Учебное пособие составлено в соответствии с программой по биохимии для студентов всех факультетов медицинских вузов. Оно предназначено для самостоятельной подготовки студентов и оптимизации их работы на практических занятиях

Вид материалаУчебное пособие

Содержание


Занятие 15. переваривание углеводов. основные углеводы организма. гликоген: структурная организация, синтез и распад.
Работа 1. Влияние слюны, желудочного сока и панкреатина на крахмал.
Ход работы.
Работа 2.Адсорбция глюкозы на волокнах целлюлозы.
Ход работы.
Контрольная проба.
Подобный материал:
1   ...   8   9   10   11   12   13   14   15   ...   30

ЗАНЯТИЕ 15.

ПЕРЕВАРИВАНИЕ УГЛЕВОДОВ. ОСНОВНЫЕ УГЛЕВОДЫ ОРГАНИЗМА. ГЛИКОГЕН: СТРУКТУРНАЯ ОРГАНИЗАЦИЯ, СИНТЕЗ И РАСПАД.


БИОМЕДИЦИНСКОЕ ЗНАЧЕНИЕ.

Нарушение пищеварения вызывается недостатком ферментов и биохимическими или механическими нарушениями процессов всасывания веществ в кишечнике.

Нарушения переваривания углеводов проявляются при недостатке (врожденном или приобретенном) амилолитических ферментов. Основным признаком этой патологии служит непереносимость отдельных углеводов. Часто наблюдается непереносимость лактозы, особенно у детей раннего возраста, вскармливаемых в течение длительного времени грудным молоком. Синдром мальабсорбции - нарушение всасывания нутриентов из пищеварительного тракта.

Наиболее важным углеводом организма человека является глюкоза. Она поступает с пищей, в глюкозу превращаются углеводы в печени, из глюкозы могут образоваться все остальные углеводы в организме. Она является универсальным топливом. Глюкоза превращается в гликоген в печени, и гликоген служит источником глюкозы в организме. Ряд наследственных заболеваний связан с нарушением обмена гликогена. Эти болезни получили название гликогенозов. Они возникают в связи с дефицитом или полным отсутствием ферментов, катализирующих процессы распада или синтеза гликогена, и характеризуются его избыточным накоплением в различных органах и тканях. Различают 9 типов гликогенозов (I-IX).

Работа 1. Влияние слюны, желудочного сока и панкреатина на крахмал.


ОБОРУДОВАНИЕ: термостат на 38оС, водяная баня на 100оС.

ПРИНЦИП МЕТОДА.

Крахмал подвергается перевариванию в желудочно-кишечном тракте до образования продуктов, имеющих свободный полуацетальный гидроксил (мальтоза, глюкоза).

Для выявления продуктов переваривания применяют реакцию Троммера (см. занятие 5, работа 1).

ХОД РАБОТЫ.

В 4 пробирки отмерить следующие реактивы:

№№ пробы

1 % раствор крахмала, мл

слюна

1:10,

мл

желудоч-ный сок, мл

панкреатин

мл.

результат пробы Троммера

1.

1.0

1.0

-

-




2.

1.0

-

1.0

-




3.

1.0

1.0

1.0

-




4.

1.0

-

-

2.0





Для инкубации пробирки поместить в термостат при 370 на 30 минут. После инкубации содержимое каждой пробирки проанализировать на присутствие продуктов расщепления полисахаридов с помощью реакции Троммера.

РЕЗУЛЬТАТЫ: (занести в таблицу)

ВЫВОДЫ (по результатам пробы сделать вывод о влиянии различных пищеварительных соков на крахмал):


Работа 2.Адсорбция глюкозы на волокнах целлюлозы.



ПРИНЦИП МЕТОДА.

Целлюлоза – один из наиболее распространенных видов пищевых волокон – полисахаридов, которые не перевариваются в желудочно-кишечном тракте под влиянием пищеварительных ферментов, но играют важную роль в регуляции функций кишечника. В данной работе в качестве модели пищевого волокна используется вата, которая представляет собой практически чистую целлюлозу. Способность глюкозы адсорбироваться на поверхности волокон целлюлозы изучается с помощью количественного определения глюкозы в пробе глюкозоксидазным методом (работа описана в занятии «Ферменты. Специфичность действия»).

ХОД РАБОТЫ.

Опытная проба. В пробирку отмерить 1 мл стандартного раствора глюкозы с концентрацией 5,5 мМ/л, внести 0,1 г сухой гидрофильной ваты и поставить пробирку в термостат при 38оС на 1 час. После инкубации добавить 3 мл рабочего реактива, размешать стеклянной палочкой и оставить пробирку на 15 минут при комнатной температуре целлюлозы для развития окраски. Затем жидкость перенести в кювету для колориметрии (в пробирке отжать вату стеклянной палочкой) и определить оптическую плотность при красном светофильтре.

Контрольная проба. В пробирку отмерить 1 мл стандартного раствора глюкозы с концентрацией 5,5 мМ/л, поставить пробирку в термостат при 38оС на 1 час. После термостатирования добавить 3 мл рабочего реактива и оставить пробирку на 15 минут при комнатной температуре для развития окраски. Затем жидкость перенести в кювету для колориметрии и определить оптическую плотность при красном светофильтре.


РАСЧЕТ. Величину адсорбции можно определить как разность концентрации глюкозы в опытной и контрольной пробах.

В контрольной пробе концентрация известна: 5,5 мМ/л.

В опытной пробе остаточную концентрацию глюкозы рассчитать по формуле:

Dо . 5,5

Сх = ---------- , где

D к

Dо – оптическая плотность пробы,

D к – оптическая плотность контрольной пробы.

Величина адсорбции равна: 5,5мМ - Сх

РЕЗУЛЬТАТЫ:


ВЫВОДЫ: