Geum.ru

Автореферат диссертации на соискание ученой степени

Вид материалаАвтореферат диссертации

Содержание


Эндотелиальная дисфункция: э
Нарушение регуляции просвета сосудов
Практические рекомендации.
Список работ, опубликованных по теме диссертации
Список сокращений
Подобный материал:
1   2   3

IFNγ





Индукция экспрессии HLA-G, TRAIL, Fas, FasL клетками трофобласта






Ингибирование цитотоксических эффектов NK-клеток и CD8+ лимфоцитов, сохранение секреции IFNγ NK-клетками



Рисунок 4. Иммунологические механизмы контроля физиологического развития плаценты.


Нарушение инвазии трофобласта, нарушения строения ткани плаценты, воспалительные реакции в ткани плаценты, гипоксия, увеличенная продукция IL-6, IL-8, TGFβ



Преимущественная секреция антиангиогенных факторов

Увеличение интенсивности процессов апоптоза в клетках трофобласта, снижением экспрессии HLA-G

Нарушение антиоксидантных механизмов защиты



Перекисное окисление липидов



Запуск процессов апоптоза клеток плаценты



Компенсаторное увеличение продукции ангиогенина и PDGF

Активация цитотоксических лимфоцитов, NK-клеток и моноцитов матери, повышение их адгезионной способности

Эндотелиальная дисфункция: экспрессия адгезионных молекул; секреция хемокинов и провоспалительных цитокинов.

Активация тромбообразования: повышенная секреция тромбомодулина, протеина C, PAF; ингибирование растворения фибрина за счет стимуляции PAI-I.

Нарушение регуляции просвета сосудов: повышенная секреция PGI2, NO, PAF, ET








Увеличение продукции тканью плаценты TGFβ, sFas, sFasL и экспрессии TRAIL, снижение экспрессии TGFβ-R1, СD105

Инициация воспалительных реакций





Клетки плаценты ингибируют активность цитотоксических лимфоцитов и NK-клеток матери при одновременном снижении чувствительности клеток плаценты к апоптогенным стимулам



Тромбоз, нарушение микроциркуляции

Рисунок 5. Иммунопатогенетические механизмы развития гестоза.

Перечисленные механизмы защиты против цитотоксических эффектов лимфоцитов матери действуют и на начальных этапах развития плаценты, что указывает на сходство молекулярных механизмов при реализации защиты ткани плаценты в норме и при патологии. Однако необходимо отметить, что запуск указанных компенсаторных механизмов при гестозе может иметь отрицательное значение для формирования ткани плаценты в условиях нарушенного равновесия между факторами, контролирующими ангиогенез и апоптоз. Так TGFβ обладает ингибирующим действием в отношении цитотоксических лимфоцитов, но также обладает мощным антиангиогенным действием, что в условиях обнаруженной нами повышенной экспрессии TSP-1 может приводить к нарушению формирования ткани плаценты и последующей гипоксии. Выявленная нами повышенная продукция в ткани плаценты ангиогенина и PDGF может нарушать формирование ткани плаценты при гестозе, например, за счет переключения стратегии развития сосудистого русла от неразветвляющего к разветвляющему ангиогенезу или за счет индукции пролиферации эндотелиальных клеток в уже сформированных структурах плаценты. При этом снижение экспрессии клетками плаценты Fas, обнаруженное нами при гестозе, способствует нарушению контроля формирования новых сосудов. Эти предположения подтверждаются продемонстрированными нами нарушениями в строении ткани плаценты при гестозе.

Результатом активации цитотоксических клеток матери и воспалительной реакции в плаценте, продукции провоспалительных цитокинов, активных радикалов кислорода вследствие нарушения активности антиокислительной системы может стать активация лейкоцитов, проходящих через зону маточно-плацентарного кровообращения [Mellembakken J.R., 2002]. Параллельно развивается системная эндотелиальная дисфункция, сопровождающая гестоз. Об активации лейкоцитов свидетельствуют полученные нами данные об увеличении адгезионной активности мононуклеаров периферической крови при одновременном сдвиге в сторону повышенного содержания цитотоксических лимфоцитов, натуральных киллеров и NKT-клеток у беременных женщин с гестозом по сравнению со здоровыми беременными и здоровыми небеременными женщинами. Это позволяет рассматривать гестоз как иммунопатологическое состояние беременных, связанное с развитием хронического очага воспаления в плаценте. Повышение продукции активных радикалов кислорода в зоне маточно-плацентарного кровообращения может способствовать перекисному окислению липидов и их накоплению в сыворотке крови, что также может способствовать возникновению эндотелиальной дисфункции. В пользу этого свидетельствуют полученные нами данные об усиленном поглощении липидов эндотелиальными клетками и моноцитами\макрофагами при гестозе. Повышение концентрации sICAM-1 в сыворотке крови при гестозе тоже косвенно свидетельствует об активации эндотелиальных клеток сосудистого русла и об активированном состоянии лейкоцитов матери.

Таким образом, при гестозе происходит нарушение сбалансированной системы взаимодействий ткани плаценты и иммунной системы матери (Рисунок 5), что приводит к изменению цитокинового баланса в плаценте, сопровождающемуся нарушением строения плаценты, усиленной гибелью клеток трофобласта и эндотелиальных клеток сосудов плаценты, активацией лейкоцитов и эндотелиальных клеток организма матери. Нарушения механизмов антиоксидантной защиты и активация клеток иммунной системы матери обусловливает активацию эндотелиальных клеток кровеносного русла матери, что ведет к клиническим проявлениям гестоза.


Выводы.

1. Формирование ткани плаценты и развитие ее сосудистой сети при физиологически протекающей беременности контролируется иммунологическими факторами. В динамике от первого к третьему триместру повышается секреция клетками плаценты одних цитокинов (IFNγ), снижается секреция других цитокинов (IL-6, IL-8), снижается экспрессия не только проангиогенных факторов (VEGF, bFGF, PDGF, MMP-2, VEGF-R3), но и антиангиогенных факторов (TGFβ, TSP-1) и рецепторов (TGFβ-R1, CD105). Изменения локализации факторов, контролирующих процессы ангиогенеза в ткани плаценты, отражают физиологическую динамику ее развития.

2. Снижение экспрессии в клетках плаценты от первого к третьему триместру физиологически протекающей беременности проапоптогенных факторов (каспазы-2, каспазы-8, каспазы-9) и антиапоптогенного фактора Mcl-1 при одновременном повышении секреции ряда цитокинов (IL-4, IL-10) не сказывается на интенсивности процессов апоптоза в ткани плаценты. Для физиологической динамики развития ткани плаценты характерны изменения локализации апоптоза.

3. Подавление цитотоксических эффектов лимфоцитов матери при физиологически развивающейся беременности можно связать с изменениями экспрессии поверхностных рецепторов (FasL и TRAIL) и секреции их растворимых форм (sFasL) клетками плаценты.

4. При гестозе нарушение формирования ткани плаценты сопровождается усилением продукции антиангиогенных факторов (TGFβ, TSP-1, sVEGF-R1) и снижением экспрессии проангиогенных факторов (VEGF, bFGF, MMP-2, VEGF-R3), что ведет к нарушению физиологических процессов ангиогенеза.

5. При гестозе по сравнению с физиологически протекающей беременностью в третьем триместре в ткани плаценты наблюдается усиление секреции провоспалительных цитокинов (IL-6, IL-8) при сохранении уровней секреции противовоспалительных цитокинов (IL-4, IL-10), что свидетельствует в пользу развития процесса воспаления.

6. В третьем триместре при гестозе, как и в первом триместре физиологически протекающей беременности, реализуются сходные молекулярные механизмы поддержания жизнеспособности клеток плаценты и их защиты от цитотоксических эффектов лимфоцитов матери. К таким механизмам относятся: повышение продукции проангиогенных факторов (ангиогенина, PDGF), экспрессии TGFβ и рецептора TRAIL, увеличение секреции растворимых форм поверхностных рецепторов (sFas, sFasL), снижение экспрессии рецепторов (Fas, FasL, TGFβ-R1, CD105).

7. Местные иммунологические сдвиги в ткани плаценты при гестозе сопровождаются увеличением содержания в периферической крови активированных лимфоцитов (CD3+\HLA-DR+), цитотоксических лимфоцитов (CD3+CD8+, NK-клеток, NKT-клеток) при одновременном снижении содержания субпопуляции хелперов (CD3+CD4+), что свидетельствует о развитии клеточного цитотоксического иммунного ответа.

