Geum.ru

Тезисы докладов

Вид материалаТезисы
Изучение генетической нестабильности у потомства мышей, облученных малыми дозами излучений с высокими значениями лпэ in vivо
Г.Д.Засухина, Ж.М.Шагирова, И.М.Васильева, В.Ф.Михайлов, Л.Н.Ушенкова
Подобный материал:
1   ...   55   56   57   58   59   60   61   62   ...   78

ИЗУЧЕНИЕ ГЕНЕТИЧЕСКОЙ НЕСТАБИЛЬНОСТИ У ПОТОМСТВА МЫШЕЙ, ОБЛУЧЕННЫХ МАЛЫМИ ДОЗАМИ ИЗЛУЧЕНИЙ

С ВЫСОКИМИ ЗНАЧЕНИЯМИ ЛПЭ IN VIVО




С.И.Заичкина 1), О.М.Розанова 1), А.Х. Ахмадиева1), Г.Ф.Аптикаева 1), Е.Н.Смирнова 1), С.П.Романченко 1), С.С.Сорокина 1), А.Р.Дюкина 1), О.А.Вахрушева 1), В.Н.Пелешко 2)



1)Институт теоретической и экспериментальной биофизики РАН, Пущино

2)ГНЦ РФ Институт физики высоких энергий, Протвино


Целью настоящего проекта являлось изучение генетической нестабильности у потомства мышей, облученных малыми дозами излучений с высокими значениями ЛПЭ in vivо, с помощью микроядерного теста и по скорости роста перевиваемой асцитной карциномы Эрлиха. Облучение мышей линии SHK проводилось круглосуточно в поле излучения за верхней бетонной защитой Серпуховского ускорителя протонов с энергией 70 ГэВ (У-70 ИФВЭ, Протвино) в течение времени, необходимого для накопления доз в диапазонах 0.17-30 сГр (1 сГр/сут) и 0.5–16 сГр (0.43 сГр/сут). Ускоренными ионами углерода с энергией 200 МэВ/нуклон в области доз 10-150 сГр мышей облучали на «Нуклотроне» (ОИЯИ, г. Дубна). Для выявления адаптивного ответа (АО) через 24 ч соответствующие группы мышей облучались выявляющей дозой 1.5 Гр (1 Гр/мин) рентгеновского излучения. Исследование генетической нестабильности проводили на мышах F1 – F3 поколений, рожденных от облученных самцов. Спаривание с необлученными самками проводили через 15 дней после облучения. Для определения уровня цитогенетического повреждения через 28 ч после облучения животных забивали методом цервикальной дислокации и по стандартной методике готовили препараты костного мозга. Скорость роста солидной формы асцитной карциномы Эрлиха и выживаемость мышей после близкой к минимально летальной дозе 7 Гр определяли по стандартным методикам. В результате проведенных экспериментов было показано, что у мышей в F1, F2 и F3 поколениях, рожденных от самцов, облученных в дозах 0.17, 9.7, 20.4 и 30.5 сГр при мощности дозы 1 сГр/сут, спонтанный уровень цитогенетических нарушений был таким же, как у самцов, рожденных от необлученных родителей; достоверного изменения в радиочувствительности не было, однако при облучении потомков по схеме АО, то есть при облучении адаптирующей дозой 10 сГр и 1.5 Гр выявляющей дозы рентгеновского излучения также, как и у родителей, наблюдалось отсутствие АО. У самцов F1 и F2 поколений, рожденных от самцов, облученных дозами 0.5 и 16 сГр при мощности 0.43 сГр/сут, спонтанный уровень цитогенетических нарушений был таким же, как у самцов, рожденных от необлученных родителей. У мышей, рожденных от самцов, облученных дозой 0.5 сГр, в F1 АО отсутствовал, как и у их отцов, но индуцировался во втором поколении. У мышей, рожденных от самцов, облученных в дозе 16 сГр, наблюдалось отсутствие индукции АО как в F1, так и в F2 поколениях. Однако у потомков F1 и F2 родителей, которые были облучены в дозе 16 сГр в присутствии иммунномодулятора дибазола, восстанавливалась способ-ность к индукции АО. У самцов мышей, облученных в дозе 10 сГр уско-ренными ионами углерода, АО индуцировался, тогда как у их потомков F1 и F2 способность к индукции АО не обнаружена. Исследование потомков облученных самцов не выявило изменений как по скорости роста опухолей, так и по выживаемости после летальной дозы облучения.

