопия), источник света подается в устройство монохроматора, а оттуда свет попадает в кюветное отделение, после того как раствор поглощает свет, спек р определяется индикатором. Максимум поглощения 0,005% водного раствора норадреналина гидротартрата равен 279 нм.

5. Спектр флюоресценции.
   

Флюресценция норадреналина вызывается облучением коротковолновым ультрафиолетовым светом. Так, норадреналина гидротартрат флуоресцирует в ультрафиолетовом свете желто-зеленым светом. Максимум флуоресценции норадреналина гидротартрата составляет 505 нм.

1.3. АНАЛИЗ ЭФЕДРИНА

1. Реакция образования окрашенных комплексов меди:
   

0,01 г препарата растворяем в 1 мл воды, прибавляем 0,1 мл раствора сульфата меди и 1 мл раствора едкого натра. Появляется синее окрашивание, при взбалтывании этого раствора с 1 мл эфира эфирный слой окрашивается в фиолетово-красный цвет, что служит реакцией отличия эфедрина от остальных препаратов этой группы, у которых эфирный слой остается бесцветным.

Эфедрин, кроме того. дает следующую реакцию:

0,01 г препарата в 1 мл воды добавляем 8-10 капель раствора феррицианида калия и 2-3 капли раствора едкого натра; при нагревании ощущается запах бензальдегида.

2. Тонкослойная хроматография (ТСХ).
   

На стеклянную пластинку размером 9x12 см наносим слой окиси алюминия толщиной 0,6 мм.

В качестве растворителей используем смесь бензол-метанол (9:1), помещаем в этот раствор пластинку и рассчитываем потом R_f, который должен быть 0,15.

3. Хроматография на бумаге (БХ).
   

В данном случае неподвижной фазой служит вода, адсорбированная на бумаге. В качестве растворителя используем: 1) месь циклогексан-диэтиламин в соотношении 9:1, при этом Rp = 0,47; 2) смесь петролийный эфир-этиламин (9:1), R_f = 0,26; 3) смесь циклогексан-хлороформ-диэтиламин (7:2:1), R_f = 0,76.

4. Флюоресценция.
   

К 1-2 мг эфедрина гидрохлорида в сухой пробирке прибавляем 7-8 капель реактива Марки (раствор фармальдегида в H₂SO₄) и 5 – 7 капель воды. Наблюдается интенсивно голубая флюоресценция.

Глава 2. КОЛИЧЕСТВЕНЫЙ АНАЛИЗ

2.1. АНАЛИЗ АДРЕНАЛИНА

Около 0,15 г тонкоизмельченного и высушенного препарата (точная навеска) растворяем в 20 мл ледяной уксусной кислоты, слегка нагревая до 40°С в случае медленного растворения и титруем 0,1 н раствора хлорной кислоты до голубовато-зеленой окраски. Индикатор – метиловый фиолетовый.

1 мг 0,1 н раствора хлорной кислоты соответствует 0,03333 г адреналина.

При проведении титрования было израсходовано 8 мл хлорной к4ислоты. Таким образом, содержание адреналина в исходном препарате составляет 0,26664.

2.2. АНАЛИЗ НОРАДРЕНАЛИНА

5 мл препарата разводим водой в мерной колбе до 100 мл. К 10 мл полученного раствора прибавляем 0,2 мл железо-цитратного реактива и 1 мл аминоуксусной буферной смеси, оставляем на 10 минут и измеряем оптическую плотность окрашенного раствора на фотонитроколориметре при длине волны 530 нм в кювете с толщиной слоя 1 см.

Содержание норадреналина в 1 мл препарата составляет 0,0019 г.

2.3. АНАЛИЗ ЭФЕДРИНА

0,1 г препарата (точная навеска) растворяем при нагревании в 10 мл ледяной уксусной кислоты, после охлаждения прибавляем 5 мл предварительно нейтрализованного раствора ацетата окисной ртути и титруем 0,1 н раствором хлорной кислоты до голубого окрашивания. Индикатор – кристаллический фиолетовый.

1 мл 0,1 н раствора хлорной кислоты соответствует 0,02017 эфедрина.

На титрование пошло 10 мл хлорной кислоты, содержание эфедрина в препарате составляет 0,2017.

ВЫВОДЫ:

1. Нами были проведены наиболее широко используемые методы количественного и качественного анализа производных арилалкиламинов. При проведении ТСХ для адреналина был определен коэффициент подвижности R_f, равный 0,13, что соответствует норме т.е. наш исследуемый препарат отвечает требованиям ГФ по показателю «Подлинность».
   
2. Во время ультрафиолетового спектрафотометрического анализа лекарственных средств аралалкиламинов нами были зафиксированы максимумы поглощения длин волн в радиусе 279 нм.
   

СПИСОК ИСПОЛЬЗОВАННОЙ ЛИТЕРАТУРЫ:

1. Э.М. Аксенова. Руководство к лабораторным занятиям по фармацевтической химии. / М.: «Медицина», 1987г.
   
2. Р.Н. Аляутдин. Фармакология. / М.: 2004 г.
   
3. А.П. Арзамасцев. Фармакопейный анализ. / М.: «Медицина», 1971г.
   
4. М.П. Максютина. Методы идентификации лекарственных препаратов. / Киев «Здоровье», 1978г.
   
5. Г.А. Мелентьева. Фармацевтическая химия, Т. 2 / М.: «Медицина», 1976г.
   
6. Е.А. Мухин. Фармакология гипертензивных средств / Кишинев, 1974г.
   
7. Б.А. Райсберг. Руководство по количественному анализу лекарственных препаратов / М.: «Медицина», 1978г.
   
8. М.Ф. Старцев. Идентификация лекарственных препаратов / М.: «Медицина», 1981г.
   
9. А.М. Хамцкий. Фармацевтическая химия / Ленинград. «Медицина», 1966г.
   
10. Д.А Харкевич. Фармакология. / М.: «Медицина», 1980г.
    
11. ГФ IX / М.: «Медгиз», 1961г.