8. При гестозе моноциты периферической крови отличаются от моноцитов здоровых беременных женщин способностью к усиленной адгезии как к интактному, так и к активированному эндотелию. У лимфоцитов периферической крови беременных женщин с гестозом усилена адгезия к активированному эндотелию. Это свидетельствует о повышении функциональной активности мононуклеаров периферической крови при гестозе.

9. Сыворотка периферической крови беременных с гестозом содержит факторы, усиливающие интенсивность поглощения липидов эндотелиальными клетками и моноцитами периферической крови, и способствующие системному нарушению функций эндотелиальных клеток кровеносных сосудов.

10. Для гестоза характерны нарушения механизмов взаимного контроля функций клеток иммунной системы матери и клеток плаценты, изменения равновесия факторов, регулирующих процессы ангиогенеза и апоптоза, участвующих в формировании плаценты.


Практические рекомендации.
  1. С целью уточнения степени риска развития гестоза у женщин в первом, втором и третьем триместрах беременности следует определять в периферической крови содержание sICAM-1, повышение концентрации которого является ранним прогностическим признаком гестоза.
  2. У беременных женщин с целью уточнения степени риска развития гестоза рекомендуется проводить оценку интенсивности поглощения липидов из аутологичной сыворотки крови моноцитами периферической крови. Повышение интенсивности поглощения липидов моноцитами периферической крови является ранним прогностическим признаком гестоза.
  3. С целью выявления нарушений формирования плаценты рекомендуется наряду с морфологическим исследованием плаценты проводить иммуногистохимическое определение уровня экспрессии ангиогенных факторов VEGF, bFGF, MMP-2, VEGF-R3 и антиангиогенных факторов TSP-1, TGFb.


Список работ, опубликованных по теме диссертации:

Глава в учебнике для ВУЗ`ов:
  1. Соколов Д.И., Сельков С.А., Полякова В.О., Полянин А.А., Лапина Е.А., Колобов А.В., Пальцев М.А., Кветной И.М. Нейроиммуноэндокринология плаценты. // Пальцев М.А., Кветной И.М. Руководство по нейроиммуноэндокринологии. 2-е изд., учебник для ВУЗ`ов. –М.: ОАО «Издательство «Медицина», 2008. -с.417-442.