Таким образом, было показано, что изменение свойств потомков зависит от дозы и мощности дозы облучения, от обработки родителей иммунномодуляторами и сохраняется по крайней мере в трех поколениях. Исходя из этих данных, мы считаем, что для корректной оценки генетической нестабильности in vivo, индуцированной малыми дозами облучения, у потомков животных необходимо исследовать не только уровень спонтанных цитогенетических нарушений, но и генетические эффекты по другим критериям.


НОВЫЕ ПОДХОДЫ К ЗАЩИТЕ КЛЕТОК ЧЕЛОВЕКА ОТ РАДИАЦИИ В ЗАВИСИМОСТИ ОТ ИНДИВИДУАЛЬНЫХ ОСОБЕННОСТЕЙ ГЕННОГО ПОЛИМОРФИЗМА

Г.Д.Засухина1), Ж.М.Шагирова1), И.М.Васильева1), В.Ф.Михайлов2), Л.Н.Ушенкова2)



1) Институт общей генетики им. Н.И. Вавилова РАН, Москва

2) Государственный научный центр РФ Институт биофизики Федерального медико-биологического агенства


Одним из подходов для повышения устойчивости клеток человека к мутагенам, в том числе к радиации, является применение антимутагенов, которые позволяют в определенной степени компенсировать первичные (наследственные)или вторичные дефекты, связанные с повышенной чувствительностью клеток к мутагенам. Повышение устойчивости клеток к мутагенам известно и при адаптивном ответе (АО), когда обработка малыми дозами радиации или химических мутагенов (адаптирующие факторы) после 4-5 часов инкубации формирует устойчивость клеток к повреждающим концентрациям мутагенов. Однако до настоящего времени остается неясным, одни и те же или различные системы обеспечивают клетке повышение устойчивости при воздействии антимутагенами и адаптирующими факторами. Одна из задач проведенных исследований была посвящена разработке подходов к решению этой проблемы.

С этой целью были использованы радиочувствительные клетки синдрома Дауна (первичные и перевиваемые) и в качестве контроля радиоустойчивые клетки, которые обрабатывались природными (ретинол) и синтетическими (краун-соединения) антимутагенами и адаптирующими факторами (тепловой шок, низкие концентрации хлорида кадмия).

Второй задачей было сравнительное изучение эффективности защиты радиочувствительных и радиоустойчивых клеток, обработанных антимутагенами и адаптирующими факторами, в зависимости от особенностей полиморфных генов детоксикации (GSTM1, GSTT1, GSTP1), TP53 и др. для оценки индивидуального вклада отдельных генов или их ассоциаций в формирование устойчивости клеток при воздействии повреждающей концентрации мутагена. При этом исследовали спектр белкового полиморфизма в радиочувствительных и радиоустойчивых клетках. Такой подход, основанный на исследовании генного и белкового полиморфизма, использован впервые, тогда как ранее применяли эмпирический подбор антимутагенов и адаптирующих факторов для защиты клеток человека от радиации и химических мутагенов.

Таким образом, показана возможность повышения устойчивости клеток человека, в том числе и радиочувствительных, на основе генного полиморфизма к действию мутагенов разной природы, что может служить новым подходом для повышения устойчивости клеток к мутагенам и компенсации некоторых дефектов при ряде наследственных заболеваний.