Статьи:
  1. Фрейдлин И.С., Соколов Д.И. Кооперативные эффекты цитокинов. // Современные проблемы аллергологии, иммунологии и иммунофармакологии. Сб. трудов. -Т.1: Москва, ВИНИТИ РАН. -2001. -с.311-324
  2. Д.И. Соколов, А.В. Селютин, С.А. Сельков. Методы оценки пролиферации эндотелиальных клеток. // Лабораторная диагностика. -2006. -Том 1. -№9. -с.15-18.
  3. Соколов Д.И. Васкулогенез и ангиогенез в развитии плаценты. // Журнал акушерства и женских болезней. – 2007. –Том.LVI. -№3. –с.129-133.
  4. Соколов Д.И., Селютин А.В., Лесничия М.В., Аржанова О.Н., Сельков С.А. Субпопуляционный состав лимфоцитов периферической крови беременных женщин с гестозом. // Журнал акушерства и женских болезней. – 2007. –Том.LVI. -№4. –с.17-23.
  5. Соколов Д.И., Старикова Э.А., Селютин А.В., Сельков С.А., Фрейдлин И.С. Оценка функции адгезии различных субпопуляций мононуклеаров периферической крови человека к эндотелиальным клеткам. // Медицинская иммунология. -2007. -№4-5. –с.473-478.
  6. Соколов Д.И. Иммунологические механизмы контроля апоптоза при развитии плаценты. // Медицинская иммунология. -2008. –Т.10. - №2-3. –с.125-138.
  7. Соколов Д.И., Колобов А.В., Лесничия М.В., Костючек И.Н., Боля К.В., Аржанова О.Н., Кветной И.М., Сельков С.А. Роль проангиогенных и антиангиогенных факторов в развитии плаценты. // Медицинская иммунология. -2008. –Т.10. - №4-5. –с.347-352.
  8. Соколов Д.И., Колобов А.В., Печерина Л.В., Крамарева Н.Л., Мозговая Е.В., Кветной И.М., Сельков С.А. Экспрессия VEGF и рецептора VEGF-R3 эндотелиальными клетками плаценты в норме и при гестозе. // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. -2008. –Т.145. -№ 3. –с.321-325.
  9. Соколов Д.И., Лесничия М.В., Селютин А.В., Климова В.А., Аржанова О.Н., Сельков С.А. Оценка функции адгезии к эндотелиальным клеткам различных субпопуляций мононуклеаров периферической крови беременных женщин в норме и при гестозе. // Регионарное кровообращение. -2008. -№9. –с.34-41.
  10. Соколов Д.И., Колобов А.В., Лесничия М.В., Боля К.В., Селютин А.В., Аржанова О.Н., Кветной И.М., Сельков С.А., Айламазян Э.К.. Продукция тканью плаценты проангиогенных и антиангиогенных факторов. // Молекулярная медицина. -2009. –№2. –с.49-53.
  11. Соколов Д.И., Лесничия М.В., Селютин А.В., Климова В.А., Аржанова О Н., Сельков С.А. Роль цитокинов в контроле развития плаценты в норме и при гестозе. // Иммунология. -2009. -№1. –с.22-27.
  12. Айламазян Э.К., Соколов Д.И., Сельков С.А. Гестоз и атеросклероз: общность патогенетических механизмов. // Журнал акушерства и женских болезней. – 2009. –Том.LVIII. -№1. –с.4-16.
  13. Соколов Д.И., Лесничия М.В., Аминова Э.А., Аржанова О.Н., Сельков С.А. Оценка концентрации sICAM-1 в сыворотке крови беременных и продукции sICAM-1 тканью плаценты. // Журнал акушерства и женских болезней. – 2009. –Том.LVIII. -№1. –с.44-49.
  14. Соколов Д.И., Лесничия М.В., Мирашвили М.И., Львова Т.Ю, Аржанова О.Н., Кветной И.М., Сельков С.А. Оценка интенсивности поглощения липидов сыворотки крови беременных эндотелиальными клетками. // Журнал акушерства и женских болезней. – 2009. –Том.LVIII. -№2. –с.57-64.

Тезисы докладов:
  1. Соколов Д.И., Колобов А.В., Печерина Л.В., Крамарева Н.Л., Мозговая Е.В., Кветной И.М., Сельков С.А. Экспрессия VEGF-R3 эндотелиальными клетками плаценты в норме и при гестозе. // Медицинская иммунология. -2006. –Том 8, №2-3. с.320-321.
  2. Колобов А.В., Соколов Д.И., Печерина Л.В., Крамарева Н.Л., Мозговая Е.В., Кветной И.М., Сельков С.А Морфологические и иммуногистохимические особенности клеток плаценты при гестозе. // Сборник материалов I съезда патологоанатомов Республики Беларусь. – 2006. -с.33-34.
  3. Соколов Д.И., Колобов А.В., Кветной И.М., Сельков С.А. Экспрессия VEGF-R3 эндотелиальными клетками линии EA.Hy926. // Цитология. - 2006. Vol. 48, с.799-800.
  4. Соколов Д.И., Колобов А.В., Лесничия М.В., Аржанова О.Н., Кветной И.М., Сельков С.А. Экспрессия проангиогенных и антиангиогенных факторов в плаценте. // Медицинская иммунология. -2007. –Том.9 -№.2-3. –с.262-263.
  5. Колобов А.В., Соколов Д.И., Лесничия М.В., Аржанова О.Н., Кветной И.М., Сельков С.А. Экспрессия антиангиогенных факторов в плаценте. // Сборник конференции «Актуальные вопросы клинической и экспериментальной медицины», г.Санкт-Петербург, СПб МАПО, 2007. -с.297.
  6. Колобов А.В., Соколов Д.И., Лесничия М.В., Крамарева Н.Л., Мозговая Е.В., Кветной И.М., Аржанова О.Н., Сельков С.А. Роль TGFβ-R1 в процессах ангиогенеза плаценты в норме и при гестозе. // Сборник конференции «Материалы первого регионального научного форума «Мать и дитя». -2007. -с.74.
  7. Соколов Д.И., Селютин А.В., Лесничия М.В., Аржанова О.Н., Сельков С.А. Субпопуляционный состав лимфоцитов периферической крови беременных женщин с гестозом. // Сборник конференции «Материалы первого регионального научного форума «Мать и дитя». -2007. -с.80.
  8. Соколов Д.И., Селютин А.В., Старикова Э.А., Лесничия М.В., Аржанова О.Н., Сельков С.А. Метод оценки адгезии субпопуляций мононуклеаров периферической крови к эндотелиальным клеткам. // Медицинская иммунология. -2007. –Том.9 -№.2-3. –С.161-162.
  9. Sokolov D.I., Kolobov A.V., Lesnichiya M.V., Kvetnoy I.M., Arzhanova O.N., Selkov S.A. Expression factors of angiogenesis in the placenta. // Virchows Archiv. -2007. –Vol.451. -№2. –P.385.
  10. Соколов Д.И., Колобов А.В., Лесничия М.В., Аржанова О.Н., Сельков С.А., Кветной И.М. Метод оценки интенсивности поглощения липидов эндотелиальными клетками. // Сборник конференции «Современные проблемы клинической цитоморфологии», СПб МАПО. -Санкт-Петербург. -2007. -с.103-104.
  11. Мирашвили М.И., Соколов Д.И., Лесничия М.В., Колобов А.В., Аржанова О.Н., Сельков С.А. Оценка интенсивности поглощения липидов эндотелиальными клетками. // Сборник тезисов 2-го регионального научного форума «Мать и дитя», Сочи. -2008. –с.55-56
  12. Лесничия М.В., Соколов Д.И., Мирашвили М.И., Аминова Э.В., Аржанова О.Н., Сельков С.А. Оценка концентрации sICAM-1 в сыворотке крови беременных и продукции sICAM-1 тканью плаценты. // Сборник тезисов 2-го регионального научного форума «Мать и дитя», Сочи. -2008. –с.51.
  13. Соколов Д.И., Колобов А.В., Лесничия М.В., Аржанова О.Н., Кветной И.М., Сельков С.А. Выраженность процессов ангиогенеза и апоптоза на разных этапах развития плаценты. // Российский иммунологический журнал. -2008. – Т.2. -№2-3. –С.296.
  14. Соколов Д.И., Колобов А.В., Лесничия М.В., Боля К.В., Селютин А.В., Аржанова О.Н., Кветной И.М., Сельков С.А. Экспрессия цитокинов тканью плаценты в норме и при гестозе. // Сборник тезисов 2-го регионального научного форума «Мать и дитя», Сочи. -2008. –с.85.

Список сокращений:

ЛПНП – липопротеины низкой плотности

ЛПОНП – липопротеины очень низкой плотности

bFGF – основный фактор роста фибробластов

Fas – рецептор суперсемейства TNFα

FasL – лиганд для рецептора Fas

ICAM-1 –молекула межклеточной адгезии-1

IFNγ – интерферон γ

IL – интерлейкин

IP-10 - интерферонγ-индуцибельный белок

MCP-1 –моноцитарный хемотактический протеин-1

MIG – монокин, индуцируемый гамма-интерфероном

MMP – металлопротеиназа матрикса

NK-клетки – натуральные киллеры

PDGF - тромбоцитарный ростовой фактор

RANTES –фактор, секретирующийся T-лимфоцитами после активации

sFas – секреторный вариант рецептора Fas

sFasL – секреторный вариант рецептора FasL

sICAM-1 – секреторный вариант рецептора ICAM-1

sVE-cadherin – секреторный вариант рецептора VE-cadherin

sVEGF-R1 – секреторный вариант рецептора VEGF-R1

TGFβ - трансформирующий ростовой фактор-β

TNFα – фактор некроза опухолей-α

TRAIL – TNF-подобный лиганд, индуцирующий апоптоз

TSP-1 - тромбоспондин-1

VE-cadherin –кадгерин эндотелия сосудов

VEGF – фактор роста эндотелия сосудов

VEGF-R – рецептор фактора роста эндотелия сосудов